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雌性大鼠心内神经节中雌激素受体及其mRNA的表达
目的在雌激素受体蛋白及ERmRNA水平提供雌激素对心内神经节中神经元作用的形态学依据.方法采用免疫组织化学及原位杂交技术. 结果在心内神经节部分神经元中,雌激素受体免疫反应及其mRNA原位杂交反应阳性.雌激素受体免疫反应沉淀物呈棕黄色,定位于胞核,雌激素受体mRNA免疫反应沉淀物呈棕黄色,定位于胞浆. 结论大鼠心内神经节中,部分神经元能合成雌激素受体蛋白,说明ER阳性神经元可以为雌激素提供结合位点,因此,这些神经元可能受到雌激素的影响.
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雄激素对大鼠心内神经节神经生长因子表达的影响
目的观察神经生长因子(NGF)在成年雄性大鼠、雌性大鼠、雌性大鼠睾酮处理组、睾丸切除大鼠、睾丸切除后睾酮替代大鼠心房后壁心内神经节的表达及变化. 方法免疫组织化学染色. 结果各组大鼠心内神经节均存在NGF阳性神经元,但睾丸切除组大鼠心内神经节NGF阳性神经元的数量明显减少,表达明显降低. 结论心内神经节细胞内含NGF;雄激素可能影响心内神经节细胞的NGF表达.
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神经生长因子在大鼠心内神经节的表达
目的观察成年和中老年大鼠心内神经节神经生长因子(NGF)阳性神经元的存在及其变化. 方法免疫组织化学法. 结果成年及中老年大鼠心内神经节均存在NGF阳性神经元,但中老年大鼠心内神经节NGF阳性神经元明显减少,表达明显降低. 结论心房后壁心内神经节存在NGF阳性神经元,并随年龄增加表达减少,提示NGF表达的减少可能与心脏功能的退化相关.
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大鼠心内神经节细胞雄激素受体的研究
有关雄激素受体在动物心肌组织的分布已有报道,但该受体在心内神经节细胞的配布尚未见报道.本实验取成年SD雄性大鼠的心房做冰冻切片,微波抗原修复后进行免疫组织化学染色(SP法,一抗为鼠抗雄激素受体1:200,博士德公司.二抗、三抗均为1:200,中山公司).光镜下观察,在心房的心内神经节发现雄激素受体阳性神经元,棕色的阳性反应颗粒定位于细胞核区,胞浆空白,亦见部分阳性神经元胞浆呈棕色淡染现象;阳性细胞数约占神经节细胞总数的60%;该类神经元胞体多数呈圆形或椭圆形,大、中、小型细胞均有发现.
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不同强度运动对去卵巢大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰化酶和一氧化氮合酶表达的影响
目的:探讨不同强度运动对去卵巢大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰化酶(ChAT)和一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响.方法:将40只Wistar大鼠随机分为去卵巢对照组,去卵巢+低强度运动组,去卵巢+中等强度运动组及去卵巢+大强度运动组.8周实验后,采用免疫组化法结合图像分析比较大鼠心内神经节细胞中ChAT和nNOS积分光密度值(IOD)的变化.结果:去卵巢+中等强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比显著增高(P＜0.01);去卵巢+低强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比无显著差异(P＞0.05);去卵巢+大强度运动组ChAT和nNOS的IOD值与去卵巢对照组相比显著下降(P＜0.05).结果表明,中等强度运动可上调卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中ChAT和nNOS表达.
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大鼠心内神经节白介素-6的表达
目的 观察大鼠心内神经节白介素-6的表达.方法 用免疫组织化学方法观察大鼠心内神经节白介素-6(IL-6)阳性神经元的存在.结果 显示雌、雄大鼠心房后壁心内神经节均存在IL-6免疫阳性神经元,散在分布于心内神经节,细胞多为圆形或卵圆形,以小及中型为主.结论 提示IL-6在心内神经节的存在,为神经免疫网络在心脏的存在提供了形态学依据.
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大鼠心内神经节雌激素受体和免疫因子白介素6的共存
目的:研究雌激素受体(ER)和免疫因子白介素6(IL-6)在心内神经节的表达,并证实它们共存的可能性.方法:免疫细胞化学双重标记技术.结果:切片上观察到 3种细胞:①ER单标细胞,胞核呈棕褐色;②IL-6单标细胞,胞浆呈红色;③ ER / IL-6双标细胞,胞核棕褐色,胞浆为红色.双标细胞占全部阳性标记细胞的20%～30%.结论:ER和IL-6可共存于同一大鼠心内神经节细胞,从而在细胞水平为神经免疫内分泌网络在心脏的存在提供了直接的形态学证据.
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雌激素对大鼠心内神经节IL-6和NGF表达的影响
目的:观察白介素6(IL-6)和神经生长因子(NGF)在成年雌性大鼠、卵巢切除大鼠、卵巢切除后雌二醇替代大鼠心内神经节的表达及变化.方法:免疫组织化学方法.结果:各组大鼠心内神经节均存在IL-6阳性神经元和NGF阳性神经元,但卵巢切除组大鼠心内神经节IL-6阳性神经元明显增多,表达明显增强,而卵巢切除组大鼠心内神经节NGF阳性神经元的数量却明显减少,表达明显降低.结论:心房后壁心内神经节存在IL-6和NGF,并且受雌激素影响,提示雌二醇可能影响心内神经节IL-6和NGF的表达.
关键词： 白介素6(IL-6) 神经生长因子(NGF) 雌激素 心内神经节 免疫组织化学 -
雌激素对大鼠心内神经节神经生长因子表达的影响
目的:观察神经生长因子(NGF)在卵巢切除大鼠心房后壁心内神经节的表达及雌激素的调节作用.方法:实验动物分正常组、卵巢切除组、卵巢切除后雌二醇替代组,各组动物审温下饲养3周后,进行 NGF 免疫组织化学显色.结果:各组大鼠心内神经节均存在 NGF 阳性神经元,该类神经细胞胞体多数呈圆形或椭圆形,大、中、小型细胞均有发现.正常组和卵巢切除后雌二醇替代组 NGF 免疫阳性神经无约占全部神经节细胞总数的比例分别为 61%和64%,但卵巢切除组大鼠心内神经节 NGF 阳性神经元的数量明显减少,表达明显降低,NGF 免疫阳性细胞约占全部神经节细胞总数的比例为28%.结论:心内神经节细胞内含 NGF;雌激素可能影响心内神经节细胞的 NGF 表达.
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雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞胆碱乙酰基转移酶和一氧化氮合酶表达的影响
目的:探讨雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中神经递质的影响.方法:建立去卵巢(OVX)和雌激素替代疗法动物模型,2个月后用免疫组化结合图象分析方法观察大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和一氧化氮合酶(NOS1)的变化.结果:在OVX大鼠心内神经节细胞中ChAT和NOS1较正常对照组明显减少,雌激素(E2)替代治疗组与正常对照组相比无明显变化,OVX+雌激素受体拮抗剂(TAM)组较正常对照组显著减少,但与OVX组无明显差异.结论:雌激素能上调大鼠(OVX)心内神经节细胞中ChAT和NOS1的表达,雌激素可能够通过对心内神经节细胞中神经递质的调节,间接发挥对心血管功能的调节作用.
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大鼠心内神经节雄激素受体和神经生长因子的共存
目的:研究雄激素受体(AR)和神经生长因子(NGF)的表达,证实它们在心内神经节共存的可能性.方法:免疫细胞化学双重标记技术.结果:切片上观察到3种细胞:(1)AR单标细胞,胞核呈棕褐色;(2)NGF单标细胞,胞浆呈红色;(3)AR/NGF双标细胞,胞核棕褐色,胞浆为红色.双标细胞占全部阳性标记细胞的50%～60%.结论:AR和NGF可共存于同一大鼠心内神经节细胞,提示雄激素和NGF在维持心内神经节的结构和功能方面存在复杂的交互作用.
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支配肺的心内神经节一氧化氮能阳性神经元的研究-神经追踪与组织化学结合法
目的:探索大鼠支配肺的心内神经节细胞是否含有递质一氧化氮.方法:以荧光追踪剂/一氧化氮合酶组织化学结合技术将快兰(fast blue,FB)注入大鼠肺内,在心内神经节区切片进行一氧化氮合酶组织化学染色反应.结果:发现部分FB标记的心内神经节细胞含递质一氧化氮(nitrogen monoxide,NO).6只动物发现FB/NO双阳性神经细胞128个,占NO阳性神经细胞的3.5±1.8%,散在分布于心内神经节.细胞多为卵圆及梭形.以中、小型为主.讨论:本实验证实支配肺的部分心内神经节细胞以NO为递质,实现对肺的调节.
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雄性大鼠去睾丸后心内神经节雄激素受体蛋白和ARmRNA表达的变化
目的:观察雄激素受体(androgen receptor,AR)蛋白及其mRNA在正常组、睾丸切除组和睾丸切除后睾酮替代组大鼠心内神经节的表达及其是否受雄激素的影响.方法:免疫组织化学和原位杂交.结果:三组大鼠心内神经节均存在AR阳性神经细胞,与正常对照组相比,睾丸切除组大鼠心内神经节AR阳性神经细胞数目明显减少,表达明显降低;睾酮替代后AR反应性上升并恢复至正常对照组水平.结论:心房后壁心内神经节存在AR,并且受雄激素调节.
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雌性大鼠心内神经节细胞中ER与ChAT的共存
目的探讨雌性大鼠心内神经节细胞中ER与ChAT共存的可能性.方法采用免疫组织化学SABC法双重标记技术,用鼠抗ER血清和羊抗ChAT血清分别孵育切片,葡萄糖氧化酶-硫酸镍胺或DAB/AP-red试剂盒呈色,前者的反应产物呈黑兰色或棕黄色,后者的反应产物呈鲜红色.结果在ER/ChAT双重免疫组织化学反应下可见两种细胞:①ER/ChAT双标细胞:胞核为ER-IR阳性,反应产物棕黄色,胞浆为ChAT-IR阳性,反应产物鲜红色;②ChAT单标细胞:胞浆为ChAT-IR阳性,反应产物鲜红色,胞核未见着色;在ER和ChAT双重染色的切片上没有发现ER的单标细胞;ER-IR阳性神经元约占ChAT-IR神经元总数的27%.结论大鼠心内神经节细胞中ER-IR阳性神经元均为胆碱能神经元.
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雌激素对雌性大鼠心内神经节细胞中NOS1表达的影响
目的探讨雌激素对大鼠心内神经节细胞中NOS1表达的影响.方法本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型,正常饮食饲养2个月后处死大鼠,然后用免疫组化结合图象分析方法观察大鼠心内神经节细胞中NOS1的变化.结果去卵巢大鼠心内神经节细胞中NOS1的表达较正常对照组明显减弱,雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中NOS1的表达与正常对照组相比无显著性差异(P＞0.05),而较卵巢摘除组显著增高;OVX+TAM+E2组大鼠心内神经节中NOS1的表达较正常对照组显著减弱, 但与OVX组无显著性差异(P＞0.05).结论雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中NOS1的表达.
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雌激素对雌性大鼠心内神经节细胞中ChAT表达的影响
目的探讨雌激素对大鼠心内神经节细胞中ChAT表达的影响.方法本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型,正常饮食饲养2个月后处死大鼠,然后用免疫组化结合图象分析方法观察大鼠心内神经节细胞中ChAT的变化.结果去卵巢大鼠心内神经节细胞中ChAT的表达较正常对照组明显减弱,雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中ChAT的表达与正常对照组相比无显著性差异(P＞0.05),而较卵巢摘除组显著增高;OVX+TAM+E2组大鼠心内神经节中ChAT的表达较正常对照组显著减弱, 但与OVX组无显著性差异(P＞0.05).结论雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中ChAT的表达.
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雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1的共存
目的探讨雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存的可能性.方法采用免疫组织化学SABC法双重标记技术,用鼠抗ER血清和兔抗NOS1血清分别孵育切片,葡萄糖氧化酶-硫酸镍胺-DAB/AP-red试剂盒呈色.结果在ER/ NOS1双重免疫组织化学反应下可见三种细胞:①NOS1单标细胞:胞浆为NOS1-IR阳性,反应产物鲜红色,胞核未见着色;②ER单标细胞:胞核为ER-IR阳性,胞浆未见明显染色.③ER/ NOS1双标细胞:胞核为ER-IR阳性,反应产物黑蓝色,胞浆为NOS1-IR阳性,反应产物鲜红色.ER/NOS1双标细胞约占NOS1-IR阳性神经元总数的19%、占ER-IR阳性神经元总数的34%.结论雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存,部分ER-IR阳性神经元为NO能神经元.
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雌激素对大鼠心内神经节血管内皮生长因子表达的影响
目的: 用免疫组织化学方法观察成年雌性大鼠,卵巢摘除组大鼠,卵巢摘除后17 beta雌二醇肌肉注射组大鼠的心内神经节血管内皮生长因子(VEGF)的表达及变化.方法:免疫组织化学染色.结果: ①各组大鼠心内神经节均存在VEGF表达阳性神经细胞;②卵巢摘除组大鼠心内神经节VEGF 阳性神经元明显减少,表达明显减弱(P＜0.05).结论: 心内神经节细胞表达血管内皮生长因子(VEGF);雌激素可能影响心内神经节VEGF的表达.
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心肌缺血大鼠心内神经节神经生长因子表达的变化
目的 观察神经生长因子在急性心肌缺血大鼠心内神经节表达及其变化,探讨神经生长因子与心肌缺血的关系.方法 采用免疫组织化学方法动态观察了正常大鼠以及大鼠冠状动脉结扎后1、6、12、24 h心内神经节神经生长因子的表达及变化.结果 各组大鼠的心内神经节均存在神经生长因子阳性神经元,并且神经生长因子阳性神经元的数目在冠状动脉结扎后1、6、12、24 h后增多,表达也增强.结论 心肌缺血大鼠心内神经节神经生长因子表达持续显著升高,提示神经生长因子可能参与心肌缺血的病变过程.
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白介素-6在大鼠心内神经节的表达
目的观察大鼠心内神经节白介素-6(IL-6)阳性神经元的存在.方法取10只Winter大鼠心房后壁恒冷箱切片,用免疫组织化学方法观察白介素-6阳性神经元.结果雌雄大鼠心房后壁心内神经节存在IL-6免疫阳性神经元,散在分布于心内神经节,细胞多为圆形或卵圆形,以小及中型为主.结论 IL-6在心内神经节的存在为神经免疫网络在心脏的存在提供了形态学依据.
关键词： 白介素-6(IL-6) 心内神经节 免疫组织化学 大鼠
