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Notch配体Delta-like-1和Jagged-1mRNA在骨髓增生异常综合征患者骨髓间充质干细胞中表达研究
本研究检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓间充质干细胞Notch信号通路配体Delta-like-1和Jag-ged-1 mRNA表达水平,探讨其与MDS发病的关系.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测38例MDS患者和16例正常对照者骨髓间充质干细胞中Delta-like-1和Jagged-1的基因表达水平.结果表明,MDS患者的Delta-like-1和Jagged-1 mRNA表达水平较正常对照组均明显升高(P＜0.05).在WHO分组中,RA/RARS、RCMD及RAEB组Delta-like-1的表达量均高于正常对照组(P＜0.05),RARB组Jagged-1与正常对照组差异有显著性(P＜0.05).Delta-like-1表达与骨髓原始细胞比例有显著相关性(r=0.502,P＜0.05).伴染色体异常MDS组Delta-like-1和Jagged-1 mRNA表达水平较无染色体异常MDS组明显升高(P＜0.05).在IPSS分组中,较高危组Delta-like-1表达显著高于较低危组(P＜0.01),而Jagged-1表达在两组间无统计学差异(P＞0.05).结论:MSC中Del-ta-like-1和Jagged-1高表达可能参与了MDS的发病过程.
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人Delta-like-1胞外区在CHO细胞的表达纯化及对造血祖细胞的扩增作用
Notch信号通路在调控造血干细胞的增殖分化中具有重要作用.本研究克隆表达人Notch配体Delta-like-1(Dll-1)的胞外区(hDll-1ext),并观察其对脐带血造血祖细胞的扩增作用.从人骨髓单个核细胞中提取总RNA,用RT-PCR的方法扩增Delta-like-1基因胞外区,克隆到T载体.测序正确后,亚克隆到pcDNA3.1/Myc-His(+)A表达载体.用脂质体转染CHO细胞,G418筛选单克隆,Western印迹检测hDll-1ext的分泌表达情况.选择表达量高的细胞克隆,扩增并收集上清.用金属亲和层析柱从上清中纯化融合蛋白hDlll-1ext.利用免疫磁性分离方法分离脐带血CD34+细胞.结果表明,RT-PCR方法检测到脐带血CD34+细胞表达Notch-1受体.在含rhIL-3,rhSCF及rhVEGF的脐带血CD34+细胞无血清培养体系中,加入纯化的hDll-1ext,通过集落培养检测hDl-1ext对造血祖细胞的扩增作用.含hDll-1ext组中CFU-Mix和HPP-CFC数量是对照组的1.5倍,结论:重组的hDll-1ext对原始的造血祖细胞具有扩增作用.
关键词： Delta-like-1 Notch CHO细胞 造血祖细胞 -
血清DLL1的检测在结核性脑膜炎诊断中的价值
目的 探索血清中Delta-like-1(DLL1)的检测在结核性脑膜炎诊断中的临床价值.方法 选择诊断明确的中枢神经系统感染性疾病患者45例,分为结核性脑膜炎(结脑组)26例,病毒性脑(膜)炎(病脑组)19例;以及正常对照组25例.采用酶联免疫吸附试验定量测定患者血清中DLL1的含量.结果 各组血清中DLL1的含量,结脑组与病脑组、对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),病脑组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 DLL1检测作为一种新的指标,在结核性脑膜炎的诊断中可能有重要的临床价值.
关键词： Delta-like-1 结核性脑膜炎 血清 -
大部分肝切除模型大鼠肝再生组织中CD34蛋白及Delta-like-1蛋白的表达**☆
背景:当肝脏受到严重损伤或肝脏大部分缺失时,肝干细胞迅速分裂增殖向成熟肝细胞分化修复肝组织,但肝再生是一个复杂的多信号分子调控的过程,参与调控的相关基因及蛋白质目前尚不十分清楚.目的:观察大部分肝切除后大鼠肝再生组织中CD34蛋白、Delta-like-1蛋白的表达变化.方法:切除2/3肝脏建立大鼠肝再生动物模型,应用苏木精-伊红染色、酶组织化学染色、免疫组织化学染色方法在不同时间点检测肝再生组织中ATP酶、增殖细胞核抗原、CD34、Delta-like-1蛋白的表达情况.结果与结论:在肝再生的启动阶段ATP酶表达下调,CD34、Delta-like-1表达上调;在肝再生的持续增殖阶段,ATP酶表达上调到正常水平,CD34、Delta-like-1表达下调;增殖细胞核抗原表达为持续上调.说明ATP酶、CD34、Delta-like-1在不同阶段表达不同,提示在肝再生过程中各信号分子的协同作用及Notch- Delta信号通路参与其作用机制.
关键词： 肝再生 CD34 Delta-like-1 ATP酶 增殖细胞核抗原 -
Notch-1在人胶质瘤细胞系U251细胞中的邻分泌机制探讨
目的 探讨Notch-1在人胶质瘤细胞系U251细胞中的邻分泌机制.方法 用免疫荧光组织化学方法检测单个孤一和聚集相邻的两个U251细胞的Notch-1及配体delta-like-1的表达水平.封闭U251细胞的Notch-1受体,采用SYBR荧光实时定量PCR法检测Notch-1配体delta-like-1mRNA在不同封闭时间组的表达水平.结果 聚集相邻的U251细胞Notch-1及delta-like-1的平均荧光强度高于单个孤一的细胞.封闭后delta-like-1 mRNA的表达水平明显呈时间依赖性降低.结论 在U251胶质瘤细胞中,Notch-1可能通过邻分泌机制促进相邻细胞Notch-1的表达,并影响其配体delta-like-1的表达.
关键词： NOTCH-1 Delta-like-1 邻分泌 胶质瘤 -
脑脊液中检测DLL1对结核性脑膜炎的诊断意义
目的 探索脑脊液(CSF)中Delta-like-1(DLL1)的检测在结核性脑膜炎诊断中的临床价值.方法 选择诊断明确的中枢神经系统感染性疾病患者50例,分为结核性脑膜炎(结脑组)30例,病毒性脑(膜)炎(病脑组)20例,以及正常对照组20例,颅内转移瘤(肿瘤组)8例.采用酶联免疫吸附试验定量测定患者CSF中DLL1的含量.结果 各组CSF中DLL1的含量,结脑组显著高于其他组别,差异均有统计学意义(P＜0.01),其他组别之间相比差异均无统计学意义(P＞0.05).各组CSF中DLL1的含量与CSF蛋白、细胞数、葡萄糖、氯化物及颅内压均无相关性.结论 DLL1检测作为一种新的指标,在结核性脑膜炎的诊断中可能有重要临床价值.
关键词： Delta-like-1 结核性脑膜炎 脑脊液
