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杭州市蛙、蛇体内曼氏裂头蚴感染情况调查
目的 了解杭州市蛙、蛇类体内曼氏裂头蚴自然感染情况.方法 在该市7个农村县(区)捕捉野生蛙、蛇,城区的5个县(区)从辖区农贸市场购买人工养殖牛蛙,进行逐只(条)解剖检查和鉴定曼氏裂头蚴.结果 671只野牛青蛙裂头蚴感染率为31.15%,感染强度为1～60条;3条野牛蛇感染率达100%,感染强度为2～99条;而人工养殖的牛蛙裂头蚴均为阴性.裂头蚴可在蛙体内任何部位的肌肉寄生,其中以腿部肌肉寄生为常见,占78.99%(391/495),而在蛇类则以寄生于皮下为主,占61.21%(71/116),不同大小青蛙曼氏裂头蚴感染率差异有统计学意义(x2=6.561,P＜0.05).结论 杭州市野生蛙、蛇体内裂头蚴感染率较高,分布广泛,存在曼氏裂头蚴病自然疫源地.因此,改变人们不良的生活方式和饮食习俗,开展曼氏裂头蚴病的预防工作十分必要.
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中国林蛙(Rana chensinensis)蛙皮抗菌肽的制备及抗菌作用研究
目的 从中国林蛙的皮肤中,提取纯化具有抗菌活性的多肽物质,并对其进行抑菌活性的研究. 方法 用甲醇进行粗提取.对提取的甲醇浓度、甲醇用量、浸提时间和浸提次数,采用L9(34)正交实验,以蛋白含量作为指标,确定佳提取条件.得到的粗提物经Sephadex G-75、Sephadex G-50和Sephadex G-25凝胶过滤进一步分离纯化获得抗菌肽.对抗菌肽进行氨基酸组成分析,采用杯磲法进行抑菌活性研究. 结果 提取林蛙抗菌肽的佳工艺条件:甲醇浓度80%、甲醇体积为蛙皮重量的6倍、提取时间24 h,提取次数3次.提取的粗提物经凝胶过滤后得到抗菌肽.抗菌肽的氨基酸组成中,碱性氨基酸占22.1%,酸性氨基酸占13.9%.抗菌肽对细菌的低抑菌浓度分别为:枯草杆菌73.25μg/ml,金黄色葡萄球菌51.75 μg,/ml,大肠杆菌51.75μg/ml,铜绿假单胞菌51.75μg/ml. 结论 经甲醇提取和凝胶过滤可从中国林蛙皮肤得到抗菌肽,该抗菌肽为碱性多肽,对革兰阳性细菌、革兰阴性细菌均有抑制作用.
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12个省市自治区水产品霍乱弧菌污染情况调查
目的 了解霍乱弧菌在不同水产品及其流通环节中的污染情况,为制定霍乱预防控制措施提供依据.方法 2005年7-9月在全国12个省、自治区、直辖市对不同种类水产品样本进行调查和霍乱弧菌的检测.结果 共调查检测海、水产品样本12 104份,霍乱弧菌总阳性检出率为0.52%.各类样本以甲鱼阳性率(1.72%)高,其次为养殖水(1.14%)、蛙类(0.50%),贝类低(0.08%).检测61株霍乱弧菌菌株47.54%为产毒株,且79.31%分离自甲鱼和养殖水.甲鱼在多环节的阳性率均较高,以养殖环节阳性率高(2.38%).结论 我国12省(自治区、直辖市)水产品及其流通环节霍乱弧菌污染总体处于较低水平,甲鱼卫生管理问题应受到高度重视.
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海、水产品中污染霍乱弧菌的鉴定和分子特征分析
目的 了解调查年份不同种类海、水产品中分离的霍乱弧菌的血清学分型、噬菌体-生物分型及毒力因子携带情况,分析海水产品污染状况与疫情的关系,为疫情预测和制定防治对策提供参考.方法 应用血清学分型及噬菌体-生物分型方法分析所分离菌株的生物表型,应用PCR方法检测毒力基因的携带情况.结果 检测的64株菌株中O139型菌株占48.44%(31/64),O1群小川型占31.25%(20/64),O1群稻叶型占20.31%(13/64);O1群噬菌体-生物分型显示均为非流行株;对61株菌毒力基因检测结果显示:O139霍乱弧菌毒力基因的检出率(83.33%)远高于O1群小川型霍乱弧菌(15.38%)和O1群稻叶型霍乱弧菌(11.11%).结论 O139型霍乱弧菌主要存在于甲鱼、甲鱼养殖水及甲壳类海水产品中,而且多为产毒株,这些海、水产品是预防和控制霍乱疫情的重要环节.
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河南省部分地区蛙类曼氏裂头蚴感染情况调查
目的 了解河南省部分地区蛙类曼氏裂头蚴感染情况. 方法 2008～2011年在河南省不同地区的农村池塘及农贸市场采集蛙类,剖检曼氏裂头蚴,记录其寄生部位和感染数量,并进行统计学分析. 结果 共采集并检查黑斑蛙、泽蛙、林蛙、蟾蜍及蝌蚪等4 848只,其中感染曼氏裂头蚴者728只,总感染率15.02％,发现曼氏裂头蚴4 034条,平均感染强度为5.54条/只.不同种类的蛙中以泽蛙的感染率高(20.82％)；多数虫体(76.37％)的寄生部位为后腿肌肉；有病例地区的蛙类感染率(18.36％)高于无病例地区(12.38％) (P＜0.05)；市售蛙类的感染率为11.71％(295/2520). 结论 河南省蛙类感染曼氏裂头蚴的情况较为普遍,进食不熟的蛙肉或吞服活蝌蚪具有感染裂头蚴的高度危险性.
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斑点杂交技术用于蛙钩端螺旋体病的流行病学调查研究
目的 用Dot blotting杂交技术检测蛙类钩端螺旋体(钩体),为动物钩体的流行病学监测和调查提供一种比较理想的方法.方法 根据钩体赖株DNA合成1对flaB引物,用PCR技术对钩体菌株、疫区现场蛙肾材料等进行flaB基因扩增,用地高辛(DIG)标记flaB基因探针,用斑点杂交技术进行检测.结果 结果表明用DIG标记的flaB探针可以检测到5 fg及以下的DNA扩增产物.疫区70份蛙肾标本,斑点杂交检测阳性19份,阳性率为27.14%.而钩体细菌分离阳性者只有8份,阳性率11.43%,PCR扩增阳性者14份,阳性率20.00%.结论 Dot blotting杂交是一种灵敏、特异、快速的钩体检测方法,可用于两栖类钩体的流行病学监测和调查.
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林蛙皮甲醇提取物对小鼠无水乙醇型胃溃疡的保护作用
[目的]观察林蛙皮甲醇提取物对无水乙醇型小鼠胃溃疡的影响,并探讨其机制.[方法]取昆明种小鼠随机分为模型对照组(生理盐水)、阳性对照组(0.22 g/kg西咪替丁)和林蛙皮甲醇提取物小、中、大剂量组(0.22,0.45,0.90 g/kg).连续给药7d,末次给药Ih后灌胃给予0.01 mL/g无水乙醇制作胃溃疡模型,30 min后取胃,测定溃疡指数.应用一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲醋(L-NAME)观察林蛙皮甲醇提取物的作用机制.[结果]与模型对照组比较,林蛙皮甲醇提取物小、中、大剂量组小鼠溃疡指数均降低,其中高剂量组的溃疡指数显著降低(P<0.01),给予L-NAME后林蛙皮甲醇提取物对小鼠胃溃疡的保护作用受到抑制(P<0.01).[结论]林蛙皮甲醇提取物对小鼠无水乙醇型胃溃疡有保护作用,其机制可能与诱导一氧化氮生成有关.
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宁海县蛙体内曼氏裂头蚴感染情况调查
目的 了解宁海县蛙体内曼氏裂头蚴自然感染情况,评估感染风险.方法 采用分层整群抽样方法,抽取该县9个乡镇,再随机抽取其中各一个村作为调查点共9个调查点,捕捉野生蛙,进行逐只解剖检查和曼氏裂头蚴形态鉴定.结果 348只野生蛙曼氏裂头蚴感染率为11.49％(40/348),平均感染度为2.15条/只;除深酬、前童两个调查点未发现受感染青蛙外,其余7个调查点均有发现;曼氏裂头蚴可在蛙体内任何部位的肌肉寄生,其中以大腿肌肉寄生为常见,占98.84％(85/86);不同大小青蛙曼氏裂头蚴感染率差异无统计学意义(x2=2.081,P＞ 0.05).结论 宁海县野生蛙体内曼氏裂头蚴感染较为普遍,地域分布较为广泛,需采取综合措施开展曼氏裂头蚴病的相关预防工作.
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运用Medlab生物信号采集处理系统对蛙神经肌肉机能测定的实验分析
目的用经典法、后毁髓离体法及部分离体法制备蛙神经肌肉标本,观察其机能变化,并对其进行分析比较.方法对蛙坐骨神经刺激引起腓肠肌收缩,由张力换能器采集信号,并用Medlab生物信号采集处理系统对其进行数据分析处理.结果后毁髓离体法及部分离体法标本组腓肠肌性能与经典法标本组相比,收缩幅度增大(P＜0.001),潜伏期和舒张期缩短(P<0.01).结论后毁髓离体法及部分离体法标本明显优于经典法标本.
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海宁市野生蛙体内曼氏裂头蚴感染情况调查
目的：了解海宁市野生青蛙体内曼氏裂头蚴自然感染情况。方法在海宁市5个乡镇（街道）捕捉野生青蛙，活体解剖后肉眼检查皮下、肌肉及内脏等部位，显微镜下鉴定和计数曼氏裂头蚴。结果252只野生青蛙裂头蚴平均感染率为26.59％，平均感染度为2.19条／只。不同乡镇（街道）来源的青蛙感染率差异有统计学意义（P ＜0.05），其中高为斜桥镇（37.25％），低为盐官镇（12.24％）。不同体重组青蛙间的曼氏裂头蚴感染率及感染度未见不同。裂头蚴可在蛙体内多个部位包括腿部、腰部和腹部肌肉内寄生，其中以腿部肌肉寄生为常见，占84.36％。结论海宁市各抽检乡镇均发现野生青蛙体内有曼氏裂头蚴感染，有必要通过健康宣教提倡人们健康的生活方式，防止曼氏裂头蚴病的发生。
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复方辛夷滴鼻液的配制及其对蛙口腔粘膜纤毛功能的影响
目的观察复方辛夷滴鼻液对蛙口腔粘膜纤毛运动功能的影响.方法将48只蛙的离体上腭粘膜标本和48只蛙分别随机分成4组(复方辛夷滴鼻液A组、B组(含5mg/ml ATP)、庆大霉素组及生理盐水对照组,每组12个标本(或12只蛙),分别观察各组标本和动物经给药后粘膜纤毛维持自身摆动的持续时间(LTCM)及在体粘膜纤毛输送速度(CSC).结果 A组的上述二个指标较对照组略低,然差异无显著性(P＞0.05);B组的上述二个指标较对照组略高,且差异有显著性(P＜0.01);庆大霉素组的上述二个指标较对照组略低,且差异有显著性(P＜0.01).结论复方辛夷滴鼻液对蛙口粘膜纤毛的功能无明显损害作用.
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安徽省皖南钩端螺旋体病监测及一个新血清群的发现
目的 调查研究我省皖南山区钩端螺旋体病自然人群感染情况及宿主动物带菌情况,掌握流行规律有效控制钩体病爆发流行.方法 采用血清学、病原学、分子生物学,对钩体病进行监测.结果 自然人群钩体病特异性抗体阳性率为15.36%,,黄疸出血群为33.94%、赛罗群为33.02%,流感伤寒群为19.27%.宿主动物带菌率蛙为11.42%、黄疸出血群59.26%、流感伤寒群30.43%、赛罗群棉兰型26.09%.黑线姬鼠带菌率为7.65%、黄疸出血群59.26%、流感伤寒群22.22%、秋季热14.81%、赛罗群棉兰型3.70%.猪为0.00%.结论 该地区自然人群钩体病流行菌群发生明显改变出现菌群(型)更迭现象.并从金线蛙(Rnan plancyi) 肾组织中首次分离出致病性及新血清群钩体代表株为EG79.研究发现蛙所带菌群与自然人群流行菌群相一致,蛙在钩体病流行病学意义有待进一步探讨.
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动物细胞染色体制备实验的改进
动物细胞染色体的制备和观察是细胞生物学教学中的重要实验,主要训练学生掌握制备动物细胞染色体的技术原理,熟悉制备程序要点,能够自己动手制备动物细胞染色体,并对染色体进行形态观察、分析和计数.目前,许多实验手册中都是用小白鼠骨髓细胞来制备动物细胞染色体.笔者根据本实验室的具体情况,参考相关资料,在实验材料和实验方法等方面进行改进,报告如下.
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甘辛喷雾剂的鼻黏膜纤毛毒性评价
目的:确定适宜的药物浓度,评价甘辛喷雾剂及处方各组分对鼻黏膜纤毛功能的影响.方法:用光学显微镜观察离体蛙口腔上腭纤毛在药物溶液作用下持续摆动时间,以此作为指标考查不同药物浓度和组分对蛙口腔黏膜纤毛功能的影响.结果:4%甘辛喷雾剂对纤毛运动影响小,与对照组药物相比,4%甘辛喷雾剂和处方中各组分对蛙口腔黏膜纤毛的影响弱于滴通鼻炎水(P＜0.01).结论:甘辛喷雾剂对鼻黏膜纤毛的功能无明显损伤作用.
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三种高渗溶液对蛙坐骨神经干动作电位的幅值及速度的影响
目的:观察葡萄糖、甘露醇、山梨醇3种高渗溶液对蛙坐骨神经干复合动作电位的幅度及传导速度的影响.方法:用青蛙制备蛙坐骨神经-胫腓神经标本,随机分为3组,每组再分为2～3个小组,即:(1)葡萄糖组(下分3个浓度小组:质量分数为10%葡萄糖组、20%葡萄糖组和40%葡萄糖组);(2)甘露醇组(下分2个浓度小组:质量分数为10%甘露醇组和20%甘露醇组);(3)山梨醇组(下分3个浓度小组:质量分数为10%山梨醇组,20%山梨醇组和40%山梨醇组).另外设1个对照组(即任氏液组).用MedLab生物信号采集处理系统引导神经干复合双相动作电位,分别测定神经干双相动作电位的幅度和传导速度.结果:与对照组比较,20%、40%葡萄糖组,20%甘露醇组和20%、40%山梨醇组的动作电位幅度有显著降低,传导速度有显著减慢,呈时间依赖关系;10%葡萄糖组、10%甘露醇组和10%山梨醇组高渗溶液均可使蛙坐骨神经干动作电位幅值有不同程度上升,传导速度略微减慢.结论:20%、40%葡萄糖、20%甘露醇和20%、40%山梨醇均可降低蛙坐骨神经干复合动作电位幅值,减慢传导速度.而10%葡萄糖、10%甘露醇和10%山梨醇,则引起动作电位幅值升高.
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复方双辛喷雾剂的纤毛毒性作用及黏膜刺激性实验研究
目的 考察复方双辛喷雾剂对蛙口腔黏膜纤毛的影响及对大鼠鼻腔黏膜的刺激性.方法 在光学微镜下观察离体蛙口腔上腭纤毛在药物溶液作用下的持续摆动时间,以此为指标考察复方双辛喷雾剂的纤毛毒性大小;对大鼠连续给予复方双辛喷雾剂1周,取鼻黏膜作组织切片检查,观察黏膜有无病理变化.结果 复方双辛喷雾剂对纤毛运动影响较小,与药物对照组相比,P＜0.05;组织切片显示黏膜也无显著病理改变.结论 复方双辛喷雾剂对蛙口腔纤毛的功能无明显损伤作用,常规剂量对大鼠鼻黏膜也无明显刺激性.
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蛙腿骨骼肌电机械兴奋的超声标测
目的 应用M型组织多普勒超声评价蛙腿骨骼肌在生理和病理状态电、机械传导特性及其相关性.方法 制备132个断髓去皮牛蛙大腿骨骼肌模型,分为生理状态下单点单极刺激组(n=54)、双点单极刺激组(n=56)和电机械传导阻滞组(n=53);以不同电压电脉冲单点单极和/或双点单极刺激蛙大腿肌,分别在发放刺激位点和接收刺激位点处采用彩色M型组织多普勒显像观察电机械延迟时间(t1)、机械收缩传导时间(t2)及机械收缩持续时间(Tm);采用电生理仪同步记录两电极点间电传导时间差(T);评价以上各组组内、组间各时间参数的差异及相关性.结果 ①各组组内相同刺激距离不同刺激电压闻,t1、t2及Tm差异均无统计学意义(P>0.05);刺激距离、电压保持不变,改变组织多普勒速度标尺,t2差异有统计学意义(P<0.05).②各组组间相同刺激距离、相同刺激电压,单点单极电极刺激和双点单极电极刺激模式比较,t1、t2差异无统计学意义(P>0.05);相同电刺激距离,单点单极刺激电压为1V、2V时,其分别与不同电压的双点单极刺激组相比,单点单极电刺激t2较双点单极电刺激的明显延长(P<0.05).③在两电刺激点中间位点注射酒精造成电机械传导阻滞后,Tm与注射前自身比较明显延长(P<0.05),t2与注射前自身比较表现明显缩短(P<0.05).④各组组内相关性分析:T、t1、t2与Tm均未能建立起相关关系.结论 蛙腿骨骼肌在单点单极电极刺激下,机械收缩传导时间并不随着电压增加而加快;双点单极刺激同时增加刺激电压,蛙腿骨骼肌机械收缩传导时间明显较单极电极刺激状态缩短.这一发现将为临床进一步认知不同起搏方法 的机械传导效应以及改进起搏治疗方法 提供电生理及机械力学重要参考信息.
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鱼、牛蛙、鸡与小鼠脾的比较组织学研究
脾是大的外周淋巴器官,具有造血、血量储备、免疫应答等多种不可替代的功能[1～3].近年来随着对脾结构及功能不断的深入研究,认为脾的生理功能与其独特的组织结构和微循环有关[4].2006年4月从形态学的角度比较鱼、牛蛙、鸡以及小鼠的脾脏组织结构特点,从脾的分化水平探讨其组织结构的进化规律.
