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Ebp1在膀胱癌中的表达及其对细胞周期的作用
目的 研究Ebp1在膀胱癌组织中的表达情况,探讨Ebp1作用的分子机制和临床意义.方法 通过应用免疫组化方法,检测Ebp1蛋白在52例膀胱癌组织、21例癌旁组织中的表达,并对Ebp1表达与膀胱癌临床病理指标的关系进行统计学分析.通过构建过表达载体,转染膀胱癌细胞株(T24),Western blot检测Ebp1表达,对比观察转染细胞的增殖、细胞周期以了解Ebp1对肿瘤细胞的作用机制.结果 临床大样本检测表明Ebp1蛋白在正常癌旁组织表达为强阳性(100%为阳性,且71.4%为强阳性),而在肿瘤组织中下调表达(63.5%≤弱阳性,P<0.01).并且Ebp1蛋白的表达与肿瘤的TNM分期(P=0.003)、恶性程度分级呈负相关(P=0.001).Ebp1过表达细胞株相比对照组生长较慢,流式检测表明G0/G1期细胞比例(73.2%)为对照组(28.43%)的2.5倍.结论 Ebp1通过细胞停留在G0/G1期而抑制细胞的生长,与膀胱癌的恶性相关,有望作为反映肿瘤恶性程度及预后判断的标记物和治疗靶标.
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重组人增殖相关蛋白2G4家族成员Ebp1的研究现状和前景
重组人增殖相关蛋白2G4(proliferation-associated 2G4,PA2G4)家族与细胞增殖和分化密切相关,在异种真核生物细胞中的表达具有高度保守性.近年来,Ebp1被确认为PA2G4家族成员之一,其所介导的信号转导主要在细胞分化、发育、增殖和凋亡过程中起重要作用.
关键词： Ebp1 EGFR3结合蛋白1 PA2G4 转录因子 细胞增殖 -
Ebp1在肿瘤增殖和侵袭中的研究进展
肿瘤细胞的恶性增殖和浸润转移是影响肿瘤发展和治疗效果的重要因素，了解调控增殖和转移的影响因子及其分子机制对肿瘤早期的诊断和临床治疗意义重大。本文系统总结了增殖相关蛋白PA2G4（proliferation associated 2G4）家族成员Ebp1在多种肿瘤中的表达情况及其对细胞周期、细胞凋亡和分化、细胞迁移等方面的影响，并归纳了Ebp1影响肿瘤增殖和迁移的分子机制。Ebp在多种肿瘤中表达降低且与肿瘤的增殖和迁移呈负相关，并主要通过抑制周期相关蛋白的转录、调控影响肿瘤发展的信号通路。
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Ebp1的表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响
目的:研究降低Ebp1的基因表达水平对乳腺癌细胞T47D野生型增殖能力和侵袭能力的影响.方法:转染并筛选Ebp1降表达的单克隆细胞株clone1、clone2、clone3,阴性对照组命名为control.应用小干扰RNA(siRNA)技术降低Ebp1的表达,采用Western blotting技术检测Ebp1蛋白水平的变化,噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成实验观察其对T47D野生型细胞增殖能力和克隆形成能力的影响;采用Matrigel侵袭实验研究其对细胞侵袭能力的影响.结果:Western blotting检测表明siRNA干扰后T47D野生型细胞中Ebp1的蛋白表达水平明显下降,且与亲本和control组细胞比较,Ebp1降表达的细胞克隆的增殖能力和侵袭能力明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Ebp1表达下降可以明显促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力,提示Ebp1可能是乳腺癌增殖和侵袭的抑制性因子.
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Ebp1蛋白在贲门癌组织中的表达及临床意义
目的 研究人贲门癌组织中Ebp1蛋白表达及其与临床参数的关系.方法 采用免疫组织化学染色对120例贲门癌患者的癌组织和配对的癌旁正常组织中Ebp1蛋白表达水平进行测定.结果 94(78.33%)例贲门癌样本中Ebp1蛋白表达下调.单因素分析显示,与Ebp1蛋白表达水平相关的临床参数有:家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、分化程度和临床分期.有家族史组Ebp1蛋白表达水平显著低于无家族史组,淋巴结转移组Ebp1蛋白表达水平显著低于淋巴结未转移组.肿瘤体积越大、分化程度越低、临床分期越高,Ebp1蛋白表达水平越低.多因素分析显示,在贲门癌中淋巴结转移和临床分期均是Ebp1表达的保护因素.结论 Ebp1在贲门癌发展过程中起重要作用;可能作为贲门癌病情进展的监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因.
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ErbB-3结合蛋白Ebp1基因过表达对人肝癌HepG2细胞生长增殖的影响
[目的]探讨ErbB-3结合蛋白Ebp1基因对肝癌细胞生长增殖的影响.[方法]利用脂质体法将pEGFPC1-Ebp1融合质粒转染到人肝癌细胞HepG2中,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白融合基因的表达并建立稳定表达Ebp1基因细胞系,应用Western blot检测转染后目的蛋白的表达,利用平板克隆集落形成观察细胞生长增殖能力的改变.[结果]在荧光显微镜下可见绿色荧光,Ebp1融合蛋白主要表达于胞质,转染pEGFPC1-Ebp1质粒后HepG2细胞中蛋白明显呈高表达；克隆集落形成实验结果表明,pEGFPC1空载体转染组和未转染细胞组相比较,Ebp1过表达细胞克隆集落形成显著增多.[结论]Ebp1过表达可增强人肝癌HepG2细胞增殖.
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宫颈癌中p53与Ebp1蛋白表达的相关性分析及其意义
[目的]探讨p53及Ebp1蛋白在宫颈癌组织中的表达及其意义.[方法]应用免疫组织化学方法检测30例宫颈癌组织及癌旁正常组织中p53及Ebp1蛋白的表达.[结果]宫颈癌组织中p53及Ebp1蛋白阳性率分别为60.0％和33.3％,均明显高于癌旁正常组织(P＜0.05);宫颈癌组织中p53及Ebp1表达与患者年龄、肿瘤大小、家族史无相关性,p53及Ebp1高表达与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P＜0.05).[结论] p53联合Ebp1蛋白的检测有助于对宫颈癌转移及预后进行判断.
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ErbB-3结合蛋白Ebp1mRNA在肝癌细胞系中的差异表达及其意义
[目的]观察ErBb-3结合蛋白Ebp1 mRNA在人肝癌细胞系中的表达.[方法]培养人肝癌细胞系Hep 3B,Hep G2,Huh7和正常人张氏肝细胞,提取总RNA,以P32标记的Ebp1为探针,18S为内参照,采用Northern Blot法检测Ebp1 mRNA的表达水平.[结果]Northern Blot法检测结果示,Ebp1 mRNA在人肝癌细胞系中的表达水平明显高于正常肝细胞(P＜0.01).[结论]人肝癌细胞系中Ebp1 mRNA呈高表达.
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erbB-3结合蛋白ebp1对Tca 8113细胞生长增殖的影响
目的探讨erbB-3结合蛋白ebp1对口腔鳞状细胞癌Tca 8113细胞生长增殖的影响.方法免疫组化筛选erbB-2/erbB-3双阳性的口腔鳞状细胞癌Tca 8113细胞系;转染pcDNA3.1-ebp1质粒至Tca 8113细胞,G418筛选阳性细胞;RT-PCR检测转染后细胞中ebp1的转录水平;通过细胞生长曲线、3H-TdR摄入量以及集落形成率观察转染前后细胞生长增殖能力的改变.结果 Tca 8113细胞同时表达erbB-2/erbB-3;RT-PCR显示转染后细胞中ebp1转录水平明显升高;Tca 8113-ebp1细胞生长曲线平缓,生长减慢;3H-TdR摄入量明显减少,细胞增殖能力减弱.结论 ebp1在体外能显著抑制Tca 8113肿瘤细胞的生长增殖.
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Ebp1过表达抑制腺样囊性癌细胞的体外迁移能力
目的 探讨Ebp1对人腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞迁移的影响及其分子机制.方法 构建Ebp1表达载体pcDNA3.1-Ebp1,建立Ebp1稳定表达细胞系ACC-Ebp1作为Ebp1组,同时设对照组和空载体组.采用细胞体外运动实验系统观察Ebp1对ACC细胞体外运动能力的影响.采用Western blot检测Ebp1过表达后基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotease9,MMP-9)及细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesionmolecule 1,ICAM-1)、B钙黏附素(E-cadherin)蛋白表达的变化.结果 侵袭实验中,对照组、空载体组和Ebp1组的穿膜细胞数分别为33±7、92±11和106±5(P=0.03)；运动实验中,3组的穿膜细胞数分别为68±5、168±2和203±4(P=0.02).划痕实验中,对照组与空载体组细胞在第16小时已将划痕填满,而Ebp1组细胞直到第24小时仍未完全填满划痕(P=0.002).与对照组及空载体组相比,Ebp1组ACC细胞中MMP-9的表达降低,而ICAM-1及E-cadherin的表达则增高(P＜0.01).结论 Ebp1过表达有效抑制了ACC细胞的迁移,其作用机制可能与抑制ACC细胞的基质降解能力及增强肿瘤细胞间的黏附有关.
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Ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用
目的 研究异位表达ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力的影响.方法 pcDNA3.1-ebp1真核表达载体稳定转染舌鳞状细胞癌细胞系(Tca8113).Western blot和RT-PCR验证稳定转染细胞中ebp1的表达;观察细胞生长、增殖,细胞周期改变,通过软琼脂克隆形成,裸小鼠体内成瘤等方法来评价ebp1抑制肿瘤细胞生长的作用.结果 Ebp1转染细胞的细胞生长、增殖明显受抑制,细胞周期改变,G0/G1和G2/M细胞增多,而S期细胞减少,软琼脂克隆形成率明显下降;移植小鼠模型中肿瘤平均直径和重量Tca-0细胞明显大于Tca-1细胞和Tca-3细胞.结论 Ebp1异位表达对Tca8113有多种抗肿瘤特性,可进一步探讨将ebp1基因作为舌鳞状细胞癌的治疗措施的可能性.
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CD147、EBP1 mRNA在新疆哈萨克族和汉族食管鳞癌中的表达及意义
目的 探讨新疆维哈萨克族和汉族食管鳞状细胞癌中基因CD147和EBP1 mRNA的表达情况及其与临床病理特征之间的关系.方法 采用RT-PCR技术检测CD147和EBP1 mRNA在37例新疆哈萨克族和40例汉族食管鳞癌组织及其对应的远隔正常食管组织中的表达.结果 CD147在食管癌组织和远隔正常食管组织中的相对表达量分别为0.883±0.040和0.675±0.023,P =0.013;EBP1分别为0.574±0.039和0.797±0.035,P =0.022.在汉族和哈萨克族食管鳞癌组织中CD147的阳性表达率分别为77.5％和81.0％,P=0.497；EBP1的阳性表达率分别为82.5％和78.4％,P=0.236.CD147在77例标本癌组织和远隔正常食管组织中的阳性表达率分别为79.2％和49.3％,P=0.003；EBP1在77例标本癌组织中的阳性表达率(61.0％)低于远隔正常食管组织(84.4％),P=0.005.CD147 mRNA表达与浸润深度、淋巴结转移有关(P＜0.05)；EBP1 mRNA的表达与肿瘤分期及淋巴结转移相关(P＜0.05).CD147与EBP1的表达之间呈负相关.结论 CD147和EBP1 mRNA在两民族食管鳞癌中的表达无差异；CD147高表达和EBP1低表达可能共同促进食管鳞癌的发生、发展.
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Ebp1、雄激素受体在前列腺癌中表达及相关性研究
目的:检测良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)和前列腺癌(Prostate cancer,PCa)中Ebp1(ErbB-3binding protein,Ebp1)和雄激素受休(Androgen receptor,AR)的表达,并分析其与PCa分级、前列腺特异性抗原(Prostate specific antigen,PSA)水平、分期的相互关系.方法:21例BPH,55例PCa,采用免疫组织化学(SP法)检测Ebp1、AR的表达情况,并分析二者在BPH、PCa中的表达关系,二者表达与PCa的病理分级、术前PSA水平、临床分期的关系.结果:PCa组织中Ebp1的阳性表达明显低于BPH组织(P＜0.05),BPH、PCa组织中AR的阳性表达无明显差异(P＞0.05),PCa组织中Ebp1、AR的表达与病理分级、临床分期密切相关(P＜0.05),与PSA值无明显关系(P＞0.05)；PCa组织中Ebp1 、AR在的表达存在正相关关系(P＜0.05).结论:Ebp1表达在BPH、PCa组织中有差异性,Ebp1可以作为诊断前列腺癌的一个潜在指标；随着PCa进展AR、Ebp1表达逐步减少,二者的表达存在正相关关系,两者结合可作为PCa预后评价的指标.
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结直肠癌中C-erbB-2与Ebp1的表达与临床病理特征的关系及其临床意义
目的:研究C-erbB-2与Ebp1蛋白在结直肠癌组织中的表达,并探讨其与结直肠癌临床病理特征的关系及意义.方法:应用免疫组织化学法(EnVision)对65例结直肠癌患者的肿瘤组织及正常结直肠组织分别行C-erbB-2与Ebp1蛋白检测.结果:结直肠癌肿瘤组织中C-erbB-2的表达明显高于正常结直肠组织(P＜0.05),Ebp1的表达明显低于正常结直肠组织(P＜0.05)；结直肠癌肿瘤组织中C-erbB-2与Ebp1表达与患者年龄、性别以及家族史无关,C-erbB-2的高表达与Ebp1的低表达与肿瘤的TNM分期、分化程度以及淋巴结转移呈正相关(P均＜0.05)；C-erbB-2与Ebp1蛋白表达呈负相关(P＜0.05).结论:C-erbB-2和Ebp1联合检测有助于对肿瘤转移及预后情况的判断,并为以Ebp1作为生物学靶点的肿瘤免疫治疗研究提供依据.
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EBP1在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及临床病理学意义
目的探讨新疆哈萨克族食管鳞癌中EBP1 mRNA的表达情况及其与临床病理学特征的关系.方法 利用RT-PCR技术检测37例哈萨克族食管鳞癌组织及其对应的癌旁正常食管上皮组织中EBP1 mRNA的表达情况.结果 EBP1 mRNA在新疆哈萨克族食管鳞癌组织和正常组织中的阳性表达率分别为67.6%(25/37)和89.2%(33/37),差异有统计学意义(P<0.05); EBP1 mRNA的表达与TNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05).结论 EBP1 mRNA表达缺失参与了哈萨克族食管鳞癌的发生及发展.
