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神经氨酸酶对红细胞微观流变特性的影响
用生物化学方法，即用不同剂量的神经氨酸酶(唾液酸酶)作用相同的时间，和用相同剂量的神经氨酸酶作用不同的时间分别对红细胞进行处理，以达到不同程度地去掉其表面电荷。测量处理过的血液的粘度、血沉、红细胞聚集及各样本红细胞的DI、(DI)or、(DI)d在不同切变率下的变形曲线，即DI-、(DI)or-和(DI)d-曲线及电泳率，并与正常对照组红细胞的相应参数及曲线作比较，发现两者之间的粘度、血沉、红细胞聚集及各种曲线存在明显差异。由此表明，红细胞表面电荷的多少直接影响血粘度、血沉及红细胞聚集与其红细胞变形性等流变特性，有力地证明了在低切变率下血液粘度与血沉主要反映红细胞的聚集行为，而在高切变率下的血液粘度则主要反映红细胞的变形行为。
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丝素材料的药物吸附释放性能与调控研究
为了了解丝素材料对药物等的吸附释放性能,并探讨对丝素材料的吸附释放性能的调控,用不同离子型化合物作为药物模型,比较了分别用未修饰和经羧基进行酰胺化修饰后的丝素制作成的多孔丝素凝胶对不同离子型的化合物的吸附释放行为.结果表明:经修饰后丝素蛋白质的等电点为pH6.0左右,而天然的为pH4.0左右.未修饰和经修饰的多孔丝素凝胶都随着溶液pH的上升,对阳离子化合物的吸附量增加,释放速度减慢;对阴离子化合物吸附量减少,释放速度加快.但在相同pH下与未修饰相比,经修饰的多孔丝素凝胶所吸附的阳离子化合物的释放速度加快,释放量也增加;所吸附的阴离子化合物的释放速度和释放量则明显降低.用羧基酰胺化修饰的方法,可在一定程度上改变丝素材料对离子型化合物的吸附释放行为.
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6 Gy γ射线对骨髓细胞生物力学特性的影响
目的了解放射损伤条件下骨髓细胞(包括基质细胞和造血细胞)生物力学特性的改变.方法以6 Gy 60Co γ射线照射昆明系小鼠制备动物模型,以细胞电泳法检测骨髓细胞的细胞电泳率,荧光探针法测定细胞膜微黏度,旋转法检测细胞的黏附性,核孔滤膜法检测细胞的变形指数.结果放射损伤后骨髓细胞的变形能力降低,细胞膜微黏度增加,细胞的黏附率和电泳率显著降低.结论 6 Gy 60Co γ射线对骨髓细胞的生物力学特性有显著影响,可能是放射损伤后造血功能减退的原因之一.
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粒径与表面电荷影响脂质体体内药物靶向递送的研究进展
脂质体进入体内血液循环,通过被动靶向作用聚集于网状内皮系统(reticuloendothelial system,RES)比较丰富的器官.靶向性是脂质体作为药物载体的一个重要特征,粒径和表面电荷是影响脂质体在体内被动靶向的重要理化因素.本文阐述了脂质体的粒径和表面电荷对其与细胞结合和被细胞摄取的影响,并从体内组织器官的生理特点出发,介绍了粒径和表面电荷对脂质体在血液、肝、脾及肿瘤组织分布的影响.对今后的研究方向进行了展望.
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电荷反转型纳米给药系统的分类及在肿瘤治疗中的应用
针对肿瘤特殊结构及理化性质而设计的刺激响应型纳米给药系统越来越引起研究者们的1注,电荷反转型纳米给药系统(charge-reversal nano drug delivery system,CRN-DDS)就是其中之一.CRN-DDS可以有效地结合正、负电荷在药物体内递送过程中的优势,且有很好的肿瘤靶向性.虽然CRN-DDS应用于肿瘤治疗的研究已有文献报道,但相关的中文文献,尤其是综述型文献很少.为此,笔者查阅了近6年来CRN-DDS的相关文献资料,按照电荷反转的不同机制对CRN-DDS进行了归纳分类,分析和总结了其在肿瘤治疗中的应用研究,对CRN-DDS的发展和应用前景进行了初步展望.
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关于壳聚糖材料生物相容性机制的新观点
目的:近年来,壳聚糖作为组织工程支架得到广泛应用,本文总结了壳聚糖生物相容性研究进展,提出细胞与壳聚糖相互作用可能机制的猜想,并对证实该猜想的试验模型进行初步探讨.资料来源:用计算机检索Medline,Pubmed和Elsevier数据库1998-01/2006-12与壳聚糖生物相容性研究相关的文章,检索词为"chitosan,biocompatibilty,surface charge,cell adhesion",并限定文章语言种类为English.资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①选择与壳聚糖生物相容性,壳聚糖和细胞相互作用有关的文章.②着重关注研究壳聚糖表面电荷对细胞粘附影响的文献.排除标准:重复研究.资料提炼:共搜集到374篇相关文献,对其中入选的30篇文献进行归纳和分析.资料综合:多种哺乳动物细胞能够在壳聚糖材料上粘附、铺展、增殖,部分学者认为这是由于壳聚糖材料上氨基带正电,因此和带负电的细胞之间存在静电吸引作用造成的.然而实验结果表明,壳聚糖链上氨基的pKa值在6.2～6.8之间,因此在生理条件下壳聚糖材料表面的大部分氨基会去质子化,从而造成壳聚糖所带正电荷相对于酸性条件时大幅度下降.基于此,作者认为壳聚糖的生物相容性是否由其正电荷引起还需要深入研究.结论:结合已有的研究结果,提出猜想:正电荷可能不是导致壳聚糖材料生物相容性的主要因素.同时认为琼脂糖/壳聚糖混合水凝胶可能是验证此猜想的有效模型.
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动物组织细胞分离纯化方法学
要了解某种特定细胞的结构、功能或表面标志等特征,就必须将其在体外培养增殖获得足够的数量以供研究,这首先就必须获取种子细胞.从血液、淋巴液等液体中分离细胞时,可直接进行纯化,从心脏、肝脏等器官分离细胞时,一般的方法是先获得细胞悬液,再对其进行分离纯化.近年来细胞分离纯化技术发展较迅速,它们主要依据两类原则:(1)各种细胞不同的物理性状,如:大小、密度、表面电荷及黏附能力等;(2)各种细胞表面受体或抗原的差异.本研究对其中一些方法在比较的基础上进行综述.
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驻极体对成纤维细胞生长和表面电荷的影响
目的：研究驻极体对成纤维细胞表面电荷的影响及其细胞表面电荷与细胞生长、细胞凋亡的关系。方法：选用±300 V和±1 000 V驻极体分别作用成纤维细胞24、48和72 h，用流式细胞术和细胞电泳技术测定成纤维细胞的生长周期和细胞表面电荷。结果：(1)负极性驻极体作用成纤维细胞使细胞的电泳率和S期内的细胞数显著增加。(2)成纤维细胞表面负电荷和S期内细胞数的增加量与驻极体的表面电位成正比。(3)负极性驻极体能减少凋亡细胞的表面电荷量。(4)正极性驻极体作用成纤维细胞使G2和S期中的细胞数减少，同时减少了细胞表面的负电荷数量。结论：负极性驻极体具有促进成纤维细胞生长和增加细胞表面负电荷量的作用。正极性驻极体具有抑制成纤维细胞生长和降低细胞表面电荷密度的作用。凋亡细胞的表面电荷量较正常细胞要少。
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糖尿病患者红细胞形态和渗透脆性的初步研究
糖尿病患者红细胞膜表面电荷下降,细胞膜流动性降低,红细胞氧运送减少等已有报道[1,2],这些异常与红细胞形态变化有一定关系.为了进一步观察糖尿病患者外周血红细胞形态改变和有关影响因素,我们应用扫描电镜观察了22例糖尿病患者4 400个红细胞形态变化,并同时测定了红细胞膜的渗透脆性.
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柠檬酸钠法快速鉴定自身免疫性溶血性贫血患者疑难血型的尝试
目的:寻求一种简单快速的方法鉴定自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者的疑难血型,试图解决这一现有的行业困难.方法:采用柠檬酸钠溶液抑制AIHA患者血型鉴定中易于发生的红细胞非特异性凝集,使血型鉴定结果得以正确判断.结果:连续3例AIHA疑难血型鉴定获得正反定型一致的结果,有效配合了紧急的输血与治疗.结论:对于AIHA患者的疑难血型鉴定,柠檬酸钠法可以解决非特异性凝集所致的血型正反定型不符,操作难易程度与常规法血型鉴定相当,值得进一步研究与推广应用.
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新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究
目的：采用新型超顺磁性氧化铁对 SD 大鼠来源的脂肪干细胞（ADSCs）进行标记，并与既往商用 SPIO 标记效果进行对比，探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法：分离、纯化、鉴定 SD 大鼠来源的 ADSCs，然后分不同浓度组（0、6、12、25、50和100μg／mL）和时间组（6、12、24和48 h）进行标记，通过普鲁士蓝染色测定铁标记率；在不影响细胞形态的前提下，对达到95％以上铁染色率的孵育浓度、时间进行标记安全性检测，包括活力、增殖力、细胞表面抗原表达；采用透射电子显微镜观察标记细胞的超微结构，采用 ICP-AES 对标记细胞内的铁含量进行测定，并与商用SPIO 标记效果进行对比。结果：在无细胞毒性的前提下，新型 SPIO 达到95％以上铁染色率的孵育浓度是12和25μg／mL，孵育时间是12 h；ICP-AES 检测显示具有表面正电荷的聚乙二醇（PEG）／聚乙烯亚胺（PEI）修饰的 SPIO 标记后细胞内的铁含量达到35．4 pg／cell（25μg／mL 中孵育12h 后）和20．16 pg／cell（12μg／mL 中孵育12h 后），并随着孵育浓度的增加，细胞内的铁含量增加；而具有表面零电荷的 PEG／聚乙烯吡咯烷酮（PVP）修饰的 SPIO 标记后的铁含量仅为6．96 pg／cell（25μg／mL 中孵育12h 后）；透射电子显微镜显示标记后细胞器结构完整，内吸收的 SPIO 主要位于细胞质内的囊泡和溶酶体中。结论：新型 SPIO 在适当孵育浓度和时间下可以安全、快速标记 ADSCs；PEG／PEI 修饰的 SPIO 标记效果要远远比既往商用的 SPIO 快速有效，可作为一种优势的新型磁性标记物用于干细胞标记；而 PEG／PVP 修饰的SPIO 比起既往商用的 SPIO 并无明显优势，说明表面电荷在细胞标记中占有极其重要的角色。
