首页 > 文献资料
-
人工构建含丙型肝炎病毒核糖体插入位点的双顺反子表达载体
目的:研究丙型肝炎病毒核糖体插入位点启动翻译蛋白质功能,构建双顺反子真核表达载体.方法:逆转录PCR(RT-PCR)扩增丙型肝炎基因组中核糖体插入位点序列(IRES),定向克隆到pcDNA3-S质粒多克隆酶切位点中.在IRES下游克隆乙型肝炎病毒核心基因,测序鉴定后获得的质粒经脂质体转染hepG2细胞,间接免疫荧光染色和Western-blot检测.结果:在间接免疫荧光染色后,荧光显微镜下可见乙型肝炎病毒S基因和核心基因表达.转染细胞破碎后免疫沉淀检测和图像分析表明,两种基因有相似的表达量.结论:人为截断HCV 5'NTR区17个碱基,并不影响IRES对下游基因蛋白质翻译,为成功构建了含丙型肝炎病毒IRES的双顺反子表达载体打下基础.
-
肿瘤基因治疗中腺病毒载体的转导靶向
重组DNA技术的发展使得肿瘤基因治疗的应用范围越来越广泛,已有部分代替那些传统疗法(外科手术、化疗和放疗)的趋势.但目前存在两个重要的问题需要解决:(1)现有的载体系统缺少组织特异性;(2)现行的基因疗法的基因转染的效率比较低.这在很大程度上制约了肿瘤基因治疗的应用.为了克服这两个难题,我们需要人工构建新型的,具有特异靶向及高效率转染等特性的载体系统.腺病毒作为目前基因治疗中常用的载体系统中的一员,对其的改造和修饰已引起了很多人的关注,而且也构建出了一些高效率的具有特异靶向性的腺病毒载体.在这里将详细的介绍这些新颖的腺病毒载体.
-
组织工程皮肤研究进展
皮肤作为人体大的组织,是与外界环境接触的屏障.当由于外界损伤或疾病等原因造成皮肤缺损时,其危害可以是轻微的,也可以是致命的.传统修复方法有:自体植皮、同种异体植皮、异种植皮和人工合成代用品的应用.但由于供区不足、免疫排斥及传播疾病等缺点,寻找一种理想的皮肤替代物一直是临床上一个亟待解决的难题[1].组织工程学[2]技术在天然或生物合成材料上接种皮肤干细胞,在生物支架逐步降解吸收的过程中,种植的细胞继续增生繁殖,形成新的组织工程化皮肤,达到修复创伤和重建自身组织功能的目的[3].因此,"组织工程"的提出为人工构建皮肤替代物提供了崭新且富有挑战性的新方法.
-
银屑病的中医药研究进展
银屑病俗称"牛皮癣",是一种多诱因导致的皮肤慢性炎性病变,临床症状以皮疹上覆盖银白色鳞屑、剥之有薄膜现象和点状出血为主要特征,部分患者伴有关节病变;病理学改变为皮肤角质细胞过度增生及分化不全、炎症细胞浸润、真皮血管扩张等[1].银屑病属于高发病种,据不完全统计,全球范围内该病患者数量近2 000万,国内已逾300万,且近年来发病率仍呈继续升高趋势[2-3].据估计,我国患病人数约为500万,并且每年以10万人迅速递增,国内目前患病率为0.5%[4].银屑病治愈率低、易反复发作,严重影响了患者的生活质量[5].银屑病为人类特有的疾病,动物自然发生该病的病例罕见,因此银屑病动物模型大多依赖人工构建.