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青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征患者活化T细胞的影响
目的 探讨青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征(MDS)患者活化T细胞的影响.方法 24例MDS患者用青黄散联合健脾补肾中药治疗9个月前后,流式细胞仪检测外周血T细胞CD3+CD28+、CD3+ CD28+ CD4+ CD8-、CD3+ CD28+ CD8+ CD4-、CD3+ CD25+、CD3+ CD25+ CD4+CD8-、CD3+ CD25+ CD8+ CD4-、CD3+ DR+、CD3+ DR+ CD4+ CD8-、CD3+DR+CD8+CD4-的百分数与绝对值,分析有效组及无效组上述指标治疗前后的差异变化.结果 有效组(1 3例)治疗后CD3+CD28+、CD3+ CD28+ CD4+ CD8-、CD3+ CD28+ CD8+ CD4-绝对值较治疗前明显下降(P＜0.05),无效组(11例)此3项指标百分数也明显下降(P＜0.05).有效组治疗后CD3+ CD25+、CD3+ CD25+ CD4+CD8-百分数与绝对值较治疗前明显下降(P＜0.05),无效组此2项指标治疗前后比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 青黄散联合健脾补肾中药可通过降低MDS患者体内共刺激分子的表达引起T细胞第二信号缺失使T细胞处于失能状态,减少T细胞(特别是Th)细胞的活化,使MDS亢进的免疫状态得以抑制,避免正常造血细胞受到免疫攻击而致凋亡.
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骨髓增生异常综合征外周血活化T细胞的研究
目前认为免疫功能在骨髓增生异常综合征(MDS)发病、发展及向白血病的转变中,可能起重要作用[1].本实验通过流式细胞术和双标记技术来检测20例MDS患者外周血活化T细胞的变化,以探讨MDS的发病机制,以期为预防及治疗提供理论依据.
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活化T细胞抗原p140在肾移植患者T淋巴细胞的表达
用免疫荧光染色和流式细胞术观察p140的表达,并用移植肾穿刺活检证实排斥反应.结果表明,p140在肾移植患者淋巴细胞亚群及活化T细胞有弱表达,存在排斥反应时表达增强.提示p140为一种新的移植抗原诱导的T细胞活化分子;p140在肾移植患者排斥反应时表达增强,有可能成为特异的判别指标.
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重组人粒细胞集落刺激因子对健康供者免疫细胞的影响及其应用安全性
目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在动员造血干细胞时对健康供者外周血T细胞表面活化信号(CD4+CD28+,CD8+CD28+)、活化T细胞(CD4+CD25low)和调节性T细胞(CD4+CD25high)的影响及其应用的安全性.方法:30例造血干细胞健康供者[男19,女11,中位年龄28(14～56)岁]皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg·d),连续4～6d.用药前及停药后第1天、第3天及第7天用流式细胞术检测供者外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞表面CD28表达的相对荧光强度(RFI),以及CD4+CD25low和CD4+CD25highT细胞分别在CD4+T细胞中的百分比;并在用药前及停药后第1天、第7天及第30天进行外周血白细胞、血小板、肝功能、肾功能以及脾超声检查.结果:CD4+CD28T细胞和CD8+CD28T细胞相对荧光强度表达在用药前分别为14.91±6.10和11.10±3.74,停药后第3天分别降至11.93±5.39和8.53±3.74;差异有统计学意义(P=0.034,P=0.033).CD4+CD25lowT细胞在CD4+T细胞中百分比,用药前为(21.4±8.87)%,停药后第3天降至(18.23±5.89)%;差异无统计学意义(P＞0.05).CD4+CD25highT细胞在CD4+T细胞中百分比,用药前为(4.16±1.62)%,停药后第1天升至(6.43±2.46)%,差异有统计学意义(P=0.000).白细胞计数和脾超声检查用药前分别为(5.91±1.02)×109/L和(33.76±2.76)cm2,停药后第1天分别升至(34.13±8.07)×109/L和(46.85±4.53)cm2;血小板计数用药前为(228.07±73.69)×109/L,停药后第7天降至(158.27±40.69)×109/L,差异均有统计学意义(P均=0.000).ALT和Cr用药前分别为(28.23±7.69)IU/L和(60.70±15.86)μmol/L,停药后第1天分别为(27.17±7.23)IU/L和(61.10±16.38)μmol/L,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论:rh-GSF能减弱CD28的表达,降低CD4+CD25low和增加CD4+CD25high在CD4+T细胞中百分比,停药后第7天恢复至动员前水平,对健康供者肝肾功能无不利影响.
关键词： 重组人粒细胞集落刺激因子 健康供者 活化T细胞 调节性T细胞 安全性 -
供者特异性活化T细胞频度预测肾移植急性排斥反应
背景:提高移植后排斥反应风险预报的准确性,可为移植后个体化使用免疫抑制剂提供参考.目的:寻找一种能定量分析供受者间免疫反应强度的方法来预测急性排斥反应.方法:对同种异体尸肾移植的患者115例采用前瞻性分析,用ELISPOT法检测移植前分泌γ-干扰素的供者特异性活化T细胞的频度,观察随访期内有无急性排斥及肺部感染,并观察HLA错配与急性排斥的关系.结果与结论:115例群体反应性抗体阴性肾移植受者中有25例发生急性排斥反应,发生急性排斥反应患者的供者特异性活化T细胞频度高于未发生急性排斥反应者(P < 0.01),而HLA-I、II及总的错配数比较,差异均无显著性意义(P > 0.05).提示,通过移植前对产生γ-干扰素的供者特异性活化T细胞频度的检测,可预测急性排斥反应,对潜在供者进行选择.
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强直性脊柱炎TH亚群激活及T细胞活化状态研究
目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者TH1/TH2细胞激活状态及T细胞活化状况,探讨其发病机理.方法:运用流式细胞仪(CBA)法检测35例AS患者TH1(INF-γ、TNF-α、IL-2)、TH2(IL-10、IL-5、IL-4)细胞因子水平以及外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+T细胞、B细胞(CD19+)、NK细胞(CD16+56+)和CD3+HLA-DR+、CD4+HLA-DR+、CD8+HLA-DR+T细胞百分率,并与健康对照组比较.结果:AS患者血浆TNF-a水平、IL-2水平均显著低于健康对照组(P＜0.01,P＜0.05),IL-10水平显著高于健康对照组(P＜0.05).CD3+、CD3+CD8+T细胞百分率显著低于健康对照.CD8+HLA-DR+T细胞百分率均显著低于健康对照(P＜0.05),CD4+HLA-DR+T显著高于健康对照(P＜0.05).结论:AS患者血浆低水平的TNF-a、IL-2和高水平的IL10提示其体内存在着TH1/TH2平衡的偏移;TH1激活程度低下,而TH2激活程度增强,细胞因子水平的改变尤以TH1细胞因子TNF-a改变特别明显.AS患者在多个层面存在细胞免疫功能紊乱.
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丙种球蛋白对神经系统副肿瘤综合征患者外周血淋巴细胞亚群、调节性及活化T细胞分布的影响
目的 探讨丙种球蛋白对神经系统副肿瘤综合征(PNS)的治疗作用及其对外周血淋巴细胞亚群,调节性T细胞和活化T细胞分布的影响.方法 选择2013年1月—2017年10月本院收治的PNS患者11例作为研究对象,观察治疗后疗效以及治疗前后外周血淋巴细胞亚群,调节性T细胞和活化T细胞的分布情况.结果 总有效率为81.8％.相比较对照组,PNS组治疗前,CD3+、CD4+T细胞亚群比例明显降低;CD3+CD4+CD25+调节性T细胞明显降低;总CD3+HLA-DR+以及CD3+CD4+HLA-DR+活化T细胞明显升高(均P<0.05).治疗后,PNS组CD4+T细胞亚群比例明显升高;CD3+CD4+CD25+调节性T细胞明显升高;总CD3+HLA-DR+以及CD3+CD4+HLA-DR+活化T细胞明显降低(均P<0.05).结论 PNS患者外周血CD4+T细胞和调节性T细胞减少,同时活化T细胞增多可减少体内免疫系统负向调节,促进免疫细胞活化,参与PNS的发生.丙种球蛋白治疗治疗可以显著纠正这种免疫紊乱,是一种有效的治疗方法.
关键词： 丙种球蛋白 副肿瘤性神经系统综合征 淋巴细胞亚群 调节性T细胞 活化T细胞 -
霉酚酸酯联合环孢素A治疗GVHD后T细胞亚群的变化
为了解霉酚酸酯(MMF)联合环孢素A(CsA)治疗移植物抗宿主病(GVHD)后T淋巴细胞亚群的变化.我们采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术,分析了6例GVHD患者的T淋巴细胞亚群以及活化T细胞标志.发现在MMF治疗后患者的CD3+CD4+T细胞明显降低,CD3+CD8+T细胞明显增高,CD4/CD8比值下降;CD25+CD4+和CD69+CD8+T细胞均升高.结果初步显示,MMF可能主要作用于CD3+CD4+T细胞,并与CsA在治疗GVHD方面有协同作用.
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副肿瘤性神经系统综合征患者外周血T细胞亚群、活化及调节性T细胞的变化及其意义
目的 研究副肿瘤性神经系统综合征(PNS)患者外周血T细胞亚群、活化及调节性T细胞的变化及其意义.方法 采用流式细胞术检测10例PNS患者外周血T细胞亚群、活化及调节性T细胞,并与正常人及小细胞肺癌(SCLC)患者比较.结果 PNS组与正常组比较: CD3+、CD4+T细胞、调节性T细胞及CD4+/CD8+显著降低(P<0.05～0.01);总活化性T细胞及活化性CD4+T细胞升高(均P<0.01).PNS组与SCLC组比较:总活化性T细胞及活化性CD4+T细胞显著升高(均P<0.01);调节性T细胞显著减低(P<0.01).结论 PNS患者外周血CD3+、CD4+T细胞及CD4+/CD8+降低,活化T细胞增多及调节性T细胞减少.提示其细胞免疫功能总体处于低下状态;并有T细胞过度激活及调节性T细胞所介导的免疫抑制功能的降低.
关键词： 副肿瘤性神经系统综合征 T细胞亚群 活化T细胞 -
恶性肿瘤患者外周血活化T细胞及相关sIL-2R检测的诊断价值
目的:探讨外周血活化T淋巴细胞含量和血清sIL-2R水平对于恶性肿瘤诊断的临床价值.方法:应用流式细胞免疫学方法、酶联免疫试剂盒ELISA法对45例恶性肿瘤患者外周血活化T细胞、血清sIL-2R水平分别进行定量测定.结果:恶性肿瘤患者外周血活化T细胞含量和血清sIL-2R水平均明显高于正常对照组;活化T细胞含量与血清sIL-2R水平呈明显相关性(r=0.7612,P＜0.05).结论:活化T细胞含量和血清sIL-2R水平与肿瘤的恶性增生、进展有一定关系,可作为恶性肿瘤免疫诊断的重要指标.
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冠心病患者活化T细胞、辅助性T细胞亚群水平及CXCR3的表达
目的 探讨冠心病患者外周血中活化T细胞、辅助性T细胞亚群(Th1、Th2)及CXC趋化因子受体3(CXCR3)与冠脉斑块稳定性的关系.方法 79例冠心病患者分为三组:稳定型心绞痛组(A组,24例)、不稳定心绞痛组(B组,20例)、急性心肌梗死组(C组,35例).另选健康体检者15例为对照组(D组).采用流式细胞术检测四组外周血中活化T细胞百分比,实时荧光定量PCR检测Th1、Th2及CXCR3的表达.结果 B组、C组外周血活化T细胞百分比、Th1细胞mRNA和CXCR3 mRNA表达水平明显高于A组、D组(P＜0.05).A组、B组、C组Th2细胞mRNA表达水平低于D组(P＜0.05).结论 活化T细胞水平、Th1/Th2比例失衡及CXCR3高表达提示冠脉斑块不稳定.
关键词： 活化T细胞 CXC趋化因子受体3 冠心病 -
GL50分子在活化T细胞表面的表达及对细胞增殖的影响
目的 探讨GL50分子在活化T细胞表面的表达及其生物学意义.方法 分别取不同时相(24～144 h)激发型CD3单抗联合CD28单抗活化的T细胞,采用流式细胞术分析T细胞表面GL50分子表达阳性率,RT-PCR法检测T细胞内GL50分子mRNA转录水平；3H-TdR掺入法分析阻断GL50信号对T细胞增殖的影响.结果 激发型CD3单抗联合CD28单抗活化T细胞后24 h GL50分子阳性表达率为17.2％,其后逐渐升高至活化120 h时达大阳性率95.7％,并维持至活化144h时基本不变；T细胞活化24～144 h均可检测到GL50分子mRNA表达；阻断性GL50分子单抗对活化T细胞增殖具有显著抑制作用.结论 GL50分子在活化T细胞表面呈诱导性表达,且可与T细胞表面自身受体结合在免疫应答放大效应中发挥重要作用.
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落新妇甙对肺移植术后急性排斥反应的作用
目的 探讨落新妇甙对大鼠肺移植后机体急性排斥反应的影响和机制,以明确落新妇甙对大鼠肺移植急性排斥反应的作用.方法 建立大鼠原位肺移植模型,术后将60只受体大鼠随机分为两组,对照组:术后用生理盐水1ml/d灌胃,实验组:术后用落新妇甙1ml/kg*d灌胃.观察肺移植后大鼠的存活时间、大鼠脾细胞T淋巴细胞转化率、脾淋巴细胞白细胞介素2(IL-2)的活性以及外周血中活化T淋巴细胞凋亡情况.在电子显微镜下观察肺血管超微结构变化.结果 实验组大鼠肺移植后存活时间较对照组明显延长(25.4±2.1d vs. 13.4±1.2d;t=2.042, P＜0.05).实验组脾细胞T淋巴细胞转化率较对照组明显降低(23 465.8±8 783.4 cpm vs. 74 567.3±12 874.6 cpm;t=2.284,P＜0.05);实验组移植大鼠脾淋巴细胞IL-2活性较对照组明显降低(4.25±2.65U/ml vs. 23.46±1.82U/ml;t=3.165, P＜0.01).实验组能有效地诱导急性排斥反应中活化T淋巴细胞凋亡.实验组肺组织超微结构损伤较对照组减轻.结论 落新妇甙通过下调IL-2产生,诱导活化T淋巴细胞凋亡,抑制T淋巴细胞增殖分化,广泛抑制了以T淋巴细胞为主的肺移植术后急性排斥反应,从而延长肺移植大鼠的存活时间.
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荧光染料CFSE在实验性葡萄膜炎T细胞增殖研究中的应用
目的 探讨荧光染料CFSE在实验性葡萄膜炎(EAU)抗原特异T细胞增殖研究中的应用价值. 方法 以人类光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)的多肽片段IRBP161-180为抗原,免疫B10RⅢ小鼠使其产生EAU.用CFSE荧光染料标记细胞,结合荧光单抗和流式细胞术,检测T细胞及其亚群在特异抗原刺激下,不同时间点细胞增殖的情况.结果 IRBP161-180刺激4 d后出现T淋巴细胞增殖分裂,表现为CFSE荧光强度的系列减半.使用荧光单抗双标记发现CD4~+ T和CD8~+ T细胞增殖反应不同步,CD8~+ T细胞较CD4~+T细胞增殖分裂更活跃,亲代细胞百分率下降更明显(P<0.01).结论 CFSE荧光标记技术是分析EAU抗原特异性T细胞及亚群增殖分裂的有力工具.
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一种新的人活化T细胞抗原p140的分布及其功能的研究
目的观察一种新的活化T细胞膜分子p140的分布、相对分子质量(Mr)和功能.方法用免疫荧光染色和流式细胞术观察p140分子的分布;采用重导向杀伤实验观察其对杀伤功能的调节;应用生物素标记细胞膜分子、免疫沉淀及化学发光测定p140的Mr.结果 p140分子可选择性地表达于混合淋巴细胞培养(MLC)所产生的活化T细胞表面,而在抗CD3 mAb、PHA、PMA或PMA+A23187几种刺激剂活化的人外周血单个核细胞(PBMC)上未见表达.p140还分布于一些人急性T细胞性白血病细胞系.在重导向杀伤实验中,p140与CD3分子有协同作用.p140 Mr为140 000.结论 p140可能为一种新的移植抗原诱导的T细胞活化分子,同CD3分子具有协同刺激作用.
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复发性病毒性角膜炎外周血T细胞的变化
目的:研究复发性病毒性角膜炎患者外周血T淋巴细胞亚群、T细胞激活状态及Th1/Th2模式,进一步探讨其免疫发病机制.方法:运用流式细胞仪检测30例复发性病毒性角膜炎患者血浆TH1(IFN-r,TNF-a,IL-2),TH2(IL-10,IL-5,IL-4)细胞因子水平以及外周血淋巴细胞CD3+,CD4+,CD8+T细胞和CD3+HLA-DR+,CD4+HLA-DR+,CD8+HLA-DR+T细胞百分率,并与健康对照组比较.结果:复发性病毒性角膜炎患者血浆IFN-r,IL-2水平有明显上升(P如.05);IL-4水平下降(P＜0.05).CD4+细胞下降(P＜0.05);CD4+HLA-DR+T及CD8+HLA-DR+T细胞上升(P＜O.05).结论:复发性病毒性角膜炎患者T细胞过度活化和Th1/Th2平衡的偏离;Th1激活增强,Th2激活减弱与病毒性角膜炎的复发、迁延有关.
