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艾灸调节急性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞相关标志蛋白质表达的研究
目的:探讨艾灸促进胃黏膜损伤修复的相关物质基础.方法:将45只SD大鼠随机分为正常组、模型组、胃经穴组和对照点组,其中模型组15只,另3组每组10只.除正常组外,其余各组采用束缚-冷应激法制作胃黏膜损伤大鼠模型,胃经穴组和对照点组予以悬灸胃经穴“梁门”“足三里”和对照点(“梁门”、“足三里”两穴外侧旁开1 cm处),每日1次,连续治疗12 d.12 d后光镜下观察胃黏膜形态学变化,蛋白质指纹图谱技术和弱阳离子、弱阴离子芯片检测大鼠胃黏膜细胞蛋白质指纹图谱,对比分析各组的差异蛋白质质/荷比峰.结果:与模型组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜损伤指数值降低(P＜0.05),胃黏膜形态学明显改善,与对照点组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜损伤指数变化和形态学改善明显(P＜0.05);弱阳离子芯片检测结果显示有4个标志蛋白质表达差异,艾灸胃经穴可调节分子量为1354Da、5692Da和8432Da 3个标志蛋白质表达升高(均P＜0.05),3287Da标志蛋白质表达下降(P＜0.05);弱阴离子芯片检测结果有3个标志蛋白质表达差异,艾灸胃经穴可调节分子量为2412Da、3026Da和6475Da 3个标志蛋白质表达升高(均P＜0.05).结论:艾灸胃经穴可调节急性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞相关标志蛋白质差异表达,促进胃黏膜损伤的修复,效果优于穴位旁开1 cm处.
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艾灸对大鼠胃黏膜损伤修复相关细胞信号蛋白质的影响
目的 研究艾灸对胃黏膜损伤修复相关细胞信号蛋白质的影响,探讨艾灸促进胃黏膜损伤修复的分子机制.方法 40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、胃经穴组和对照点组各10只,采用束缚冷应激法建立应激性胃溃疡大鼠模型,胃经穴组大鼠造模后鼠板束缚,艾灸胃经“梁门”、“足三里”穴位;对照点组鼠板束缚,艾灸对照点;空白组和模型组仅鼠板束缚,各组均每次20 min,每日1次,持续12天.应用蛋白质指纹图谱技术和疏水芯片、亲水芯片、金属离子螯合芯片检测各组大鼠胃黏膜细胞蛋白质指纹图谱,对比分析各组的差异蛋白质质荷比峰.结果 各组蛋白质指纹图谱比较,3个芯片共检测出10个标志蛋白质差异表达,其中疏水芯片有3个标志蛋白质表达差异,分子量分别是2736Da、6985Da、7324Da;亲水芯片有1个标志蛋白质表达差异,分子量是4561Da;金属离子螯合芯片有6个标志蛋白质表达差异,分子量分别是1034Da、2136Da、3261Da、4871Da、7586Da、8267Da. 结论 艾灸可调节胃黏膜损伤模型大鼠多种相关信号蛋白质的差异表达,这可能是其促进胃黏膜损伤修复的分子机制之一.
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表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在白血病诊断中的应用
本研究对白血病患者及健康对照者的血清样本进行检测分析,筛选新的生物标记物并建立白血病的蛋白质指纹图谱诊断模型.应用SELDI-TOF-MS技术检测40例白血病标本及37例健康对照标本,用Biomarker Wizard软件分析筛选新的生物标记物,使用Biomarker Patterns 5.0软件进行标记物的比较判别,建立白血病决策树诊断模型.结果表明,蛋白质指纹图谱分析发现有22个差异显著的蛋白峰(P＜0.05);由m/z为4650,8609及11660建立的决策树诊断模型对白血病的诊断灵敏度为97.5％ (39/40),特异性为91.9％ (34/37).结论:由3个蛋白标记物构成的白血病蛋白质指纹图谱诊断模型为白血病的诊断提供了新的借鉴和参考.
关键词： 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱 白血病 蛋白质指纹图谱 -
质谱技术在诊断急淋中枢神经系统白血病中的应用研究
目的：研究质谱技术在诊断急淋中枢神经系统白血病中的应用价值。方法选取我院2015年1月～12月收治的急性淋巴白细胞（ALL）患者20例作为研究对象，及健康体检者10名为研究对象，应用SELDI-TOF-MS质谱技术检测其脑脊液建立蛋白质指纹模型图，并分析差异蛋白。结果与对照组比较，单纯ALL组发现有8个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意义（P＜0.05）；与单纯ALL组比较，ALL合并CNSL组发现有11个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意义（P＜0.05）。对差异蛋白建立决策树模型，用此模型诊断ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特异性为91.30%（21/23）。结论应用SELDI-TOF-MS质谱技术建立急淋中枢神经系统白血病患者脑脊液蛋白质指纹模型图，发现差异蛋白，有助于疾病诊断。
关键词： 急淋中枢神经系统白血病 质谱技术 蛋白质指纹图谱 诊断 -
不同临床病理因素对肝细胞癌患者血清蛋白质指纹图谱的影响
目的 分析不同临床病理因素对肝细胞癌患者血清蛋白质指纹图谱的影响.方法收集112例肝细胞癌患者血清,采用弱阳离子交换蛋白质芯片为检测介质,经表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱测定得到蛋白质指纹图谱,分别以性别、甲胎蛋白、门静脉癌栓、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化等病理特征分组,通过BioMarker Wizard Software比较各组间血清蛋白质组分的差异.结果 在质荷比为1100～30 000范围内,112例肝细胞癌的血清蛋白指纹图谱中,共检测出100个有意义的蛋白峰.(1)比较肿瘤数目:单发与多发组(≥2),16个蛋白峰差异有统计学意义(P＜0.01).(2)比较肿瘤大直径:＞3 cm与≤3 cm组,仅1个蛋白峰差异有统计学意义;＞5 cm与≤5 cm组,4个蛋白峰差异有统计学意义;＞10 cm与≤10 cm组,3个蛋白峰差异有统计学意义(P＜0.01).(3)比较门静脉肉眼癌栓组与无门静脉癌栓组:16个蛋白峰差异有统计学意义;比较门静脉镜下癌栓组与无门静脉癌栓组:仅2个蛋白峰差异有统计学意义;比较门静脉肉眼癌栓组与门静脉镜下癌栓组:8个蛋白峰差异有统计学意义(P＜0.01).(4)按性别、肝硬化和甲胎蛋白分组比较,血清蛋白指纹图谱没有明显差异.结论 门静脉癌栓、肿瘤数目、肿瘤大小是影响肝细胞癌患者血清蛋白质指纹图谱的重要因素,而性别、肝硬化、甲胎蛋白对血清蛋白质指纹图谱没有明显影响;门静脉肉眼癌栓对血清蛋白质指纹图谱影响明显大于镜下癌栓;肿瘤大小以5 cm分界对血清蛋白质指纹图谱影响大.
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应用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术检测结直肠癌肝转移
目的 寻找与结直肠癌肝转移相关的蛋白质,建立结直肠癌肝转移的血清蛋白质指纹图谱诊断预测模型.方法 应用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术,对36例结直肠癌无肝转移患者和36例结直肠癌伴肝转移患者的术前空腹外周静脉血标本,进行蛋白质指纹图谱测定,运用Biomarker Wizard软件,建立结直肠癌肝转移的诊断预测模型.用44例结直肠癌患者和44例结直肠癌伴肝转移患者,对所建立的诊断预测模型进行盲法验证.结果 比较36例结直肠癌无肝转移患者和36例结直肠癌伴肝转移患者的血清蛋白质,得到10个差异蛋白峰(P<0.05),质荷比分别为2398、2814、4084、4289、4465、6422、6619、11 482、11 649和13 714.若以P<0.01为标准,则有3个蛋白质峰差异有统计学意义,质荷比分别为2398、2814和13714.建立终末节点数为9的诊断预测模型,其敏感性为91.7%,特异性为97.2%.验证结果显示,敏感性为75.0%,特异性为81.8%.结论 运用SELDI-TOF-MS技术所建立的血清蛋白指纹图谱模型,在预测结直肠癌肝转移中具有非常高的敏感性与特异性,可望成为预测诊断工具.
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血清蛋白质指纹图谱诊断乳腺癌的临床意义
激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术已成功用于前列腺癌、卵巢癌、膀胱癌、大肠癌等恶性肿瘤的诊断、肿瘤标记物的筛选及其他蛋白质组学的研究[1,2].我们应用SELDI技术检测了乳腺癌患者与正常人血清标本的蛋白质组图谱变化,采用生物信息学技术对这些数据进行分析,建立了基于支持向量机的乳腺癌血清蛋白质的诊断图谱,为早期诊断乳腺癌提供了一种新的方法.
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基于支持向量机对肾母细胞瘤患者血清蛋白质标记物的检测分析
目的 检测肾母细胞瘤患儿血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于肾母细胞瘤早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测75例血清标本(肾母细胞瘤30例,其他小儿腹腔实体肿瘤25例,正常小儿20例)的蛋白质质谱,并结合生物信息学方法(支持向量机)分析数据.结果 筛选出4个质荷比(m/z)位于6984.5、6455.5、6914.0、3256.7的蛋白质标记物,构建肾母细胞瘤早期诊断模型.经留一法交叉验证,区分肾母细胞瘤和正常小儿的血清蛋白质指纹图谱模型特异性为100%,敏感性为100%;区分肾母细胞瘤与其他腹腔实体肿瘤的血清蛋白质指纹图谱模型特异性为100%,敏感性为93.3%.结论 表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术结合支持向量机建立肾母细胞瘤血清蛋白质指纹图谱模型是早期诊断肾母细胞瘤的一种特异性强、敏感性高的新方法,可用于肾母细胞瘤早期诊断与肿瘤标志物筛选研究.
关键词： 肾母细胞瘤 诊断 支持向量机 蛋白质指纹图谱 SELDI-TOF-MS -
蛋白质指纹图谱在胃癌新辅助化疗疗效评价中的应用
[目的]探讨蛋白质指纹图谱与胃癌新辅助化疗疗效的关系.[方法]采用SELDI-TOF蛋白质芯片技术,检测胃癌化疗前血清蛋白指纹图谱,通过比较分析发现差异蛋白质,进一步筛选与新辅助化疗疗效相关的血清蛋白质指纹图谱差异.[结果]17 162、22 331、29 901M/Z蛋白质在无效组中均高表达(P＜0.01),有效组和健康组比较无统计学意义.[结论]17 162、22 331、29901M/Z3种蛋白质有可能成为筛选胃癌新辅助化疗疗效的蛋白分子.血清蛋白质指纹图谱对筛选胃癌新辅助化疗疗效预测分子有潜在应用前景.
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蛋白质指纹图谱技术探索硒诱导金属硫蛋白对小鼠肺纤维化的防护作用
[目的]利用蛋白质指纹图谱技术探索硒诱导金属硫蛋白(metallothionein,MT)对小鼠肺纤维化的防护作用.[方法]利用表面增强的激光解析离子化.飞行时间.质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定硒对MT的诱导,寻找小鼠肺纤维化的异常蛋白表达标志并评估硒代MT的防护作用.[结果]IMAC-Cu芯片表达的蛋白质中发现分子量为6 277 Da的一组脱金属MT2蛋白表达增强证实硒对MT的高诱导作用;在WCX2和H4芯片中,发现肺纤维化小鼠中肺组织和血清中存在分子量分别为3 880 Da和3 364 Da的两蛋白的表达与正常组比较明显受到抑制,硒诱导MT增高后上述异常表达均有改善,说明有机硒可能对肺纤维化诱导产生的蛋白异常具有一定的防护作用.[结论]利用蛋白质指纹图谱技术分析组织和血清的蛋白特异性表达可以作为肺纤维化疗效监测和评价的一类标志物,为今后进行更多的药物或方法筛提供了一种可以尝试的实验模式.
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应用血清蛋白质指纹图谱筛选类风湿关节炎的血清标志物
目的 用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片技术检测类风湿关节炎(RA)患者血清蛋白质指纹图谱,探讨基于人工神经网络的蛋白质指纹图谱模型对RA血清诊断标志物的筛选.方法 用H4蛋白芯片结合SELDI-TOF-MS测定了141例血清标本的蛋白质指纹图谱,其中RA 90例,系统性红斑狼疮(SLE)20例,健康志愿者31名.将筛选出的血清蛋白质指纹图谱作为输入,建立人工神经网络预测模型,用随机抽取的93例标本(RA 60例,SLE 13例,健康志愿者20名)作为训练组,进行训练与交叉验证,并用另外测试组48例(RA 30例,SLE 7例,健康志愿者11名)的血清标本盲法验证该模型,同时与抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体检测结果进行比较.结果 利用从训练组得出的基于人工神经网络的血清蛋白质指纹图谱模型,对测试组的48例未知血清进行预测,结果显示,对RA检测的敏感性为90%(27/30),特异性为90.9%(9/11),阳性率为90.2%(37/41),明显高于抗CCP抗体检测结果.结论 血清蛋白质指纹图谱可有效筛选RA血清中特异性蛋白标志物,基于人工神经网络的血清蛋白质质谱模型较以往传统方法具有更高的敏感性和特异性.
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应用蛋白质指纹技术筛选强直性脊柱炎血清特异性标志物的临床研究
目的 应用表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption ionization/time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片筛选强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者血清特异性标志物,用于疾病诊断、评估及预测病情进展.方法 采用SELDI-TOF-MS技术和弱阳离子交换(weak cation exchange)芯片检测2008年4月至2009年1月山西医科大学第二医院风湿免疫科收治的69例AS患者及12名健康对照者、10例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清蛋白质表达,进一步将AS患者分为活动期与非活动期,中轴关节受累及中轴、外周关节均受累,HLA-B27阳性与阴性组,比较不同分组之间患者血清蛋白质指纹图谱,采用SELDI质谱仪自带的Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件筛选,初步建立疾病诊断预测模型.结果 由8085、2640和2932建立的诊断预测模型Ⅰ诊断AS的敏感度为94.23％,特异度为100％.由3677、3880、2539、3159和3242建立的诊断预测模型Ⅱ判断病情活动的敏感度为98.11％,特异度为100％.由4700、8687和18538建立的诊断预测模型Ⅲ预测AS同时有中轴及外周关节受累的敏感度为80.00％,特异度为82.35％.由10259、7972、2048、2154和2954建立的诊断模型Ⅳ区分AS和RA的敏感度为100％(69/69),特异度为100％(10/10).结论 通过SELDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白质指纹图谱可以筛选AS患者血清中的特异性蛋白质标志物,有望成为诊断疾病及评估病情的一种初筛平台.
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蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用
目的 分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型.方法 应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛 21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌.结果 筛选到23个差异蛋白峰(P<0.001).盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%.结论 应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台.
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类风湿关节炎患者血清蛋白质指纹图谱分析
目的 用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测类风湿关节炎(RA)患者血清蛋白质指纹图谱.初步探讨筛选差异性蛋白建立的诊断模型对RA的诊断和治疗的意义.方法 用SELDI-TOF-MS技术及CM10蛋白质芯片检测12例RA患者甲氨碟呤(MTX)治疗前后和12例非RA患者的血清蛋白质指纹图谱,经分析处理数据和筛选标志物,建立诊断模型.用此模型同时盲法检测RA和非RA患者各40例.结果 有5个蛋白质峰(4 198、4 159、4 221、4 654和4 238m/z)组合构建的诊断模型鉴别RA和非RA疾病的敏感性为91.7%(11/12),特异性为83.3%(10/12).扩大样本盲法验证结果,其敏感性为87.5%(35/40),特异性为92.5%(37/40).3个蛋白质峰(4 071、5 579和9 246 m/z)组合的模型能反映RA患者MTX治疗前后血清蛋白质的差异,其敏感性和特异性均为91.7%(11/12).结论 建立的血清蛋白质指纹图谱诊断模型对RA的筛查、早期诊断及疗效监测有一定价值,应进一步深入研究.
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应用SELDI-TOF-MS技术诊断2型糖尿病肾病
目的 比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱.结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01).筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型.利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%.结论 利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径.
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用SELDI-TOF-MS技术筛查肺腺癌血清蛋白质标志物
目的 筛查并分析肺腺癌和健康人对照者血清差异蛋白质,寻找诊断肺腺癌的血清肿瘤标志物.方法 采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,使用强阴离子芯片(SAX-2)分析31对肺腺癌和健康人的血清蛋白质表达谱,结合决策树软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～20 000范围内,与健康对照者相比,在肺腺癌血清中共筛选到102个差异峰,选择差异显著质荷比(m/z)分别为14022.9和3 735.99的2个蛋白峰建立决策树模型.刺用该模型对肺腺癌进行盲测,结果诊断敏感性和特异性均为100%.结论 SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法,能筛选出敏感性和特异性较好的血清差异蛋白,为肺腺癌早期诊断提供了新的实验方法.
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非酒精性脂肪性肝病的血清蛋白质指纹图谱的临床研究
[目的]分析非酒精性脂肪性肝病患者血清蛋白质指纹图谱,探讨非酒精性脂肪性肝病患者蛋白表达的差异性.[方法]应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)及弱阳离子交换蛋白质芯片(weak cationic exchanger protein chip)技术检测29例非酒精性脂肪性肝病患者和16例正常健康人血清,获得血清蛋白质指纹图谱.[结果]在非酒精性脂肪性肝病患者与正常对照组之间检测到14种差异蛋白(P<0.05).[结论]非酒精性脂肪性肝病与正常健康人之间存在一些差异表达蛋白质.
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脑脊液蛋白质指纹图谱技术在结核性脑膜炎诊断中的作用
[目的]研究脑脊液蛋白质指纹图谱技术在结核性脑膜炎（tubercular meningitis，TBM）诊断中的作用。[方法]应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry ，SELDI-TOF-MS）检测80例脑脊液标本，其中TBM30例、化脓性脑膜炎30例及同期排除中枢感染的上呼吸道感染病例20例，用Biomarker Wizard 软件分析找出差异蛋白峰，蛋白峰差异的比较使用Biomarker Patterns 5.0软件进行统计判别，建立决策树诊断模型，并通过盲法验证评价其准确性和有效性。[结果]蛋白质组谱图分析发现有9个差异显著的蛋白峰（P<0.01），4个在TBM组中高表达，m/z分别为15920.00，32540.50，7967.66，8046.85；有4个在TBM组中低表达，其m/z为8762.66，9411.40，6840.92，6649.47。由m/z为8046.85，15920.00及32540.50建立的决策树模型对TBM的诊断准确率为90%。通过盲法验证模型对TBM的诊断准确率为85%。[结论]由3个差异蛋白峰构成的TBM蛋白质指纹图谱诊断模型为TBM的诊断提供了新的借鉴和参考。
关键词： TBM 脑脊液 SELDI-TOF-MS 蛋白质指纹图谱 差异蛋白蜂 -
李属五种中药的蛋白质电泳指纹图谱鉴别
中药质量控制是中药现代化生产和质量管理的重要组成部分,中药指纹图谱是中药标准化、规范化、国际化的需要.近年来,蛋白质指纹图谱技术发展较快,国外学者已用于小麦、大麦、水稻等作物的鉴定,1991年国际种子检验协会将蛋白质电泳方法正式定为标准的品种鉴定方法,表明了蛋白质电泳方法在种子鉴定和纯度检测中的地位.我们将蛋白质指纹图谱技术与中药电泳鉴别法相结合,探讨了中药蛋白质电泳指纹图谱在中药质量控制中的应用.本文采用该技术对蔷薇科李属的五种种子类中药进行了鉴别.
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SELDI-TOF-MS技术在HD患儿血清蛋白质标记物检测中的应用
目的 从先天性巨结肠(HD)患儿血清蛋白质中筛选特异的蛋白质标记物,构建诊断HD的血清蛋白质指纹图谱模型.方法 采用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF -MS)技术检测132例份血清标本(来自HD术前患儿64例份,术后40例份,术后复发5例份,对照组23例份)的蛋白质质谱,用支持向量机分析数据.结果 筛选出质荷比(m/z)为3 221.7、5 639.2、6 884.2的三个蛋白质标记物,其在HD术前组低表达(分别为2.96±1.17、15.57±8.87、4.09±1.78),在对照组高表达(分别为4.95±0.99、30.31±6.18、8.31±3.07),两组相比,P均＜0.01;在HD术后组高表达(分别为3.76±2.15、27.98±7.22、9.06±2.14),与术前组相比,P均＜0.01,与对照组相比,P均＞0.05;5例术后复发者三种蛋白质标记物表达强度(分别为3.18± 0.95、13.86±10.69、3.95±1.83),与术前组相比,P均＞0.05.结论 采用SELDI-TOF-MS结合支持向量机构建的血清蛋白质指纹图谱模型可用于HD的诊断及判断其是否完全根治.
