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赖氨大黄酸抑制p-EGFR诱导宫颈癌CaSki细胞系细胞凋亡
目的 研究赖氨大黄酸(RHL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖、凋亡的影响及EGFR信号通路在其中的作用.方法 应用MTT法检测RHL对CaSki细胞增殖的影响；应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测EGFR信号通路蛋白表达水平及其蛋白磷酸化水平.结果 RHL能有效抑制宫颈癌CaSki细胞增殖,48和72 h的ⅠC50值分别是84.57 μmol/L和74.79μmol/L,RHL能诱导CaSki细胞凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高；RHL能够抑制EGFR、AKT蛋白磷酸化,并显著下调NF-κB、BCL-2及Survivin蛋白的水平(P＜0.01),同时RHL还上调BAX蛋白的表达(P＜0.01).结论 RHL可能通过EGFR/AKT/NF-κB/Survivin信号通路诱导CaSki细胞凋亡.
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赖氨大黄酸减轻百草枯中毒小鼠心脏损伤
目的：观察赖氨大黄酸（ RHL）对百草枯中毒小鼠心脏损伤的保护作用及其机制。方法小鼠随机分为对照组、百草枯模型组（腹腔注射百草枯建立活性氧自由基引起心脏损伤的小鼠模型）及RHL治疗组（造模前1周给予RHL（50 mg／kg）。用硫代巴比妥酸法检测心脏组织MDA含量，用联苯三酚自氧化法检测SOD活性，用NADPH偶联法检测GSH-Px活性。 HE染色及DCFH-DA染色分别观察心脏病理改变及活性氧水平；Western blot 检测心肌衰老相关基因的表达。结果与对照组相比，百草枯模型组小鼠心脏组织SOD和GSH-Px活性下降（ P＜0.05），MDA水平升高（ P＜0.05），RHL能减轻百草枯的作用（ P＜0.05）；百草枯引起心肌结构破坏，心肌组织活性氧水平升高， RHL减轻上述变化（ P＜0.05）。百草枯能够降低SIRT1的表达，增加P53的乙酰化及P53和P66的表达。 RHL减轻上述变化（ P＜0.05）。结论 RHL可以减轻百草枯中毒后所致的小鼠心脏损伤。
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赖氨大黄酸通过激活JNK诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡
目的 研究赖氨大黄酸(RHL)对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 用MTT法检测细胞增殖;用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western blot检测凋亡相关蛋白及JNK蛋白与蛋白磷酸化水平.结果 RHL能有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;RHL能够激活caspase-3、caspase-7和PARP,并激活磷酸化的JNK表达,磷酸化的JNK表达增加在RHL的诱导凋亡中起主要作用.结论 RHL通过激活JNK-caspase-PARP信号通路抑制HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的问题,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物.
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赖氨大黄酸与顺铂联合对人肺癌A549细胞系增殖和凋亡的影响
目的 研究赖氨大黄酸(RHL)、顺铂和两者联合对人肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制,为RHL联合顺铂抗肺癌的临床实验研究提供理论依据.方法 肺癌细胞系A549随机分为对照组、顺铂组、RHL组和顺铂联合RHL组,用MTT法和流式细胞术分别检测细胞48 h增殖和凋亡.Western blot法检测细胞48 h后凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达.结果 细胞培养48 h后,顺铂组和RHL组的细胞增殖受到一定的抑制并有细胞凋亡发生,但两药联合后的增殖抑制作用和凋亡诱导作用显著高于单用顺铂和RHL组(P＜0.05).顺铂和RHL均能上调caspase-3、caspase-7和poly ADP-ribose polymerase (PARP)的切割片断蛋白表达,但两药联合后caspase-3、caspase-7和PARP的切割片断蛋白表达进一步增高(P＜0.05),并显著下调Bcl-2蛋白的表达水平,上调Bax蛋白的表达水平,同时RHL还能降低顺铂上调的ERK蛋白磷酸化.结论 RHL能够通过抑制顺铂对ERK的激活、上调caspase-3、caspase-7和PARP的切割片断蛋白表达,增强顺铂对肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用.
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赖氨大黄酸通过抑制HER-2信号通路诱导乳腺癌SK-Br-3细胞凋亡
为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用.应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting检测HER-2信号通路蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平;应用RT-PCR和免疫化学方法分别检测HER-2 mRNA和蛋白表达水平.结果显示,赖氨大黄酸能有效抑制乳腺癌SK-Br-3细胞增殖,作用48 h的IC50值为85 μmol·L-1,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;Western blotting结果显示,赖氨大黄酸抑制HER-2蛋白表达和蛋白磷酸化,抑制NF-κB蛋白表达,升高p53和p21蛋白表达;RT-PCR和免疫化学结果表明,赖氨大黄酸能抑制HER-2 mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白表达.因此,赖氨大黄酸能有效抑制SK-Br-3细胞增殖,并诱导其凋亡,HER-2/NF-κB/p53/p21参与了赖氨大黄酸诱导SK-Br-3细胞凋亡的过程.赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的难题,并且能够通过HER-2信号通路诱导细胞凋亡,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物.
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赖氨大黄酸对糖尿病小鼠肾脏的保护作用
①目的 观察赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对糖尿病小鼠肾脏的保护作用并探讨其保护机制.②方法 应用糖尿病饮食建立KK/H1J小鼠的糖尿病肾病模型,将患有糖尿病肾病的小鼠随机分为糖尿病肾病模型组、不同剂量RHL组(25和50mg/kg),同时采用同龄C57BL/J作为正常对照组,连续喂养12周后,对比观察小鼠的一般状态、体质量、肾质量以及肾质量/体质量比值的变化;留取血液测定血糖、血肌酐和尿素;留取部分肾脏组织进行匀浆后测上清液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧物(GSH-Px)活性.③结果 糖尿病肾病组小鼠明显不喜活动,毛色黯淡,RHL组小鼠一般状况明显改善;糖尿病组小鼠肾脏重量和肾质量/体质量的比值明显增高,RHL组小鼠肾质量和肾质量/体质量较模型组降低.糖尿病肾病模型组血糖、肌酐、尿素和肾组织MDA水平均明显升高,肾组织SOD和GSH-Px活性降低,RHL各剂量组血糖、肌酐、尿素和MDA水平显著降低,SOD和GSH-Px活性升高.④结论 赖氨大黄酸对糖尿病小鼠肾脏有保护作用,其机制可能与减轻肾脏氧化应激反应有关.
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赖氨大黄酸对D-半乳糖致衰老模型小鼠的肾脏保护作用及其作用机制
目的:研究赖氨大黄酸(RHL)对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老和肾脏保护作用,阐明其作用机制,为RHL预防衰老的研究提供依据.方法:通过腹腔注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,将小鼠随机分为对照组、衰老模型组和低、高剂量RHL组.除对照组外,其余各组小鼠每天腹部皮下注射D-半乳糖100 mg·kg-1,持续8周,对照组小鼠每天皮下注射等量生理盐水,低和高剂量RHL组小鼠分别每天1次灌胃25和50 mg·kg-1的RHL.观察各组小鼠一般状况,计算肾脏指数;检测血清和肾脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性;HE染色行肾脏组织病理学检查;Western blotting法检测肾脏衰老相关蛋白表达水平.结果:与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏指数降低(P＜0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P＜0.05),MDA含量升高(P＜0.05);与模型组比较,RHL组小鼠肾脏指数升高(P＜0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性升高(P＜0.05),MDA含量下降(P＜0.05).肾脏病理组织学检查,与衰老模型组小鼠比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞水肿减轻,且存在剂量依赖性.Western blotting法检测,与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏组织中沉默信息调节因子1 (SIRT1)蛋白表达水平降低(P＜0.05),P16和P21蛋白表达水平升高(P＜0.05);与衰老模型组比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中SIRT1蛋白表达水平升高(P＜0.05),P16和P21蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论:RHL通过抑制氧化应激、肾小管上皮细胞水肿和调控衰老相关基因的表达来发挥对衰老小鼠肾脏的保护作用.
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赖氨大黄酸和紫杉醇对肺癌细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用
目的:研究赖氨大黄酸(RHL)、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制.方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1 μmol · L-1紫杉醇)、RHL组(100 μmol·L-1RHL)和紫杉醇联合RHL组,并设空白组.采用MTT法和流式细胞术分别检测各组处理后48 h的细胞增殖率和凋亡率；采用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达水平.结果:细胞培养48 h后,联合用药组细胞增殖率显著低于对照组、紫杉醇组和RHL组(P＜0.05),联合用药组细胞凋亡率显著高于对照组、紫杉醇组和RHL组(P＜0.05),联合用药组caspase-3和poly ADP-ribose polymerase (PARP)的切割片段蛋白表达强度明显高于对照组、紫杉醇组和RHL组,联合用药组Bcl-2和NF-KB蛋白表达强度明显低于对照组、紫杉醇组和RHL组,同时RHL组紫杉醇上调的MEK和ERK蛋白磷酸化强度降低.结论:紫杉醇和RHL均可抑制肺癌H460细胞增殖,诱导细胞凋亡；RHL通过降低ERK活性、上调caspase-3和PARP的切割片段蛋白表达,增强紫杉醇抑制肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用.
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赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用及其分子机制
目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制.方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70 mg· kg-1RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠.通过胆总管结扎(BDL)方法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型.使用全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)水平;HE染色对肝脏组织行病理学检查;Masson三色染色观察肝组织纤维数量;使用试剂盒通过酶标仪测定肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布;Western blotting法检测α-SMA表达水平.结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平升高(P＜0.05);肝组织肝小叶结构被破坏,纤维异常增生,Hyp水平亦升高(P＜0.05).免疫组织化学染色,α-SMA着色于胞膜和胞浆且表达增多;Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠α-SMA表达水平升高(P＜0.05).与模型组比较,35和70 mg·kg-1RHL治疗组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平明显降低(P＜0.05).肝脏病理组织学,与模型组比较,35和70 mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中纤维成分数量减少,Hyp水平降低(P＜0.05);免疫组织化学和Western blotting法,与模型组比较,35和70 mg· kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中a-SMA表达减少(P＜0.05).结论:RHL能抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性和蓄积以发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,RHL有望成为治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物.
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赖氨大黄酸对糖尿病大鼠肝脏的保护作用及其机制
目的：探讨赖氨大黄酸（RHL）对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用，阐明 RHL对肝脏的保护作用机制。方法：通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50 mg·kg-1 RHL治疗组，每组10只。采用硫代巴比妥酸法检测肝脏组织中丙二醛（MDA）水平，联苯三酚自氧化法和 NADPH 偶联法分别检测超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；HE染色观察肝脏组织病理学变化；Nile red染色观察肝脏组织脂肪水平；Western blotting法检测脂肪合成相关蛋白表达水平。结果：与对照组比较，糖尿病模型组大鼠体质量减低，血糖、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平升高（P＜0.05），肝脏组织中 SOD和 GSH-Px活性降低（P＜0.05），肝脏组织出现大量脂肪空泡和脂肪蓄积。糖尿病模型大鼠脂肪合成信号通路 ERK1／2-SREBP-1c被激活；与模型组比较，25和50 mg·kg-1 RHL治疗组大鼠脂肪合成信号通路被抑制。与模型组比较，RHL治疗组大鼠体质量无显著变化，但血糖、TG和 TC水平显著降低（P＜0.05），SOD和 GSH-Px活性显著升高（P＜0.05）。与糖尿病模型组比较，RHL治疗组大鼠肝脏组织中的脂肪空泡和脂肪蓄积明显减少。结论：RHL能抑制氧化应激、肝脏脂肪变性和脂肪蓄积从而发挥对糖尿病大鼠肝脏的保护作用。
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赖氨大黄酸抑制HER2信号通路对肺癌H460细胞的凋亡诱导作用
目的:研究赖氨大黄酸(RHL)对肺癌H460细胞增殖、凋亡的影响及人类表皮生长因子受体2(HER2)信号通路在其中的作用,为RHL抗肺癌的临床实验研究提供依据.方法:选取HER2高表达并处于对数生长期的H460细胞,随机分为空白对照组和25、50、75、100、125、150 μmol·L-1RHL组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性.H460细胞随机分为空白对照组及50、100、150 μmol·L-1 RHL组,流式细胞术检测各组细胞48 h凋亡情况,Western blotting法检测各组细胞48 h后凋亡相关蛋白和HER2信号通路蛋白的表达.结果:细胞培养48 h后,不同浓度RHL组H460细胞存活率显著低于空白对照组(P＜0.05),细胞凋亡率显著高于空白对照组(P＜0.05),RHL的增殖抑制作用和凋亡诱导作用呈剂量依赖性.不同浓度RHL组H460细胞Caspase-3、Caspase-7和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的切割片段蛋白表达明显高于空白对照组(P＜0.05),HER2、AKT蛋白磷酸化水平和NF-κB蛋白的表达水平明显低于空白对照组(P＜0.05).结论:RHL可能通过抑制HER2/AKT/NF-κB信号通路诱导H460细胞凋亡.
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赖氨大黄酸对KK/HlJ糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制
目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对链脲佐菌素(STZ)诱导的KK/HlJ糖尿病(DM)小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制.方法:腹腔注射STZ(50 mg·kg-1)并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型.将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RHL治疗组(25 mg·kg-1)和高剂量RHL治疗组(50 mg·kg-1),每组12只,共治疗16周.采用葡萄糖氧化酶法检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,HE染色观察小鼠胰腺组织形态表现,免疫组织化学法检测小鼠胰岛组织中胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清胰岛素、C反应蛋白(CRP)和肝脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平,Western blotting法检测小鼠肝脏组织中糖原合成相关基因(PI3K、AKT和GSK-3β)的磷酸化表达水平.结果:与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠FBG、TG和TC水平降低(P<0.05),胰岛素水平无明显变化(P>0.05).与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠血清CRP水平和肝脏组织中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.01).HE染色,与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠胰岛形态有一定恢复,偶见炎症浸润;免疫组织化学染色,与模型组比较,低剂量RHL治疗组小鼠棕色颗粒状物质明显减少,而高剂量RHL治疗组小鼠胰岛中未见棕色颗粒状物质.与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠糖原合成相关基因PI3K、AKT和GST-3β磷酸化表达水平升高(P<0.01).结论:RHL对STZ所致KK/HlJ DM小鼠胰岛素抵抗有改善作用,其机制可能与RHL促进糖原合成有关.
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赖氨大黄酸对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用及其机制
目的：观察赖氨大黄酸（RHL）对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用，并探讨其作用机制。方法：采用腹腔注射百草枯方法建立活性氧引起血管损伤小鼠模型。将30只 C57小鼠随机分为对照组（n＝10）、百草枯模型组（n＝10）和 RHL 干预组（n＝10）。RHL 干预组小鼠在造模前1周灌胃给予 RHL，对照组和百草枯模型组灌胃给予等体积蒸馏水。百草枯模型组和 RHL 干预组腹腔注射百草枯，对照组腹腔注射等体积生理盐水，每周注射1次，持续2周。造模2周后检测血清丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；DCFH-DA 染色观察血管活性氧水平； HE 染色观察腹主动脉病理表现；Western blotting 法检测血管损伤相关基因的表达。结果：与对照组比较，百草枯模型组小鼠血管组织小鼠血清 SOD 和 GSH-Px 活性下降（P ＜0.05），MDA 水平升高（P ＜0.05）；与百草枯模型组比较，RHL 干预组MDA 水平下降（P ＜0.05），SOD 和 GSH-Px 活性升高（P ＜0.05）；DCFH-DA 和 HE 染色，百草枯模型组小鼠血管组织血管组织活性氧水平升高（P ＜0.05），血管结构破坏，RHL 干预组血管活性氧水平下降（P ＜0.05），病理变化明显减轻。Western blotting 法检测，与对照组比较，百草枯模型组小鼠血管组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和 caspase-3表达水平降低（P ＜0.05），caspase-3裂解片段表达水平升高（P ＜0.05）；与模型组比较， RHL 干预组小鼠血管组织 eNOS 和 caspase-3表达水平升高（P ＜0.05）， caspase-3裂解片段表达水平降低（P ＜0.05）。结论：百草枯能够诱导体内活性氧水平升高引起血管细胞损伤，RHL 通过清除活性氧，上调 eNOS表达，下调 caspase-3裂解片段表达来拮抗百草枯的作用。
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赖氨大黄酸对糖尿病大鼠肝脏及胰腺的保护作用
目的 对赖氨大黄酸(RHL)在糖尿病大鼠肝脏和胰腺保护作用进行探讨.方法 将大鼠随机分为对照组、模型组和25 mg/kg RHL组、50 mg/kg RHL组,分别对其肝脏组织的丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶以及血糖、甘油三酯、总胆固醇进行观察比较,对胰腺活性氧水平、抗氧化酶活性水平进行观察比较.结果 与对照组相比,模型组肝脏组织的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶明显降低,血糖、甘油三酯和总胆固醇以及胰腺活性氧水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜ 0.05);与模型组相比,两个治疗组的血糖、甘油三酯、总胆固醇和胰腺活性氧水平明显降低,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 RHL能够有效抑制肝脏和胰腺的氧化应激,提高氧化酶活性,从而起到保护糖尿病大鼠肝脏和胰腺作用.
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赖氨大黄酸促进大鼠心肌Smad7表达的研究
目的 初步探讨赖氨大黄酸(RHL)对肾性压力负荷性心肌纤维化模型大鼠Smad7表达的影响.方法 将32只大鼠随机分为对照组、模型组、赖氨酸组及R H L组,每组8只,用"两肾一夹"法建立肾性压力负荷性心肌纤维化模型,通过测量鼠尾动脉收缩压及左心室质量指数评价造模效果,通过Masson染色观察大鼠心肌纤维化病变程度,采用免疫组织化学法及实时荧光定量聚合酶链反应在蛋白及mRNA水平检测Smad7表达情况.结果 与模型组相比,经RHL治疗后肾性压力负荷性心肌纤维化大鼠心肌组织中Smad7蛋白及mRNA表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RHL可有效抑制肾性压力负荷性大鼠心肌纤维化进程,其机制与上调Smad7表达,靶向拮抗TGF-β/Smads信号传导通路有关.
关键词： 赖氨大黄酸 心肌纤维化 TGF-β/Smads Smad7 -
赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化大鼠 Smad2、Smad3表达的影响
目的：探讨赖氨大黄酸（RHL）对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠 Smad2、Smad3表达的影响。方法采用胆总管结扎（BDL）的手术方法建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型，将大鼠随机分为5组：对照组、模型组、赖氨酸组、低剂量 RHL 组[35 mg／（kg · d）]、高剂量 RHL 组[70 mg／（kg · d）]。应用实时荧光定量 PCR 的方法检测大鼠肝脏组织中 Smad2、Smad3 mRNA 的相对表达量。 Western blot 的方法检测 Smad2、Smad3蛋白时相对表达量的变化。结果与模型组大鼠比较，经 RHL 治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中 Smad2、Smad3 mRNA 相对表达量降低，差异有统计学意义（P＜0．05）；与模型组大鼠相比，经RHL 治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中 Smad2、Smad3蛋白的相对表达量降低，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论 RHL能够抑制肝纤维化的发展，可能是通过抑制 Smad2、Smad3 mRNA 和蛋白的表达，阻断 TGF-β1／Smads 信号传导通路实现的。
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赖氨大黄酸通过调控miRNA表达水平抑制HBV增殖
目的：研究赖氨大黄酸在体外对乙型肝炎病毒（HBV）增殖及病毒抗原表达的影响及分子机制，为研究赖氨大黄酸抗 HBV 作用机制奠定初步的实验依据。方法将 HepG2．2．15细胞分为实验组（分别加入5、10、20、40、80μmol／L 赖氨大黄酸）及不加赖氨大黄酸的对照组，分别培养24、48 h 收获上清液，采用四唑氮化合物（M TS）法检测细胞的增殖活性，采用 ELISA 法检测 HBsAg 和 HBeAg 的表达水平，实时定量 PCR（RT‐PCT ）检测其中 HBV DNA 的拷贝数及 miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 、miR‐370、miR‐196a 、miR‐184、miR‐217的表达水平。miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 、miR‐370、miR‐196a 、miR‐184、miR‐217反义链（ASO）分别转染 HepG2．2．15细胞后，M TS 法检测细胞的增殖活性，ELISA 法检测 HBsAg 和 HBeAg 的表达水平。结果在没有对 HepG2．2．15细胞的增殖活性产生影响的情况下，赖氨大黄酸抑制了 HBsAg 的产生和 HBV 的增殖。20μmol／L 的赖氨大黄酸明显促进了 miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 的表达，而抑制了 miR‐370的表达，与对照组相比较，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论赖氨大黄酸可能通过影响细胞内 miRNA 的表达抑制 HepG2．2．15细胞中 HBV 的增殖和HBsAg 的产生。
关键词： 赖氨大黄酸 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒表面抗原 miRNA -
赖氨大黄酸对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用
目的 探讨赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用.方法 建立小鼠2型糖尿病模型并根据体质量分层,采用随机数字表分为3组:模型组、25 mg/kg RHL和50 mg/kg RHL治疗组,另外设对照组为同龄正常小鼠.检测体质量、血糖、血脂、胰岛素水平;检测胰腺活性氧水平和抗氧化酶活性.体外培养小鼠胰岛β细胞系,检测细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,糖尿病模型组小鼠血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著升高(P＜0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著降低(P＜0.05).与模型组相比,25、50 mg/kg RHL治疗组血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著降低(P＜0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著升高(P＜0.05).体外研究发现RHL能抑制过氧化氢诱导的胰岛β细胞凋亡.结论 RHL对2型糖尿病小鼠胰腺的保护作用与抑制氧化应激、减少胰岛β细胞凋亡有关.
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赖氨大黄酸通过升高miRNA-451抑制肺癌A549细胞迁移
目的 研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用.方法 选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160 μmol/L)的RHL组.采用MTT法检测各组细胞48 h增殖情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞48 h迁移情况;Real-time PCR检测各组细胞48 h miRNA-451和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的转录水平;Western blot检测各组细胞48 h MMP-9蛋白水平变化.结果 细胞培养48 h后,RHL处理组A549细胞增殖活性呈现明显剂量依赖性抑制.细胞划痕实验和Transwell实验均发现80 μmol/L RHL能够抑制A549细胞迁移.同时80μmol/L以上剂量的RHL能够显著升高miR-451水平,降低MMP-9的转录水平(P＜0.05).Western blot检测结果也证实了80μmol/L以上剂量的RHL能够显著抑制MMP-9蛋白表达水平(P＜0.05).结论 RHL通过诱导miR-451的表达、抑制MMP-9的表达,从而抑制A549细胞迁移.
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赖氨大黄酸对快速老化小鼠SAMP 10肾组织COL1A1、COL3A1和COL4A1表达的影响
目的 研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone 10,SAMP 10)肾组织Ⅰ型胶原α1链(COL1 A1)、Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)和Ⅳ型胶原α1链(COL4A1)蛋白表达的影响.方法 选取7月龄SAMP 10小鼠18只,并根据随机数字表分为空白对照组、低剂量RHL组(25 mg/kg)和高剂量RHL组(50 mg/kg),每组6只；另选抗快速老化小鼠(senescence accelerated mouse resistance 1,SAMR 1)6只作为青年对照,给药时间6个月.采用HE染色观察肾脏组织病理改变,Masson染色观察肾脏组织纤维化改变,Westem blot方法检测肾组织COL1A1、COL3A1、COL4A1和NF-κB蛋白的表达.结果 与SAMP 10空白对照组相比,25和50 mg/kg RHL组治疗后SAMP 10小鼠精神状态、活动度、毛色等方面较好；肾脏指数升高.HE染色显示SAMP 10空白对照组小鼠肾组织有节段性肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化,SAMR 1组和RHL组小鼠则无肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化.RHL能够抑制SAMP 10小鼠衰老过程中出现的肾组织COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达(P＜0.05).结论 RHL可通过抑制COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达,减轻衰老过程中SAMP 10小鼠肾组织纤维化程度,发挥肾脏保护作用.
关键词： 赖氨大黄酸 SAMP 10快速老化小鼠 肾间质纤维化 抗衰老
