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百蕊草化学成分分离
目的:研究百蕊草的化学成分.方法:对百蕊草95％乙醇提取物采用各种柱色谱方法分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定化合物结构.结果:从百蕊草中分离纯化了10个化合物,分别鉴定为木犀草素-7-0-葡萄糖苷(1),芹菜素-7-O-葡萄糖苷(2),芦丁(3),芹菜素-8-C-α-L-阿拉伯糖苷(4),高车前苷(5),大蓟苷(6),蒙花苷(7),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(8),柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(9),金圣草黄素(10).结论:化合物10为首次从百蕊草属植物中分离得到,化合物4～9为首次从檀香科植物中分离得到.
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RP-HPLC测定百蕊草中紫云英苷的含量
目的:建立百蕊草中紫云英苷的含量测定方法.方法:采用RP-HPLC测定,C18柱,流动相为乙腈-水(23:77),用冰醋酸调pH至3.85,流速1.0 mL·min-1,检测波长346nm;供试品溶液的制备采用50%乙醇提取2次.结果:测定了同一产地不同批次的百蕊草药材,紫云英苷质量分数在0.120%～0.155%.结论:建立的测定方法简便、可靠.
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百蕊草的吸器诱导及发育信号物质的分离鉴定
利用GC-MS检测鉴定百蕊草优势寄主植物夏枯草根系分泌物,并对2,6-二甲氧基-对苯醌(DMBQ)对百蕊草吸器诱导作用进行了初步研究.通过分析鉴定得到了9类53种化合物,其中大多数为烃类化合物、酯类化合物和有机酸类化合物,而酚酸类、醛类和醌类化合物种类则较少,分别只检测出1种.其中2,5-二叔丁基-1,4-苯醌具有1,4-对苯醌核心结构,可能对夏枯草与百蕊草寄生关系的建立具有重要意义.DMBQ能够诱导百蕊草根系产生吸器,并且1μmol·L-1DMBQ对百蕊草吸器的诱导能力强.
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百蕊草药材内在品质研究
目的:研究百蕊草药材内在品质.方法:以总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖等多种活性成分为评价指标,系统研究不同居群、不同生长期、不同储存时间百蕊草药材内在品质.结果:百蕊草药材总黄酮质量分数3.38%,山柰酚0.984 7 mg·g-1,甘露醇6.12%,多糖14.08%,水溶性浸出物30.28%.不同居群百蕊草主要化学成分相似,但含量存在差异或显著差异；除多糖外,不同生长期百蕊草各化学成分含量呈下降趋势；随储存时间的延长,百蕊草药材总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖及浸出物等成分含量呈下降趋势.结论:在制定百蕊草质量标准时,应以总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖和浸出物等含量为主要成分指标.
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百蕊草半寄生机制研究
目的:研究百蕊草半寄生机制.方法:采用石蜡切片法和电镜研究百蕊草根、茎、叶、吸器的显微结构和叶片超微结构.用紫外-可见分光光度法测定色素含量；用LI-6400便携式光合仪测定光合等生理参数日变化.结果:百蕊草叶肉细胞含有较多叶绿体,叶绿素含量丰富,叶绿体中具有完整的基粒类囊体系统,片层系统发达；百蕊草维管组织发达,根、茎木质部导管孔径较大,输导能力强；百蕊草侧根有许多圆球形吸器,吸器内维管组织发达,吸器探针穿透寄主根的表皮和皮层,直达髓部,在髓部吸器导管与寄主导管融合.百蕊草叶片光合能力强大,大净光合速率可达7.06μmol·m-2·s-1,水分利用率为0.735mmol·mol-1,蒸腾作用白天变化剧烈,夜晚相对平稳,白天为7.20mmol·m-2·s-1显著高于夜间,夜间为0.85mmol·m-2·s-1.结论:百蕊草通过吸器从寄主体内夺取水分和养分；百蕊草可通过光合作用实现全部或大部分碳的自给.
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百蕊草生物学特性研究
目的:研究百蕊草形态特征和生长发育特性.方法:通过野外定点观察、盆栽实验和室内实验相结合的方法,进行百蕊草形态特征和生长发育特性的研究.结果与结论:百蕊草为多年生半寄生草本,必需依赖于寄主才能完成其生活史.主侧根发达,但根毛退化,根上有吸器夹附在寄主植物根上而生长.茎纤细淡绿色,宿根苗基部簇生,基部以上疏分枝,斜生；实生苗单茎直立生长.宿根苗花期3-4月,实生苗花期4-5月,宿根苗果期3-5月,实生苗果期5-6月.百蕊草野生分布于靠近水体或水源充分的荒草坡、田埂杂草丛中.喜温暖湿润气候,喜光照,忌干旱.种子有休眠期特性,物候期可分为出苗期、分枝期、花期、结果期、枯萎期.
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百蕊草种子休眠的破除与生理变化研究
目的:探讨破除百蕊草种子休眠的方法,研究休眠破除前后百蕊草种子生理变化.方法:采用GA3处理与低温层积相结合的方法破除百蕊草种子休眠,测定种子中总糖、可溶性糖和粗脂肪含量,用HPLC测定内源GA3与ABA含量.结果:用流水冲洗24h,再用500 mg·L-1的GA3溶液浸种24h,然后低温层积处理150 d,百蕊草种子裂壳率达22％,种子层积后粗脂肪含量减少了50％以上,总糖和可溶糖增加了3～4倍,ABA减少了90％以上,GA3则增加了5倍以上.结论:用流水冲洗24h,再用500 mg·L-1的GA3溶液浸种24h,然后低温层积处理150～ 180 d可有效破除百蕊草种子休眠.
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百蕊草物候期及越冬休眠生理研究
为探索百蕊草人工栽培模式,以茅山地区百蕊草为实验材料,对百蕊草物候期及其越冬休眠过程碳水化合物变化规律进行研究.采用定点标记法观察百蕊草物候期,硫酸蒽酮法测定可溶性糖和淀粉含量,DNS法测定淀粉酶活力,PAS-铁钒苏木精双重染色组织定位淀粉粒.在连续3年的观察中未发现可存活2年以上百蕊草植株,可推断百蕊草在长江流域属于二年生植物;第1年为实生苗,生长周期较长.出苗较早的实生苗在夏季倒苗死亡,而出苗较晚的可顺利越夏并在秋冬季分化出根颈芽,冬季休眠.第2年为宿根苗,由根颈芽发育成簇生状,生长周期较短;根具储藏根的结构与功能特征,休眠期储藏淀粉等碳水化合物,储藏物为翌年快速生长发育的能量基础.根内淀粉和可溶性糖在不同时期相互转化,使百蕊草在休眠过程中既有充足的碳水化合物来维持生长也有丰富的小分子溶质来提高其抗逆能力,提高其生长能力及顺利越冬.
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寄主对半寄生植物百蕊草影响的综合评价研究
目的:研究不同寄主对百蕊草生长发育和药材活性成分含量的影响,筛选百蕊草优良寄主.方法:测定寄生于不同寄主的百蕊草的形态指标和药材活性成分含量,运用指数和法对寄主进行综合评价.结果:寄主可以显著促进百蕊草株高、单株重、茎粗、叶面积、种子数和吸器数量的增加及根重/茎重比的降低.不同寄主对百蕊草生长的促进和药材各活性成分含量的影响存在显著差异.综合得分鼠曲草高(37分),其次是白茅和夏枯草(36分),它们均可作为百蕊草药材生产的优良寄主;小麦(25分)和假俭草(17分)得分较低,不适合作为百蕊草药材生产的寄主.结论:寄主可以显著促进百蕊草生长发育,寄生于不同寄主的百蕊草,其生长发育和药材各活性成分含量存在差异.鼠曲草、白茅和夏枯草均可作为百蕊草药材生产的优良寄主;小麦和假俭草不适合作为百蕊草药材生产的寄主.
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百蕊草矿质元素含量测定和主成分分析
目的:测定百蕊草矿质元素含量,分析百蕊草特征元素及评价药材质量.方法:运用ICP法分析百蕊草药材矿质元素含量,用主成分分析法对百蕊草特征元素和药材质量进行分析和评价.结果:百蕊草含有17种以上矿质元素.其中铁(Fe),锌(Zn),铜(Cu),锰(Mn),铬(Cr),钴(Co),镍(Ni),锶(Sr),硼(B)等9种为人体必需微量元素,钙(Ca),磷(P),钾(K),钠(Na),镁(Mg)等5种为人体必需宏量元素.B,Mg,Mn,Zn,Cu等5种具明显抗癌活性的元素在百蕊草中含量丰富.Mn和Zn均在100μg·g-1左右,Mg高达1 898.000～3 137.725μg·g-1.对人体有益元素Fe也较高(＞500μg·g-1).主成分分析发现,选择4个因子(F1,F2,F3,F4)即可对百蕊草药材进行综合评价.其综合评价函数为F=0.444 77F1+0.237 71 F2+0.167 28F,+0.150 24F4.不同居群百蕊草药材的综合评价得分在0.189～0.627,Zn,Cu,Mg,P,K,铝(Al),Fe,Cr,Na,Co,铅(Pb),Mn,B,Ca等14种元素为百蕊草药材特征元素.结论:百蕊草含有17种以上矿质元素.其中Zn,Cu,Mg,P,K,Al,Fe,Cr,Na,Co,Pb,Mn,B,Ca等14元素为百蕊草药材特征元素.来安七里和来安施官2个居群百蕊草药材质量较好.
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百蕊草的化学成分研究
目的研究百蕊草Thesium chinense的化学成分.方法采用反复柱色谱和制备性HPLC百蕊草的醋酸乙酯萃取物中分离得到5种化合物,通过理化和光谱分析鉴定其化学结构,并研究其抗氧化活性.结果自百蕊草的醋酸乙酯萃取物中分离得到5种黄酮苷类化合物,分别鉴定为:山柰素-3-O-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-glucoside,Ⅰ),柚皮素-4-O-葡萄糖苷(naringenin-4-O-glucoside,Ⅱ),芹菜素-7-O-葡萄糖苷(apigenin-7-O-glucoside,Ⅲ),木犀草素-7-O-葡萄糖苷(1uteolin-7-O-glucoside,Ⅳ),芸香苷(rutinoside,Ⅴ).抗氧化实验结果表明,化合物Ⅰ的抗氧化作用强,3个浓度中以1×10-mol/L作用明显.结论化合物Ⅰ具有较强的抗氧化作用.
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百蕊草地上茎分枝数量对其药材品质的影响
目的 研究2龄级百蕊草Thesium chinense地上茎不同分枝数量对其药材品质的影响.方法 以江苏句容、谷里、茅山等地野生2龄级百蕊草为材料,按照其根茎分枝数量划分为5个级别.其中1～3分枝为1级,4～6分枝为2级,7～9分枝为3级,10～20分枝为4级,20分枝以上为5级.采用HPLC法测定其有效成分量,同时结合其生长指标、产量等因素综合分析.结果 不同分枝数量百蕊草之间的药材品质存在显著差异,其中5级分枝百蕊草单株干质量高,可达5.710 6g,而1级分枝低,为0.224 5 g,单株产量相差高达25.4倍;百蕊草植株内总黄酮量总体随分枝数量的增加而减少,其中1级分枝质量分数高,为4.02％,显著高于其他级别.山柰酚量也随着分枝数的增大而减少,其中1级分枝量高为3.38mg/g,显著高于4级分枝和5级分枝;在不同分枝级别中,百蕊草总黄酮和山柰酚之间为显著正相关关系.山柰酚与百蕊草根直径之间为显著负相关.结论 百蕊草分枝数量对其药材品质影响较大,从外在品质考虑,百蕊草分枝数量越多其产量越高,且种子数量也越多,但其有效成分的量却越低.
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百蕊草生物碱成分的分离与鉴定
目的 研究百蕊草中的生物碱成分.方法 应用多种色谱手段进行分离纯化,通过IR、MS、HR-MS、NMR、2D-NMR技术鉴定化合物结构.结果 从百蕊草总生物碱部位分离得到3个化合物,分别鉴定为N-甲基金雀花碱(1)、白金雀儿碱(2)和槐果碱(3).结论 化合物N-甲基金雀花碱、白金雀儿碱、槐果碱均为首次从该植物中分离得到.
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百蕊草药材中山奈酚和总黄酮的含量测定
目的:应用高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法(UV),分别测定百蕊草药材中山奈酚和总黄酮的含量.方法:以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相,Elite C18柱,在波长为365 nm处进行HPLC、UV测定.结果:山奈酚在HPLC进样0.0594～1.896μg和在UV 0.00164～0.0164 mg·ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为94.6%、91.8%.结论:该方法较简便、准确、可靠,可以用于百蕊草的质量控制.
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星点设计-效应面法优化百蕊草总黄酮提取工艺
目的 利用响应面分析法对百蕊草总黄酮的提取工艺进行优化.方法 在单因素试验基础上,确定乙醇体积分数、液料比、提取时间为3个自变量,总黄酮得率为因变量,通过星点设计-响应面法优化总黄酮提取工艺条件,并进行预测分析.结果 液料比和提取时间对百蕊草总黄酮的提取影响极显著,优提取工艺为乙醇体积分数70％,提取时间40 min,液料比20∶1 (mL/g).在此条件下,黄酮提取量达到13.58 mg/g.结论 该方法合理、简便、快速,可预测性较优.
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百蕊草药材及其制剂中总黄酮的含量测定研究
百蕊草,别名百乳草、小草、地石榴、细须草、一棵松等,为檀香科(Santalaceae)植物百蕊草(Thesium chinense Turcz.)或其变种长梗百蕊草(Thesium chinense Turcz.Var longipedunculatum)的干燥全草[1],资源丰富,全国各地均有分布.百蕊草有清热解毒,补肾涩精之功效.多用于治疗急性乳腺炎,急性扁桃体炎,上呼吸道感染,肺炎,咽炎,肺脓肿,淋巴结结核,乳蛾,乳痈,疔肿,淋证,黄疸以及肾虚腰痛,遗精等疾病,且无毒副作用[1,2].市场上现有的百蕊草制剂主要为百蕊草胶囊和百蕊草片,文献报道其主要化学成分为黄酮类化合物[3],因此现有的百蕊草质量标准以测定百蕊草总黄酮的含量来控制药材以及制剂的内在质量.中华人民共和国1977年版药典曾把百蕊草收录到其中,但现在无确定的含量测定标准.本研究以芦丁作为对照品,采用紫外分光光度法测定了不同产地百蕊草药材以及制剂中总黄酮的含量,方法操作简单,结果准确,稳定性,精密度,重复性和回收率良好.为百蕊草药材和制剂质量控制提供了很好的方法.
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百蕊草药材的指纹图谱研究
目的 采用高效液相色谱法建立来自14个不同产地的15批百蕊草样品的指纹图谱.方法 甲醇加热回流提取1h获得百蕊草提取液,采用HPLC分析百蕊草的指纹图谱.色谱柱Inertsil OSD-SP(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相甲醇-0.4％磷酸水溶液梯度洗脱；分析时间75 min；检测波长365 nm；柱温30℃；体积流量0.8 mL/min.结果 建立了百蕊草的指纹图谱,5号山柰素峰为对照峰,确定了8个共有峰.结论 该指纹图谱方法简单,重现性好,可作为百蕊草药材质量控制的重要方法.
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百瑞口服液澄清工艺研究
目的 采用Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂,建立百瑞口服液的澄清工艺.方法 考察澄清剂的加入顺序、加入量、澄清时间对口服液澄明度的影响；采用HPLC法测定口服液中紫云英苷含量,采用紫外分光光度法测定口服液中总黄酮含量.结果 确定了口服液的澄清工艺:以先B组分后A组分的次序加入20％的澄清剂,各组分的澄清时间均为12h.结论 ZTC1+1天然澄清剂不影响紫云英苷及总黄酮等有效成分的含量,可作为制备百瑞口服液的除杂澄清工艺.
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百蕊草对阿霉素肾病大鼠治疗作用的实验研究
目的 观察百蕊草对大鼠肾病综合征的治疗作用.方法 SD大鼠40只,10只为空白对照组,余下分为模型组,低剂量组(1.0 g/(kg·d)),高剂量组(5.0 g/(kg·d)),每组10只,尾静脉注射阿霉素6.0 mg/kg建立肾病模型.连续灌胃给药5周,观察百蕊草对肾病大鼠尿量、24 h尿蛋白、血液生化指标、肾组织病理学等方面的影响.结果 百蕊草能够减轻ADR大鼠肾病综合症烂尾、水肿等症状.与模型组相比,百蕊草治疗第2周以后,尿量显著增加(P＜0.01),治疗3周后,24 h尿蛋白浓度下降(P＜0.05),低剂量组尿蛋白浓度显著下降(P＜0.01).治疗5周后,低剂量组的血清总蛋白(TP)、血清蛋白(ALB)水平显著高于模型组(P＜0.01),总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)水平则显著降低(P＜0.01).结论 百瑞草具有利尿、消除水肿、降低尿蛋白、降血脂、提高血清蛋白等作用,改善病理组织学变化,减轻肾脏损害,对肾病综合征大鼠具有良好的治疗效果.
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百蕊草亲水性化学成分研究
目的 对百蕊草中亲水性化学成分进行研究.方法 采用硅胶柱色谱、SephadexL H-20凝胶柱色谱等分离手段,对百蕊草水提取物经AB-8大孔树脂吸附,50% 乙醇洗脱的亲水性组分(T T50)进行分离纯化,应用核磁共振波谱分析、结合文献报道鉴定化合物结构.结果 从T T50中分离纯化得到6个化合物,分别鉴定为:山奈酚(1),紫云英苷(2),山奈酚-3, 7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),山奈酚-3-O-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),山奈酚-3-O-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[6-O-乙酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),芸香苷(6).结论 T T50中主要成分为以山奈酚为母核的黄酮苷类化合物,化合物4、5为首次从百蕊草中分离得到.
