首页 > 文献资料
-
低氧联合运动对大鼠骨骼肌线粒体自噬的影响
目的:观察慢性低氧及低氧联合运动对骨骼肌线粒体自噬的影响,并探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在其中的作用.方法:56只健康雄性SD大鼠随机分为:常氧对照组(NC)、低氧对照组(HC)、低氧联合运动组(H T,n=8)、低氧+二甲基亚砜(DMSO)组(HC+D)、低氧+HIF-1 α抑制剂YC-1组(HC+Y)、低氧联合运动+DMSO组(HT+D)和低氧联合运动+HIF-1α抑制剂YC-1组(HT+Y).低氧干预为常压低氧帐篷,模拟11.3％氧浓度.运动干预为低氧帐篷内53％ VO2m.跑台训练,1h/d.HIF-1α抑制剂组采用YC-1腹腔注射,4mg&g,1次/d.DMSO组注射等体积1％DMSO.上述干预均持续4周.结果:HC组与NC组比较,线粒体膜电位、ATP合成活力显著降低(P＜0.05),活性氧族(ROS)生成速率、PINK1、Parkin、Bnip3和HIF-1α蛋白表达显著升高(P＜0.05).HT组与HC组比较,线粒体膜电位、ATP合成活力、Parkin、Bnip3和HIF-1α表达显著升高(P＜0.05),ROS生成速率和PINK1表达显著降低(P＜0.05).YC-1干预HC和HT组,均造成线粒体膜电位、ATP合成活力、Bnip3和HIF-1α表达显著降低(P＜0.05),ROS生成速率和PINK1表达显著升高(P＜0.05).结论:低氧联合运动可通过HIF-1α途径促进了低氧诱导的Bnip3介导的线粒体自噬保护机制,从而提高骨骼肌线粒体的质量.
-
沙立度胺抑制缺氧所致胃肠道血管发育不良的机制初探
目的 探讨沙立度胺抗血管生成的作用机制.方法 收集胃肠道血管发育不良患者手术切除的肠段标本,免疫组化检测病变肠段的血管内皮生长因子(VEGF)表达.体外缺氧条件下培养人脐静脉内皮细胞至对数生长期,随机分为6组,同步化后用不同浓度沙立度胺(40、60、80、100μ/ml)刺激72 h.ELISA和实时定量PCR法测定VEGF的表达,Western blot法测定低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达.结果 免疫组化结果显示,病变肠段血管扩张、扭曲,VEGF的表达明显增强.ELISA检测表明,缺氧培养条件下细胞上清中VEGF蛋白表达水平明显高于常氧状态[(1199.3±61.4)ng/L比(864.7±41.2)ng/L,P<0.05];沙立度胺可有效抑制缺氧条件下人脐静脉内皮细胞的VEGF蛋白表达.实时定量PCR结果亦提示沙立度胺能明显抑制缺氧状态下VEGF mRNA的表达(P<0.05).Western blot结果表明,沙立度胺可抑制缺氧状态下VEGF的上游调节因子HIF-1α的表达,且这一抑制作用呈剂量相关性.结论 初步体外研究表明,沙立度胺通过抑制缺氧条件下人脐静脉内皮细胞HIF-1α及VEGF的表达,从而抑制血管生成,是其有效治疗血管发育不良所致消化道出血的可能机制之一.
-
间歇性低氧在大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的保护机制
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、低氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子2(VEGF-2)在间歇性低氧对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的表达及保护机制.方法 选取72只大鼠随机分为假手术组(n=18)、I/R+间歇性低氧(I/R+IH)组(n=18)、I/R组(n=18)、I/R+IH+磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂组(I/R+IH+PI3K抑制剂组)(n=18),将大鼠暴露于低氧循环制作间隙性低氧动物模型,采用球囊结扎冠脉方法制作心肌缺血/再灌注动物模型.通过试剂盒检测心肌组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量,通过超声心动图监测大鼠舒张末期容积、收缩末期容积、左心室射血分数,通过Western blot法检测蛋白激酶B(AKt)、HIF-1α、VEGF-2表达.结果 与假手术组比较,I/R组的MDA、CK-MB高于假手术组,GSH低于假手术组,左心室舒张末期容积及收缩期末期容积高于假手术组,左心室射血分数低于假手术组,AKt蛋白及HIF-1α、VEGF-2表达低于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05).I/R+IH组反映氧化损伤的MDA、CK-MB低于I/R组,GSH高于I/R组;左心室舒张末期容积及收缩期末期容积低于I/R组,左心室射血分数高于I/R组,AKt蛋白及HIF-1α、VEGF-2表达高于I/R组,差异有统计学意义(P＜0.05).I/R+IH+PI3K抑制剂组的MDA、CK-MB高于I/R+IH组,GSH低于I/R+IH组;左心室舒张末期容积及收缩期末期容积高于I/R+IH组,左心室射血分数低于I/R+IH组,AKt、HIF-1α、VEGF-2蛋白表达低于I/R+IH组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 IH在心肌缺血损伤中具有心脏保护作用,其保护机制与激活磷脂酰肌醇酯3-激酶信号通路及促进HIF-1α、VEGF-2表达有关.
-
HIF-α、VEGF 和 DLL4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
目的：探讨 Delta 样配体4（ Delta-like ligand 4，DLL4）、低氧诱导因子α（ hypoxia inducible factor alpha， HIF-α）和血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor，VEGF）在非小细胞肺癌（ non-small cell lung cancer， NSCLC）中的表达及其临床意义。方法选取河北省胸科医院胸外科2012年10月—2015年11月经手术治疗 NSCLC患者的手术切除标本72例作为 NSCLC 组，另选距离原发肿瘤5 cm 以上的肺组织标本（经 HE 染色病理证实无肿瘤浸润）72例作为正常对照组。通过免疫组化染色的方法检测 DLL4、HIF-α及 VEGF 的表达情况，并结合患者的临床病理资料进行分析。结果 NSCLC 组 DLL4、HIF-α及 VEGF 阳性表达率显著高于正常对照组（ P ﹤0.01）；DLL4、HIF-α及VEGF 表达与 NSCLC 肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（ P ﹤0.05），而与患者年龄、性别、病理类型及肿瘤长径无关（P ﹥0.05）；DLL4、HIF-α与 VEGF 表达两两之间均呈显著正相关（ r =0.320、0.366、0.335，P ﹤0.01）。结论DLL4、HIF-α及 VEGF 在 NSCLC 发生、发展和转移中可能起协同作用，检测 DLL4、HIF-α及 VEGF 的表达对临床判断非小细胞肺癌发生、发展、预后及研发新的靶向治疗药物有一定的价值。
-
神经肽Y和低氧诱导因子α与老年频发室早发生和维持关系
目的:探讨神经肽Y(NPY)和低氧诱导因子α(HIF-1α)与老年频发室早发生和维持的关系.方法:入选69例临床资料完整的老年患者,其中频发室性早搏患者23例,冠心病患者23例,窦性心律患者23例.比较各组患者血清中NPY和HIF-1 α的表达水平.结果:NPY表达水平在频发室性早搏组(0.527±0.036 5)μg/L明显高于窦性心律组(0.455±0.067 6)μg/L(P＜0.05),频发室早组与窦性心律组比较有统计学意义,与冠心病组比较无统计学意义;HIF-1 α表达水平在频发室性早搏组(0.466±0.053 1)μg/L明显高于冠心病组(0.427±0.0525)μg/L及窦性心律组(0.380±0.062 9)μg/L(P＜0.05),频发室早组分别与冠心病及窦性心律组比较均有统计学意义.结论:神经肽Y和低氧诱导因子α在老年频发室早的发生和维持过程中起重要作用.
-
恩度耐药的大肠癌患者血清VEGF和HIF-1α的表达及临床意义
目的 检测恩度耐药的大肠癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和低氧诱导因子α(HIF-1α)的表达水平及其临床意义.方法 选取2015年2月至2016年6月于我院肿瘤科采用恩度联合化疗药物治疗的大肠癌患者160例为研究对象,依据其对恩度耐药的情况分为耐药组(85例)和敏感组(75例).采用ELISA法检测所有患者血清中VEGF和HIF-1α的表达,采用实时定量PCR检测血清中Survivin、LTEM1、Hes1以及ASPP2和PTEN的mRNA表达水平.结果 耐药组患者血清VEGF(388.14±43.03)和HIF-1α(160.65±35.84)水平明显高于敏感组患者的VEGF(220.18±61.34)和HIF-1α (124.69±27.53)水平(P<0.001).耐药组患者癌基因Survivin、LTEM1和Hes1的mRNA相对表达水平均明显高于敏感组患者(P<0.001),耐药组患者ASPP2和PTEN基因mRNA表达水平显著低于敏感组患者(P<0.001).Logistic分析显示对恩度耐药预测贡献价值大的是VEGF和HIF-1α,其预测的OR值分别为7.352(95% CI: 2.348~23.024,P=0.001)和2.409(95% CI: 1.166~4.978,P=0.018).结论 恩度耐药的大肠癌患者血清VEGF和HIF-1α表达上调,二者的表达水平对恩度耐药有一定的预测价值.
-
红景天苷对人心肌细胞缺氧损伤的保护作用及可能机制
目的 观察人心肌细胞(HCM)在不同浓度红景天苷的刺激下其乳酸脱氢酶(LDH)、脱酸激酶(CK)、谷草转氨酶(AST)和超氧化物歧化酶(SOD)的释放量,以及心肌细胞活性的变化.分析红景天苷对人心肌细胞的作用,并探讨其可能的分子机制.方法 体外模拟缺氧环境对人心肌细胞造成损伤,测定不同浓度红景天苷作用下人心肌细胞LDH、CK、AST以及SOD释放量,并采用活细胞计数法试剂盒(cck-8)检测不同处理组细胞活性,赫克斯特-碘化丙啶(Hoechst-PI)双染观察细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测低氧诱导因子(HIF-1α)表达.结果 与缺氧对照组比较,1×10-4、10-5及10-6 mol/L红景天苷处理组LDH、CK和AST释放量均降低,呈剂量依赖性(<0.01).与缺氧对照组比较,红景天苷处理组(1×10-4、10-5及10-6 mol/L)细胞上清SOD含量增加,呈剂量依赖性(<0.01).与缺氧对照组比较,红景天苷处理组(1×10-4、10-5及10-6 mol/L)人心肌细胞随着红景天苷的剂量增大,细胞活性逐渐升高.与缺氧对照组比较,红景天苷处理组(1×10-4、10-5及10-6 mol/L)人心肌细胞随着红景天苷的剂量增大,死亡以及凋亡细胞呈现明显减少趋势.缺氧可激活HIF-1α的表达.结论 红景天苷能抑制人心肌细胞LDH、CK和AST的释放,增加SOD的含量,同时可提高人心肌细胞的活性并减少其凋亡,对其有保护作用,其分子机制可能与诱导HIF-1α的表达有关.
-
低氧预适应诱导肝脏HIF-1α高表达对自体原位肝移植大鼠JNK信号转导通路的影响
目的 检测低氧诱导因子α(HIF-1α)在自体原位肝移植大鼠肝脏的表达情况,探讨HIF-1α在JNK信号转导通路中的作用机制.方法 采用单纯随机抽样法将96只SD大鼠分为正常对照组、自体肝移植组、低氧预适应+自体肝移植组,每组32只.正常对照组:仅开腹分离血管,不作其他处理;自体肝移植组:采用经门静脉灌注法建立稳定的70%自体原位肝移植模型;低氧预适应+自体肝移植组:术前用8%氮氧混合气体低氧预处理90min,其他处理同自体肝移植组.分别于术后1、2、12、24h检测大鼠血清ALT、AST水平,免疫组织化学染色法测定大鼠肝脏组织HIF-1α的表达,RT-PCR检测c-Jun mRNA表达水平,Western blot检测Cleaved Caspase-3蛋白表达水平.多组比较采用方差分析,两组比较采用t检验.结果 术后1、2、12、24 h,低氧预适应+自体肝移植组大鼠血清ALT和AST水平显著低于自体肝移植组,但高于正常对照组,差异有统计学意义(F=2631.371、1177.642、810.383、682.848,743.618、1095.522、375.995、580.613,P＜0.05).自体肝移植组大鼠术后各时相点HIF-1α蛋白的表达水平明显低于低氧预适应+自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=191.737,284.482,459.419,213.782,P＜0.05).低氧预适应+自体肝移植组大鼠术后1、2、12 h c-Jun mRNA表达水平显著低于自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=66.211,53.169,9.645,P＜0.05),术后24 h c-Jun mRNA表达水平3组间比较,差异无统计学意义(F=1.100,P＞0.05).低氧预适应+自体肝移植组大鼠术后各时相点Cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著低于自体肝移植组,但均高于正常对照组,差异有统计学意义(F=23.133,31.158,14.347,29.043,P＜0.05).结论 肝移植大鼠低氧预适应后HIF-1α的高表达可能通过抑制JNK信号通路的持续激活,下调Cleaved Caspase-3蛋白的表达,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注损伤.
