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首都某阅兵村鼠类种群分布及灭鼠效果观察
为了解建国50周年首都阅兵部队驻地及其周围鼠密度和种群分布情况，防止鼠害或鼠传 疾病发生，确保受阅部队官兵集训期间的身体健康，1999年3～10月对阅兵村及其周围进行 了鼠密度及种群调查和3次大面积灭鼠活动。1 阅兵村自然概况 该阅兵村搭建于北京郊区某军用机场草地上。阅兵村及周围6km2为军事用地，相对封闭， 与两个自然村毗邻。阅兵村占地约0.6km2，村东侧有约400余亩的50个鱼塘，西侧是 机场跑道和草地，西北侧200m处有两个养殖场，南侧为一占地约0.9km2的露天垃圾场。 该 地域海拔19.5m,地势低洼，夏季杂草丛生，适于鼠类生存栖息，尤其是鱼塘、养殖场散 落的饲料及鱼塘边的死鱼是鼠类良好食物来源，因而该处鼠患猖獗,鼠洞、鼠迹明显。2 材料及方法2.1 材料 中号捕鼠夹和捕鼠笼(江苏省江阴卫生设备厂生产); 0.037 5%灭鼠灵毒饵(北京军区联勤部卫生防疫队生产)、杀他仗蜡饵(美国氰胺公司生 产)。2.2 鼠密度调查范围及方法 选择0.6km2阅 兵村、1 000延长米的兵站营院、2 000延长米的鱼塘堤坝、500延长米的养殖场和 0.5km2的开阔地作为鼠密度调查范围;兵站营院和养殖场采 取夹捕法〔1〕(鼠夹或鼠笼，以新鲜油条为诱饵)，其他场所采用掘洞法〔1〕 。每次灭鼠投药前和投药2周后进行鼠密度调查。对所捕鼠进行种属鉴别。2.3 灭鼠范围及方法 确定阅兵村及周围6.0km 2为灭鼠范围。阅兵村及机场草地以行距10m、株距5m投毒饵20g;鱼塘堤坝沿四周间隔5m投 药20g;营院和养殖场沿房基四周间隔5m投饵药20g。投药后第3及7d补充投药，补投时吃净或 见洞加倍投药，分别于3月下旬(部队进驻前)、6月中旬和9月上旬(部队进驻后)开展3次统一灭鼠。平时在阅兵村食堂、伙房、食品库等场所 设置毒饵站;为防止阅兵村外鼠类窜入村内，在四周50m范围内投放毒饵，设置隔离带。毒饵 站内投放杀他仗蜡饵，其他场所用灭鼠灵毒饵。
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动物细胞同工酶检测方法的改良及其应用
同工酶是一类催化功能相同但化学组成和结构不同的酶,广泛地存在于高等生物细胞内.不同种属来源的细胞具有不同的同工酶分布,通过电泳分离可得到它们特异性的同工酶图谱,因此同工酶检测可作为种属鉴别的依据.
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狗股骨组织形态学特征的研究
目的 研究鉴别狗股骨组织学的形态特征.方法 取50只2年生以上家犬右后股骨中段做成骨骼组织学切片,经过固定、脱钙、冰冻骨骼组织切片及硫堇苦味酸染色,在显微镜下观察,将显微镜下的图像录入电脑.利用专业软件进行分析、统计数据.结果 狗股骨外环骨板较宽,以较致密的呈层状排列的梭形骨细胞形式存在.内环骨板较窄,以较疏松的呈层状排列的梭形骨细胞形式存在.外环骨板与骨单位分界比内环骨板分界清晰.骨单位较多,形态规则,多呈圆形或类圆形.排列多无规律,靠近外环骨板的骨单位大而圆,靠近内环骨板的骨单位小而椭圆.骨陷窝较多,分布稀疏,未见骨小梁.结论 狗股骨组织学形态特征明显,为骨骼组织学的研究积累了资料,有助于种属鏊别的开展.也为研究生物进化提供了新的观察指标.
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利用限制性片段长度多态性技术鉴别梅花鹿骨种属来源的研究
目的: 建立一种基于限制性片段长度多态性技术鉴别梅花鹿骨粉的种属来源的方法.方法: 对脱钙后的动物骨粉样品进行核糖核酸提取,通过聚合酶链式反应对梅花鹿特征片段进行扩增,并通过限制性片段长度多态性分析进一步对其种属来源进行确证.结果: 通过对特征片段进行聚合酶链式反应扩增,可将梅花鹿及马鹿来源的骨粉样品与牛、猪、狗等动物骨粉样品进行区分.通过对限制性内切酶XbaI进行酶切后的片段长度进行分析,可进一步区分梅花鹿与马鹿来源的骨粉样品.结论: 建立了一种基于限制性片段长度多态性技术的梅花鹿骨粉种属来源的鉴别方法.
关键词： 梅花鹿骨 限制性片段长度多态性 聚合酶链式反应 种属鉴别 -
基于细胞色素b序列差异的细胞种属鉴别及种属间细胞交叉污染的快速检测方法
目的:建立一种优于传统方法的、简单快速和灵敏度高的细胞种属鉴别及种属间细胞交叉污染的PCR检测方法.方法:以细胞色素b(cytochrome b)作为研究内容,设计并优化针对10种不同动物种属的引物,进行单种属引物和混合种属引物PCR反应的比较研究.结果:本文设计出可通过混合引物单PCR方式高效、敏感地检测10种常见动物种属细胞,并有效判断种属间细胞交叉污染的PCR检测方法.结论:本方法明显优于传统的细胞种属鉴定及种属间细胞交叉污染的方法,能显著提高对细胞资源库细胞、生产用细胞基质及治疗性细胞产品的质控能力.
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细胞色素C肽图分析
目的:对不同种属来源的细胞色素C原料及上市细胞色素C制剂进行肽图分析,建立细胞色素C的种属鉴别方法.方法:将细胞色素C用胰蛋白酶酶解处理后,采用高效液相色谱分析,色谱柱为Grace Vydac 208TPC8(5 mm,250 mm×4.6mm),流动相A为含0.1％三氟乙酸的水溶液,流动相B为含0.1％三氟乙酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,检测波长214 nm.结果:马心源和鸡胸肉源的细胞色素C与猪心、牛心来源的细胞色素C肽图谱差别较大,可以明显区分开来,而猪心、牛心来源的细胞色素C肽图谱基本一致;制剂肽图显示均为猪心或牛心源细胞色素C.结论:法定标准规定细胞色素C应由猪心或牛心提取,建立的肽图分析方法能够将标准规定以外的其他来源的样品鉴别出来,可以作为细胞色素C的种属鉴别方法.
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马和人股骨碎片组织形态学结构特征及其鉴别
目的 研究成体马和成年人的股骨组织形态学结构,分析其组织学特征,建立人与马之间的种属鉴别方法.方法 取来源于尸体检验的成人右股骨中段约4cm,同时收集马的右腿股骨,取中段约4cm,脱钙后制作成厚约25μm的骨组织切片,在光学显微镜下观察,将显微镜下的图像录入电脑,选取25项指标进行逐步判别分析.结果 马和人在哈氏系统数量、哈氏系统直径等13个指标上具有显著差异,用这些指标建立种属判别数学模型,经盲测检验,二者的判别率可达99.6%.结论 马和人的股骨组织学结构具有明显的种属特征,建立的判别方程可以有效地鉴别马和人的股骨碎片.
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应用mtDNA COI基因序列鉴别常见嗜尸性蝇类种属
目的 探讨mtDNA基因序列对常见嗜尸性蝇类的种属鉴别应用价值.方法 收集不同区域2科4属6个种30个蝇类样本,提取样本线粒体DNA后扩增COI基因序列,以琼脂糖电泳检测扩增产物并测序,以DNAMAN6.0分析软件分别截取498bp序列,用MEGA5.2软件分别进行序列分析,然后构建系统发育树,比较各地区不同种属样本的序列差异.结果 6个种属的嗜尸性蝇类30个样本mtDNA的COI基因具有一定的序列差异,种内进化分歧均数在0.1%~1.6%之间,种间进化分歧均数在2.2%~11.2%之间,6个种属通过系统发育树均可明确区分.结论 COI基因序列分析和系统发育树对嗜尸性蝇类的种属检验具有重要帮助作用,可用于现场样本的准确、快速种属鉴定.
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NCBI数据库在常见嗜尸性蝇类种属鉴别中的应用
目的 探讨NCBI数据库比对分析对常见嗜尸性蝇类种属鉴别中的应用价值.方法 收集2009年1月至2012年12月重庆市常见嗜尸性蝇类不同发育历期2科5属7种样本52份,采用Chelex100法提取mtDNA,利用2对引物扩增细胞色素C氧化酶辅酶Ⅰ基因,分别截取498bp和841bp相同长度的序列,采用MEGA软件计算种内及种间进化分歧情况,并分别在NCBI数据库进行序列BLAST搜索种属同源性比对分析.结果 所得序列种内进化分歧均数在0％～0.7％之间,种间进化分歧均数在7.5％～16.1％之间;7个种属的样本序列Ⅰ和序列Ⅱ分别有5个和6个种属完全比对正确,样本总体的正确率分别达到96.15％和98.08％,Max ident值均在97％以上.结论 采用序列同源性比对分析,并借助NCBI数据库强大的检索分析功能,可准确进行常见嗜尸性蝇类的种属鉴定,为法医学死亡时间推断提供重要参考依据.
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根据股骨组织形态学变化进行骨骼种属鉴别
目的 通过对成年人、成体黄牛、马、家猪、山羊、绵羊、狗、猫、长毛兔、鹅、鸭、鸡共12个种属动物股骨组织形态学结构特征的研究,建立一个有效的各类动物间种属鉴别的方法.方法 在征得家属同意后,在尸检中取成人(20岁以上)右股骨中段约4cm,同时,收集黄牛、马、家猪、山羊、绵羊、狗、猫、长毛兔、鹅、鸭、鸡共11种常见动物右腿股骨,取中段约4cm,脱钙后制作成骨组织切片,在光学显微镜下观察,将显微镜下的图像录入电脑,选取24个指标进行分析.结果 人与其他动物、以及各被检动物之间在骨单位数量等13个指标上具有显著差异,用这些指标建立种属判别数学模型,结果这些动物之间的判别率也可达89.4％.结论 股骨中段骨密质的组织学结构具有明显的种属特征,且骨单位形态和数量呈现明显的生物进化趋势.根据这些特征可以有效地进行种属鉴别.
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人和猪、羊、牛肌组织形态的比较及法医学意义
目的 观察不同种属肌组织形态的特征指标,建立种属鉴别的判别方程,尝试建立一种种属鉴别新方法. 方法 分别提取20名成年死者三个部位(肱三头肌、股二头肌和竖脊肌)的肌组织和达到出栏年龄的猪、羊、牛各20头三个部位(臂三头肌、股二头肌和背长肌)的肌组织,制成石蜡切片.测量人及猪、羊、牛肌组织的11项观察指标,并应用统计学方法进行分析,建立种属判别方程.结果 筛选出4项观察指标建立人与猪、羊、牛之间种属鉴别的判别方程,对人肌组织的判别准确率可达90％,对猪、羊、牛肌组织的判别准确率分别可达80％、100％和80％.结论 形态学方法为人与猪、羊、牛之间肌组织的种属鉴别提供了一种新的方法,可为动物种属鉴别提供参考依据.
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基于股骨组织形态学变化进行种属鉴别
目的：研究成年人，成年黄牛、马、家猪、山羊、绵羊、狗、猫、长毛兔、鹅、鸭、鸡共11种动物股骨组织形态学结构，建立有效的种属鉴别方法。方法取进行尸体检验的成人（20周岁以上）右股骨中段约4 cm，同时取11种常见动物右腿股骨中段约4 cm，脱钙后制作成骨组织切片，在光学显微镜下观察，选取25个指标按人与哺乳动物、人与家禽、人与11种动物进行逐步判别分析。结果股骨中段骨密质的组织学结构具有明显的种属特征，且骨单位形态和数量呈现明显的生物进化趋势。选出11项指标建立人与11种动物的种属判别方程，人与哺乳动物的正确判别率可达96.3%，人与家禽的正确判别率可达100%，人与11种动物的正确判别率可达89.4%。结论本研究建立的人与其他种属动物的判别方程具有较高的正确判别率，可以用于实际检案中的种属鉴别。
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潍坊地区六种常见嗜尸性蝇类mtDNA COI区序列研究
目的解决蝇类成虫、蛹和蛆快速、准确鉴定的难题.方法随机采集潍坊地区人尸周围环境中的蝇类成虫、蛹和蛆,提取其mtDNA,经PCR扩增、产物检测与纯化、测序等,比较其序列差异.结果六种常见嗜尸性蝇类相互之间序列差异明显,同一种蝇的成虫、幼虫、蛹之间未见差异.结论 mtDNA COI区序列分析可作为法医学嗜尸性蝇类种属鉴别的可靠方法.
关键词： 嗜尸性蝇类 种属鉴别 线粒体DNA细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ 法医学
