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  • 去白细胞输血对急性淋巴细胞白血病患者外周血Th1/Th2细胞平衡影响

    作者:董勤敏;李海云;雷福珍;杨如玉

    目的:探讨去白细胞输血对急性淋巴白血病(ALL)患者外周血Th1/Th2细胞平衡的影响.方法:选取2016年3月至2017年8月在我院治疗的57例ALL患者,其中31例ALL患者接受常规输血治疗,纳入A组,26例患者接受去白细胞输血治疗,纳入B组,并选择同期在本院体检正常者36例为对照组;记录患者的基本临床特征,采用流式细胞术分析患者外周血Th1/Th2细胞比例;采用ELISA分析患者血清IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;采用RT-PCR分析淋巴细胞T-bet和GATA-3的mRNA表达水平;采用Western blot分析淋巴细胞T-bet和GATA-3蛋白水平.结果:ALL患者外周血Th1/Th2比例与患者的年龄、风险等级明显相关(P<0.05);A组患者在接受治疗后Th1/Th2比例变化与治疗前相比无统计学差异(P>0.05);B组患者在接受治疗后Th1/Th2比例升高(P<0.05).A组ALL患者Th1和Th2细胞分泌的IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平变化无统计学差异(P>0.05);B组ALL患者Th1细胞分泌的IL-2和IFN-γ水平均上升,Th2细胞分泌的IL-4和IL-10水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05).通过RT-PCR和Western blot检测发现,A组ALL患者T-bet mRNA和T-bet蛋白水平低于对照组,B组ALL患者T-bet mRNA和T-bet蛋白水平高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).A组ALL患者GATA-3 mRNA和GATA-3蛋白水平高于对照组,B组ALL患者GATA-3 mRNA和GATA-3蛋白水平低于A组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:去白细胞输血有助于改善外周血Th1/Th2细胞平衡,提高患者的免疫功能,这可能与T-bet和GATA-3表达密切相关.

  • 匹多莫德联合布地奈德治疗MPP的疗效及对Th1/Th2平衡的影响

    作者:毛立新;郭元春

    支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)是儿童时期急性重症之一.近年来研究表明,Th1/Th2细胞平衡紊乱是其重要的发病机制[1-2].本文采用匹多莫德联合布地奈德治疗MPP患儿,通过观察MPP患儿治疗前后外周抗凝血分离单个核细胞(PBMC)培养液中自介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量变化,探讨匹多莫德联合布地奈德治疗MPP的临床疗效,及其对MPP患儿Th1/Th2平衡的影响,现报道如下.

  • CD4+CD25+Treg细胞因子与HBV宫内感染相关性研究

    作者:彭凯欣;洪倩;郑九生

    目的 探讨乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)携带者孕产妇TGF-β1、IL-4、IFN-γ和IL-12的血清水平及胎盘中的表达,在HBV宫内感染中的意义.方法 选择2011年1月-2012年11月间,在我院分娩的HBV感染孕妇86例作为研究对象,将其按照是否发生宫内感染分为阳性组和阴性组.采用酶联免疫吸附法对孕妇血清中TGF-β1、IL-4、IFN-γ和IL-12水平进行定量检测;采用免疫组化法对胎盘组织中TGF-β1、IL-4、IFN-γ和IL-12的表达水平进行检测.结果 ⑴HBeAg阳性组宫内感染发生率高于HBeAg阴性组(P<0.05).⑵宫内感染患者血清中TGF-β1和IL-4水平较未感染组明显升高(P<0.05),IFN-γ和IL-12水平较未感染组明显降低(P<0.05).⑶TGF-β1、IL-4、IFN-γ和IL-12的阳性细胞主要定位在绒毛血管内皮细胞、胎盘滋养细胞和蜕膜细胞中,绒毛间质细胞表达量相对较少.表达的部位主要集中在细胞浆中.宫内感染组胎盘组织中TGF-β1和IL-4的阳性表达率高于未感染组(P<0.05);而IFN-γ和IL-12的阳性表达率则低于未感染组(P<0.05).结论 上述细胞因子的水平变化,反映了Th1/Th2细胞失衡,以及CD4+CD25+调节性T细胞(T regulatory cells, Treg)的过度活跃,这可能是HBV宫内感染发生的主要危险因素.孕妇HBeAg阳性预示HBV宫内感染率增加.

  • 补充维生素D对佝偻病大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

    作者:刘雪婷;任立红

    目的 通过观察维生素D( VitD)缺乏性佝偻病大鼠在不同剂量VitD治疗前后免疫指标变化,探讨VitD对佝偻病大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响.方法 选用21日龄SD大鼠32只,随机分为对照组(C组,n=10)、模型组(M组,n=10)和实验组(T组,n=12),T组又依据VitD治疗剂量不同均分为T1组(n=6)和T2组(n=6).T1组与T2组分别采用不同等级VitD一次性肌肉注射后行组间比较,观察幼鼠体质量、外周血碱性磷酸酶(AKP)、骨组织病理切片及外周血25-(OH)D3、IL-4、干扰素γ(IFN-γ)变化,并通过其外周血IL-4/IFN-γγ水平判断VitD对佝偻病大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响.结果 缺乏VitD避光饲养30 d后,M组与T组的外观、骨组织病理切片较C组明显改变,其外周血AKP水平升高,同时血25-(OH)D3水平下降(Pa<0.05).治疗后,T组较M组外观及病理切片有所好转,外周血AKP水平与25-(OH)D3水平明显改善(Pa<0.05).免疫指标方面,血IFN-γ治疗前后的轻微波动均无统计学意义(Pa>0.05),而外周血IL-4水平则在治疗后明显升高,且剂量越大,升高越明显(P<0.05,0.01).结论 大剂量VitD可使机体Th1/Th2细胞平衡向Th2细胞移动,体内IL-4分泌增加,从而使机体处于易发生变态反应的状态.

  • Runx3对银屑病患者Th1/Th2细胞平衡的影响及其作用机制

    作者:付丹丹;胡华;孙敏;李占国;田中伟

    目的 检测Runx3在银屑病患者和健康人外周血CD4+T细胞中转录水平的表达,分析其对Th1/Th2细胞平衡的影响及在银屑病发病中可能的作用机制.方法 选取40例银屑病患者(银屑病组)和35例健康人(健康对照组),应用密度梯度离心法分离其外周血CD4+T细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Runx3转录水平的表达.将体外培养的银屑病患者的CD4+T细胞随机分为空白对照组(未经任何处理组)、阴性对照组(对照siRNA转染组)和Runx3 siRNA组(Runx3 siRNA转染组).采用Western blot检测沉默效果,流式细胞仪分析Th1、Th2细胞数目,酶联免疫吸附试验检测Th1和Th2细胞相关特异性分泌因子的表达水平,同时采用qRT-PCR和Westernblot检测Runx3对Th1/Th2细胞转录因子表达的影响.结果 银屑病组患者CD4+T细胞Runx3 mRNA的表达水平显著高于健康对照组(P<0.01).与阴性对照组比较,Runx3 siRNA组银屑病患者CD4+T细胞中Runx3蛋白表达水平下降(P<0.01),同时Th1细胞数目下降(P<0.05),而Th2细胞数目上调(P<0.05),且Th1/Th2细胞比值显著降低(P<0.05);白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平显著下降(P<0.01),IL-4、IL-10表达水平显著升高(P<0.05);Th1型特异性转录因子T-bet的表达显著降低(0.73 ±0.06 vs 0.96 ±0.17)(P<0.01),同时Th2型特异性转录因子GATA3的表达显著升高(1.27 ±0.11 vs 1.01 ±0.14)(P<0.05).结论 Runx3在银屑病患者外周血CD4+T细胞中表达上调,并且可能通过调控Th1/Th2细胞相关特异性转录因子的表达引发Th细胞失衡,从而参与银屑病的病理发病进程.

  • 乙型肝炎病毒感染孕妇IL-2、IFN-γ和IL-4、IL-6与宫内感染的相关性研究

    作者:李艳;张红梅;沈佳芳

    目的:研究乙型肝炎病毒孕妇白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和干扰素-γ(IFN-γ)与宫内感染的相关性.方法:采用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-EL ISA)检测105例乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇的外周静脉血及其新生儿的脐静脉血血清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6的水平,同时选择42例正常孕妇作为对照.结果:HBsAg阳性孕妇分娩的105例新生儿有22例出现宫内感染,宫内感染率达到20.95%.宫内感染组的HBV孕妇血清中IL-2、IFN-γ的水平明显低于宫内未感染组的HBV孕妇和对照组孕妇,差异有统计学意义(P<0.05),而宫内感染组血清中IL-4、IL-6水平则明显高于宫内未感染组和对照组孕妇,差异有统计学意义(P<0.05);和对照组孕妇相比,宫内未感染组血清中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6水平无显著性差异(P>0.05);经相关性分析显示孕妇血清中IL-2与IFN-γ水平呈显著正相关(P<0.05);IL-4与IL-6水平呈显著正相关(P<0.05);IL-2与IL-4呈显著负相关(P<0.05);IL-2与IL-6亦呈显著负相关(P<0.05);IFN-γ与IL-4呈显著负相关(P<0.05);IFN-γ与IL-6亦呈显著负相关(P<0.05).三组新生儿脐血清中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6的水平无明显差异(P>0.05).结论:孕妇细胞免疫功能紊乱导致IL-2、IFN-γ抗病毒作用减弱,IL-4、IL-6水平升高,不利于孕妇体内HBV清除,易致胎儿宫内感染.

  • 2例Melkersson-Rosenthal综合征患者免疫状态的检测

    作者:郭红卫;李顺凡;陈嵘炜;王京浜

    目的:总结分析两例Melkersson-Rosenthl(MRS)综合征患者的临床表现、组织病理和治疗转归,探讨其可能的免疫学发病机制.方法:对2例MRS患者的外周血IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平应用ELISA方法作检测.结果:2例MRS患者外周血Th1型血细胞因子IL-2、IFN-γ水平明显低于正常对照组,Th2型细胞因子LI-4、IL-10水平和正常对照组相比增高.结论:Th1/Th2细胞动态平衡打破,可能是MRS的一个重要发病机制.

  • 脾胃湿热证与Th1/Th2细胞平衡的相关研究

    作者:陈晴清;张静

    目的 研究脾胃湿热证中Th1/Th2细胞免疫平衡改变的情况.方法 病例为经胃镜检查诊断为慢性浅表性胃炎及消化性溃疡病人,共57例,分为脾胃湿热证(33例)及脾气虚证(24例)两组,正常对照组15例.采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4值.结果 脾胃湿热组IL-4值均较脾气虚组和对照组显著降低(P<0.05);而脾胃湿热组IFN-γ值和IFN-γ/IL-4比值升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 提示慢性浅表性胃炎和消化性溃疡中脾胃湿热证患者机体Th1/Th2细胞免疫失衡,细胞因子网络调节紊乱,以Th1细胞反应占优势.

  • 益气复元汤对TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

    作者:周黔香;张璐;徐劲松;程卫东;王磊;杨思霞;谢泽萍

    目的:观察自拟”益气复元汤”对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型,给予柳氮磺吡啶溶液及11.92、17.16、23.84g/kg剂量益气复元汤水煎液干预14天,观察各组大鼠一般情况、记录疾病活动指数(DAI),进行大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)及结肠组织学损伤评分(HI);检测外周血淋巴细胞亚群及细胞因子TNF-α、IL-4和INF-y的含量.结果:与正常组比较,模型组DAI、CMDI、HI和INF-γ、TNF-α含量以及CD4+、CI4+/CD8+淋巴细胞百分比显著升高,IL-4含量和CD8+、CD4+ CD25+/CD4+淋巴细胞百分比显著降低;柳氮磺吡啶及益气复元汤各剂量组,可显著降低模型大鼠DAI、CMDI、HI和INF-γ、TNF-α、CD4+的含量以及CD4+/CD8+淋巴细胞百分比,增加IL-4、CD8+的表达以及CD4+ CD25+/CD4+淋巴细胞百分比.结论:益气复元汤可抑制TNBS/乙醇诱导的溃疡性结肠炎大鼠模型的炎症,可能通过减少血清INF-y表达、上调IL-4表达,从而调节Th1/Th2细胞平衡,调节肠道免疫,抑制肠道炎症,促进溃疡愈合.

  • 火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖诱导的肝损伤小鼠的保护作用及其机制

    作者:黄思茂;王梦楠;许琼梅;王欢;张可锋

    目的:研究火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖 (D-Gal N) 建立的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制.方法:将60只昆明种小鼠随机分为正常对照组, 模型组, 水飞蓟素组 (200 mg/kg) 及火炭母总黄酮剂量组 (400 mg/kg、200 mg/kg、100 mg/kg), 每组10只, 适应性喂养一周后, 各给药组小鼠每天灌胃给药1次, 连续7天, 正常对照组及模型组小鼠灌胃生理盐水, 末次给药1 h后, 除正常对照组, 其余组均腹腔注射D-Gal N (500 mg/kg) 建立小鼠急性肝损伤模型.模型建立16 h后, 收集血清及肝组织, 生化法检测小鼠血清中AST、ALT、TBIL、T-SOD、MDA和GSH-Px的活性或含量;酶联免疫吸附法 (ELISA) 检测小鼠肝组织中Th1型细胞因子TNF-α与IFN-γ以及Th2型细胞因子IL-10与白IL-4的表达水平;HE染色, 显微镜下观察小鼠肝组织病理变化.结果:与正常对照组相比较, 模型组小鼠血清中AST、ALT和TBIL水平显著升高, 肝组织切片显示, 模型组小鼠肝组织严重受损, 肝细胞明显坏死, 提示肝损伤模型建立成功.与模型组相比, 火炭母总黄酮剂量组 (400 mg/kg和200 mg/kg) 小鼠血清或肝组织中AST、ALT、TBIL、MDA、TNF-α和IFN-γ水平不同程度显著下降, 而T-SOD、GSH-Px、IL-10和IL-4水平显著升高;HE染色结果显示, 火炭母总黄酮能够显著改善肝损伤病变程度.结论:火炭母总黄酮具有显著的护肝作用, 其作用机制可能与抗氧化及调节肝组织Th1/Th2细胞平衡有关.

  • 乳杆菌对原代淋巴细胞中Th1/Th2细胞平衡的影响

    作者:李艾黎;马冬雪;孟祥晨

    目的:分析7种乳杆菌对原代淋巴细胞增殖和细胞因子(CK)分泌的作用,进而探讨其对Th1/Th2细胞平衡的影响.方法:用不同种属、不同浓度的活的/热致死的乳杆菌体外作用于小鼠脾淋巴细胞培养60 h后,采用MTT比色法检测淋巴细胞的增殖效果.用ELISA法检测Th1型细胞因子(IL-12、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)和调节型细胞因子(TGF-β)的分泌量.结果:活的/热致死的乳杆菌单独作用,就能促进淋巴细胞体外增殖并表现出剂量依赖关系(P<0.05).当菌的浓度为107集落形成单位(CFU)/mL(即细菌与细胞的比例为10:1)时,热致死的发酵乳杆菌和嗜酸乳杆菌的免疫活性近似于活菌.而且,这两株热致死菌还可适当提高淋巴细胞分泌IL-12和IFN-γ,抑制IL-4、IL-10和TGF-β的分泌,使其IFN-γ/IL-4的比值(代表Th1/Th2细胞平衡)均显著高于刀豆蛋白A(ConA)对照组(P<0.05).结论:乳杆菌可通过提高淋巴细胞的IFN-γ/IL-4分泌率来促进Th1优势状态的Th1/Th2细胞平衡,并具有菌株特异性.

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