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针刺对创伤后应激障碍大鼠行为及学习记忆功能的影响
目的:观察针刺对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠的行为及学习记忆功能的影响.方法:雄性SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型组、抓取组、帕罗西汀组、针刺组,每组12只.采用"幽闭+电击"法制备PTSD模型.帕罗西汀组予盐酸帕罗西汀溶液灌胃治疗,针刺组予针刺"百会"及单侧"内关""神门""太冲",各组均每日治疗1次,共12 d.观察各组大鼠旷场实验水平跨格数和垂直次数、M o r ris水迷宫逃避潜伏期和平台穿越次数及新物体识别应用指数(DI).结果:旷场实验中模型组、抓取组较空白对照组水平跨格数及垂直次数减少(P<0.05),粪便粒数增多(P<0.05).与模型组、抓取组相比,两治疗组大鼠水平跨格数及垂直次数显著增多(P<0.05),粪便粒数显著减少(P<0.05).Morris水迷宫实验显示,与空白对照组比较,模型组及抓取组逃避潜伏期延长(P<0.05);与模型组、抓取组相比,两治疗组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),平台及有效区域穿越次数显著增加(P<0.05).新物体识别实验显示,与空白对照组相比,模型组与抓取组DI降低(P<0.05);与模型组、抓取组相比,两治疗组DI均有所增加(P<0.05).结论:针刺能有效改善PTSD模型大鼠异常的行为改变,恢复受损的学习记忆功能.
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短期服用盐酸氟西汀对昆明小鼠焦虑样行为的影响
目的:盐酸氟西汀是当前一线抗抑郁药物,但是长期服用有副作用.本研究意在探讨短期服用盐酸氟西汀对小鼠焦虑样行为的影响.方法:将昆明小鼠分为实验组(灌胃Flu,20mg/kg)和对照组(灌胃CMC溶液),连续灌胃7d.后用开放场实验和十字高架迷宫实验对小鼠进行测试.结果:实验组小鼠进入开放场中心次数和中心运动距离均少于对照组.进入十字高架开放臂和开放臂停留时间也少于对照组.结论:短期服用盐酸氟西汀加重昆明小鼠焦虑样行为.
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Wistar大鼠幼年期丰富环境刺激对其社会竞争行为的影响
目的:探讨大鼠幼年期丰富环境经历对其成年后焦虑样行为和社会竞争行为的影响.方法:幼年期Wistar大鼠(生后21天)分为标准饲养组(对照组)和丰富环境刺激(EE)组.对照组为持续在标准实验室饲养条件下饲养;丰富环境组为生后21天至行为学检查时持续在丰富环境下饲养.在生后70天进行行为学检测:采用高架十字迷宫方法测试焦虑样行为;采用社会优势管道试验观察社会竞争性行为.结果:高架十字迷宫实验结果显示,与对照组相比,丰富环境组在开放臂的时间和次数显著增加;优势管道实验结果显示丰富环境刺激组大鼠的社会竞争力明显下降.结论:大鼠幼年期丰富环境刺激可改善大鼠的焦虑样情绪,但导致大鼠社会竞争力下降.
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瑞芬太尼诱发的大鼠焦虑样行为与阿片类药物痛觉敏化的关系
目的 通过研究大鼠静脉输注瑞芬太尼后情绪性反应网络的作用,探索阿片类药物痛觉敏化的机制.方法 成年健康Sprague-Dawley大鼠60只,体重290～310 g,在七氟烷吸入麻醉下予瑞芬太尼(瑞芬太尼组,30只)或0.9％氯化钠溶液(对照组,30只)持续静脉内输注2h建模,分别在术后2、6、24 h采用行为学和形态学的方法研究瑞芬太尼引起的大鼠行为和脑内情绪反应相关核团的变化.结果 两组大鼠术后2h的机械性痛阈缩足阈值均显著低于同组基础值(P值均＜0.05),两组大鼠术后2h的热痛阈缩足潜伏期与同组基础值的差异均无统计学意义(P值均＞0.05),两组间同时间点缩足阈值和缩足潜伏期的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).两组大鼠在术后2、6、24 h旷场实验5min内的行走距离的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).瑞芬太尼组大鼠在术后2h的高架十字迷宫实验开放臂进入次数和停留时间均显著少于同组术后6、24 h和对照组各时间点(P值均＜0.01),闭合臂停留时间显著长于同组术后6、24 h和对照组各时间点(P值均＜0.01);在术后6h的开放臂进入次数显著少于对照组同时间点(P＜0.01).组内不同时间点间和组间同时间点闭合臂进入次数的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).瑞芬太尼组术后2、6h的前扣带回c-Fos和NeuN共染色神经元计数分别显著高于对照组同时间点(P值分别＜0.01、0.05),且c-Fos仅在前扣带回的外颗粒细胞层和外椎体细胞层表达明显增加.结论 瑞芬太尼诱发痛觉敏化的发生可能不是由伤害感受的阈值降低所致,而是通过诱发短期焦虑样行为,改变了疼痛体验的中枢整合过程.
关键词： Sprague-Dawley大鼠 前扣带回 痛觉敏化 焦虑样行为 -
大鼠配对前经历吗啡成瘾及戒断对子代焦虑样行为产生的机制
目的 探讨亲代大鼠配对前经历吗啡成瘾及戒断对子代焦虑样行为产生的机制.方法 选用8周Sprague-Dawley大鼠(雌雄各半)建立吗啡依赖模型,自然戒断21d后配对分组合笼,同时建立生理盐水对照组.子代鼠8周时,雌雄各5只取脑通过Golgi-Cox 染色观察子鼠海马CA1区神经元树突形态情况；另外,子代鼠雌雄再各取5只,深度麻醉后取海马组织作全基因组表达谱分析.结果 吗啡成瘾组子代海马CA1区神经元基树突分枝总长度和基树突分支个数低于对照组子代(P＜0.05)；吗啡成瘾组子代与对照组子代相比,雄性子代鼠共同表达2倍上调的有663个基因,共同表达2倍下调的有449个基因,雌性子代鼠共同表达2倍上调的有350个基因,共同表达2倍下调的有188个基因；其中与情绪行为调节相关的基因有:5-HT2c受体上调7倍,Igf-2上调7.1倍,reelin表达下调3.3倍.结论 亲代经历吗啡成瘾戒断导致子代海马CA1区神经元树突发育不良,5-HT2c、Igf-2、reelin等基因表达异常,这可能是子代焦虑样行为产生的原因.
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布氏田鼠与BALB/c小鼠焦虑样行为的差异比较
目的 比较布氏田鼠与BALB/c小鼠焦虑样行为的差异.方法 记录布氏田鼠与BALB/c小鼠在高架十字迷宫实验(总路程、开臂时间及次数、闭臂时间及次数)及旷场实验(总路程、边缘区时间及次数、中央区时间及次数)的焦虑样行为数据.结果 高架十字迷宫实验中,布氏田鼠所记录的总路程、闭臂时间均极显著高于BALB/c小鼠(P＜0.001),在开臂时间百分比[开臂时间/(开臂时间+闭臂时间)]显著低于BALB/c小鼠(P＜0.05).在旷场实验中布氏田鼠总路程、边缘区滞留时间均极显著高于BALB/c小鼠(P ＜0.001).结论 布氏田鼠具有显著的焦虑行为,为开发新的焦虑症动物模型提供理想的动物资源.
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多巴胺受体调节对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后焦虑样行为的影响
目的：观察缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠远期黑质酪氨酸羟化酶（TH）的表达及焦虑样行为的变化以及多巴胺（DA）受体拮抗剂干预对其远期焦虑样行为的影响。方法将120只7日龄（P7）SD大鼠分为正常对照组、假手术组、HIBD组及HIBD+DA受体拮抗剂组。Rice法制作HIBD模型；假手术组予右侧颈总动脉分离，但不予结扎和低氧处理；HIBD+DA受体拮抗剂组在造模前后予腹腔注射DA受体拮抗剂，其余组予等量的生理盐水腹腔注射。各组分别于P14、P21及P28（n=10）进行高架十字迷宫（EPM）实验检测动物的焦虑样行为及应用免疫组织化学方法测定其大脑黑质TH的表达。结果 P21及P28时HIBD组开放臂停留时间（OT）及开放臂次数比率较正常对照组、假手术组及HIBD+DAR组增高（P<0.05），且HIBD+DAR组OT较正常对照组增高（P<0.05）。P14、P21及P28时HIBD组及HIBD+DAR组TH水平均低于正常对照组及假手术组，且HIBD组低于HIBD+DAR组（P<0.05）。结论初生时给予DA受体拮抗剂能改善HIDB对青春期焦虑样行为的异常作用并能减轻多巴胺能神经元的损伤。
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射频辐射诱导小鼠焦虑样行为的机制探讨
目的:探讨1.8 GHz射频辐射诱导小鼠产生焦虑样行为的机制.方法:我们前期研究发现,1.8 GHz射频辐射可诱导小鼠产生焦虑样行为,同时伴有脑内γ-氨基丁酸(GABA)水平的下降,为进一步探讨其分子机制,30只雄性C57BL/6小鼠被随机分为射频辐照(RF)组和假辐照(Sham)组,然后用1.8 GHz射频辐照源辐照小鼠,每天辐照6h,连续辐照28 d(脑SAR:2.2 W/kg).辐照结束后,采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)检测小鼠海马及大脑皮层内单胺类神经递质含量;免疫荧光染色法观察海马及杏仁核内星形胶质细胞和小胶质细胞的形态、分布及细胞数量;Western Blot检测海马及大脑皮层内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头蛋白抗原(Iba-1)、γ-氨基丁酸B类受体1亚型(GABA-BR1)、γ-氨基丁酸B类受体2亚型(GABA-BR2)蛋白表达水平.结果:与Sham组相比,RF组小鼠海马及大脑皮层内三种单胺类神经递质(多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺)含量无明显改变;RF组小鼠海马和杏仁核内星形胶质细胞和小胶质细胞的形态、分布及细胞数量与Sham组相比无显著差异;并且RF组小鼠大脑皮层及海马组织内GFAP和Iba-1蛋白表达水平与Sham组相比无明显差异.RF组小鼠大脑皮层及海马组织内GABA-BR1和GABA-BR2蛋白表达水平与Sham组相比明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:小鼠发生焦虑样行为可能与GABA水平下降及GABA-B型受体表达下调有关.
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慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调
目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC) TRPC 3/6通道的表达改变.方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot) .结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA) 建立慢性炎性痛模型.痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象.旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为.进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调.结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高.提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关.
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小胶质细胞M1型极化诱发小鼠焦虑样行为及其对前额叶神经元树突棘密度的影响
目的:焦虑样行为与脑内小胶质细胞M1型极化关系密切,但M1型小胶质细胞如何作用于神经元导致焦虑样行为并不清楚,因此本研究的目的在于观察小鼠脑内小胶质细胞向M1型极化诱发产生焦虑样行为,并探讨其对神经元树突棘的影响.方法:实验组采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)脑内注射诱导C57小鼠小胶质细胞向M1型极化,通过旷场实验和高架十字迷宫实验观察小鼠的行为学改变;应用免疫荧光染色方法观察实验组和对照组小鼠的内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFC)内一氧化氮合酶(iNOS)与小胶质细胞标志物iba-1的表达变化,通过Western Blot方法观察实验组和对照组小鼠的mPFC内iNOS、致炎因子白介素1(IL-1)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达变化,以iNOS、IL-1β和TNF-oα表达量均显著增加作为小胶质细胞向M1型极化的标志.采用高尔基(Golgi)染色观察mPFC内神经元树突棘的变化.结果:(1)实验组小鼠mPFC内小胶质细胞iNOS、IL-1β和TNF-α表达量均升高,提示小胶质细胞向M1型极化.(2)实验组小鼠在旷场内的中央活动距离和中央活动时间比对照组均明显减少(P＜0.001);实验组小鼠在高架十字迷宫开臂停留时间比正常组明显减少(P＜0.05).(3)Golgi染色结果显示实验组小鼠mPFC内神经元树突棘的密度相较于对照组增多(P＜0.05).结论:mPFC内小胶质细胞M1型极化可诱发小鼠产生焦虑样行为,并伴随mPFC内神经元树突棘密度增多,提示脑内小胶质细胞M1型极化可诱导焦虑样行为,可能与内侧前额叶皮质锥体神经元树突棘可塑性改变相关.
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Shank3基因敲除自闭症小鼠的焦虑样行为分析
目的:运用旷场、高架十字迷宫分析Shank3基因敲除(Shank3-KO)自闭症小鼠的焦虑样行为.方法:成年Shank3-KO小鼠和同窝野生型(wild type,WT)小鼠.摄像机记录小鼠在旷场和高架十字迷宫中的活动.Smart 3.0行为学软件对活动轨迹进行数据分析,统计小鼠在旷场“中央区域移动距离”、“中央区域移动时间百分比”,在高架十字迷宫中“总移动距离”、“开臂进入次数”、“开臂滞留时间百分比”等数据.结果:与WT小鼠相比,Shank3-KO小鼠在旷场中“总移动距离”显著下降,它们更偏爱在靠近旷场外壁的区域活动,对中心区域的探索欲望低下.在高架十字上,Shank3-KO小鼠更偏爱待在封闭安全环境中,比WT小鼠更恐高,开臂探索次数显著减少.结论:Shank3-KO小鼠自发性焦虑行为与WT小鼠有明显不同,旷场、高架十字环境会刺激其产生更高的焦虑水平.
