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沈阳市首例人感染猪链球菌疫情调查处理
[目的]探讨沈阳市人猪链球菌感染来源与传播途径,为制定科学、有效的防制措施提供理论依据.[方法]收集患者资料,包括病原学、流行病学、临床表现、细菌学检查结果等.[结果](1)患者脑脊液培养检出猪链球菌Ⅱ型;(2)患者有明显手部创口,有直接接触生猪肉史;(3)临床表现为脑膜炎型,预后良好.[结论]通过手部破损的皮肤黏膜接触生猪肉感染,无二代病例,做好生猪疫情控制及加强作业人员的个人防护是预防和控制感染的重要措施.
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猪链球菌四川资阳分离株特征分析
目的 了解猪链球菌四川资阳分离株的生物学特征.方法 以血平板分离培养获得分离株,用猪链球菌分型血清进行分型,用VITEK 2 compact微生物鉴定系统进行生化鉴定,PCR技术检测猪链球菌荚膜多糖基因(CPS 2J)、溶菌酶释放蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY),用K-B纸片法进行药物敏感性分析.结果 从患者中分离到34株猪链球菌,从病死猪中分离到8株猪链球菌,血清分型均为血清2型,VITEK 2 compact微生物鉴定系统生化鉴定也为猪链球菌2型,均具有CPS 2J、MRP、SLY毒力基因,42株菌对青霉素G、阿莫西林、奥恪门丁、头孢曲松、头孢他啶、氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、红霉素、克林霉素、万古霉素均敏感,对吡哌酸、四环素、庆大霉素、链霉素、阿米卡星、复方磺胺甲恶唑、氨曲南、呋喃唑酮、呋喃妥因均耐药.结论 人源株和猪源株均为猪链球菌2型,血清鉴定与生化鉴定结果一致,致病力强,菌株耐药谱非常相似.
关键词： 猪链球菌 血清分型 VITEK 2生化鉴定 PCR 药敏 -
猪链球菌选择性培养基研究
目的 研制一种对猪链球菌有较强选择作用的选择性培养基,用于污染标本中分离猪链球菌.方法 通过药物敏感实验筛选对猪链球菌2型不敏感的抗菌药物,继而用琼脂平板稀释法测定候选抗菌药物的MIC,组方后测定猪链球菌生长率,用模拟标本和猪源标本考核分离效果.结果 研制成功含3种抗菌药物的透明指示选择性培养基(简称StS培养基),该培养基对猪链球菌2型的生长率为85.9%～94.7%,对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯等常见革兰阴性细菌和革兰阳性菌中的葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、粪链球菌抑菌率100%.当模拟杂菌为108 cfu/ml时,直接涂抹法检测灵敏度为7×103 cfu/ml,较使用萘啶酮酸血平板提高1000倍.通过选择肉汤增菌后,StS培养基可使猪源标本猪链球菌检出率从0提高到14.9%.结论 该培养基对猪链球菌具有较强的选择作用,使用该选择性培养基可以提高检测灵敏度,适合猪链球菌的动物源性标本与传染源追踪检测.
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简阳市人感染猪链球菌病流行病学及临床特征分析
目的 分析简阳市41例人感染猪链球菌病例的流行病学及临床特征.方法 使用统一设计的问卷对所有病例进行关于发病过程、危险因素、临床症状、预后等情况的调查.结果 此次感染猪链球菌病例以男性为主(32/41),农民占绝大多数(39/41),半月内均有明显的病死猪接触史.此次发病具有潜伏期短、起病急、病情重等特点.休克型病例死亡率较高(7/9).结论 所有病例传染源明确,均通过病死猪感染,无二代病例.早期预防休克是降低猪链球菌患者死亡率的重点措施.
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人感染猪链球菌病新进展
人感染猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种急性人畜共患传染病,据文献报道全球人感染猪链球菌病仅400多例,其中仅四川省1起暴发发病人数达204例,死亡38人[1],是讫今为止全球大一次流行.
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从病猪中分离的猪链球菌的血清分型和毒力评价
猪链球菌(S.suis)是一种重要的猪致病菌,它可导致断乳期和生长期猪的脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎及猝死.S.suis也可感染人,并被认为是屠宰场、肉加工厂工人和兽医的职业危害之一.现在已知的S.suis有35种血清型,其中血清2型在全球范围内都是优势流行株.加拿大的流行株为:2型、1/2型、3型、4型和8型.意大利流行的是2型,然后依次是1型、9型、1/2型、3型、7型、4型和8型.荷兰常见的是2型和9型.巴西有多个研究都证实2型是优势流行株,但没有进行这些血清型的毒力评价.
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API 20 Strep生化系统鉴定猪链球菌的效果评价
猪链球菌是一种革兰阳性球菌,感染后能引起人和动物各种多样的疾病,严重的引起链球菌中毒休克综合征,并导致人死亡.国内外已有报道[1～3].目前国内暂无猪链球菌的特异性鉴别诊断血清,猪链球菌的鉴定主要依靠形态、生化特征、毒力基因的检测.API 20 Strep生化系统在细菌学领域对传统的技术进行了标准化、微量化,使其操作简单,判断结果容易,无需特殊设备,检出准确率较高,菌种鉴定时间较常规方法可缩短一定时间,特别适用于基层实验室开展工作,尤其在兽医诊断和暴发性传染病中有较大的实用性和可靠性,使疫情在短时间内得到确诊和控制.因此,选用了API 20 Strep生化条对2005-06下旬四川资阳等地疫情分离的猪链球菌进行现场效果评价,现报道如下.
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四川省人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定
目的分离和鉴定猪链球菌,为诊断和治疗提供科学依据.方法用无选择性的血琼脂平板对患者血液、脑脊液、尸检组织和病死猪内脏进行分离培养,并对分离到的细菌进行染色形态观察;用PCR技术检测猪链球菌种基因、荚膜多糖编码基因、溶菌酶释放相关蛋白基因和溶血素基因;用VITEK 2 compact微生物生化鉴定仪定型.结果从4例患者血液、2例患者脑脊液、2例患者尸检组织和7例病死猪中分离到27株链球菌,经鉴定27株菌均为猪链球菌2型,猪链球菌种基因和猪链球菌三种毒力基因阳性.结论此次疫情为猪链球菌2型引起.
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2型猪链球菌中国强毒株znuA基因的原核表达及免疫学活性分析
目的 克隆2型猪链球菌高亲和力锌吸收蛋白(High-affinity zinc uptake system protein,ZnuA)编码基因并进行原核表达,研究ZnuA蛋白的免疫学活性.方法 采用PCR法,从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组扩增基因znuA,构建重组表达质粒pET32a∷znuA,转化E-coli BL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物;His亲和层析柱纯化重组蛋白;Western blot检测ZnuA蛋白的免疫原性;重组蛋白免疫新西兰兔后收集多抗血清,间接ELISA检测多抗血清效价.结果 构建的重组质粒在宿主菌中可高效表达,His亲和层析柱纯化获得较高纯度的重组蛋白;Western blot结果表明ZnuA蛋白具有良好的免疫原性;重组蛋白免疫新西兰兔后获得高效价的多抗血清.结论 在原核系统中成功地表达了znuA基因编码的蛋白,且ZnuA重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究znuA基因在猪链球菌致病过程中的作用以及猪链球菌疫苗的开发奠定了基础.
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信号肽与猪链球菌GDH融合的DNA疫苗构建及体液免疫研究
目的 设计、构建猪链球菌GDH真核表达载体并研究DNA疫苗免疫小鼠的体液免疫.方法 在猪链球菌保护性抗原GDH基因5'末端引入人IL-2信号肽序列,通过PCR进行拼接,得到的融合DNA片段经过酶切克隆入质粒pcDNA3.0,构建核酸疫苗重组质粒pcDNA3.0-gdh.通过肌肉注射途径将重组质粒pcDNA3.0-gdh免疫小鼠,经ELASA实验和Western blot进行检验.结果 构建的表达载体在小鼠体内表达出正确的目的 蛋白,能诱导体液免疫.结论 构建的DNA疫苗能够引起体液免疫,为研究猪链球菌核酸疫苗提供分子工具.
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内江市中区人感染猪链球菌病流行病学调查
目的 通过对市中区5例人感染猪链球菌病现场流行病学资料分析,找出引起此次人感染猪链球菌病疫情的流行因素,为疾病的控制、治疗及预防提供科学依据.方法 对发病区进行流行病学调查,采集患者及病死猪标本进行病原学鉴定,利用现场流行病学分析方法和相关统计学原理进行分析.结果 5例临床病例中有3例分离出链球菌,其中2例为猪链球菌Ⅱ型株,与猪链球菌病具有同源性;屠宰、加工病死猪,接触病死猪的分泌物而通过破损皮肤感染猪链球菌是引起此次疫情发生的重要因素,无个人防护的无害化处理也可引起本病的发生.结论 落实以.四不一处理"为重点的各项防控措施,对今后处置以动物为主要传染源的人畜共患疾病疫情具有指导和借鉴意义.
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人猪链球菌重症感染2例
2005年8月我科收治2例人猪链球菌重症感染病人,现报道如下:病例1:男,40岁,宰杀病死猪1天后出现呕吐,双下肢、腰部胀痛,烦渴,烦躁不安、沉默少语,第三天逐渐出现躯干斑疹、神志模糊,无法辨认亲人,尿少.轻微肌肉酸痛.
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猪溶血素突变体的构建及活性评价
目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价.方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸.重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶血活性和免疫原性.结果:获得三种猪溶素突变体,SLY( P353A),SLY( P353L)和SLY(P353V).溶血试证明SLY (P353V)无溶血活性,蛋白质免疫印迹和动物实验显示SLY( P353V)具有免疫原性.结论:猪溶素突变体SLY(P353V)无溶血活性,有免疫原性.
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猪链球菌胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控
目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控.方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05 _0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控.结果:实时定量PCR结果显示SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的表达；免疫荧光和免疫印迹结果也显示,SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的含量.结论:SSU05_0272调控人脑微血管内皮细胞β-catenin的表达.
关键词： 猪链球菌 人脑微血管内皮细胞 SSU05_0272 β-catenin -
2型猪链球菌细胞壁蛋白SSU1664的表达、纯化及活性分析
目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性.方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性.结果:SSU1664基因能够在大肠杆菌中可溶性表达,Western blot显示其能与猪链球菌菌体免疫后的大鼠血清反应,ELISA检测显示在人感染猪链球菌患者血清中针对SSU1664蛋白的IgM含量显著性升高.结论:SSU1664蛋白具有较高的免疫原性,可作为潜在的猪链球菌疫苗候选分子和猪链球菌早期感染诊断的标志物.
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猪链球菌2型05ZYH33强毒株srt同源序列及srtA原核表达抗原性的分析
目的:阐明猪链球菌(S.suis)2型人源强毒力株05ZYH33基因组中srt的数量和分布,原核表达srtA,并分析表达产物的抗原性.方法:借助生物信息学软件对05ZYH33基因组中Sortase及其相关家族蛋白进行同源性分析,克隆srtA基因,表达的重组蛋白用Western blot检测其抗原活性,制备Sortase鼠多抗血清,间接ELISA检测鼠多抗血清的滴度.结果:通过系统的搜索和分析,发现05ZYH33基因组中含有6个Sortase的同源性序列,其中SrtA及Sortase-like归属sortase家族中的A组,SrtBCD和SrtE属B组.srtA基因在原核细胞中得到高效表达,表达产物可与S.suis 2型的兔多抗血清发生特异性的反应.以重组蛋白为免疫原制备的多抗血清效价达1:6 400.结论:我国S.suis 2型强毒力株05ZYH33含有6个srt基因,与国外报道相比新发现一个sortase-like基因.srtA基因可在原核系统高效表达,重组蛋白具有良好的抗原活性,为进一步研究Sortase功能奠定了基础.
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2例人感染猪链球菌患者的护理体会
目的:探讨人感染猪链球菌的临床特征及护理方法,提高临床护理水平.方法:回顾性分析我院自2006年7月-2007年7月收治的2例猪链球菌感染患者的临床资料,总结临床护理方法.结果:2例患者入院当天即开始昏迷,经精心治疗和护理2天后清醒,1例患者住院18d,另1例患者住院21d,均好转出院;2例患者出院时均遗留轻微下肢麻木无力症状,指导其康复锻炼方法,并进行相关康复指导,随访1a后2例患者均痊愈.结论:猪链球菌感染在临床较为少见,但该病潜伏期短、发病快、转变快、预后差,临床确诊后需立即进行生命体征监测,给予抗休克、抗感染、降低颅内压及相应护理措施后可提高患者预后.
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安徽省首例人感染猪链球菌病的实验诊断
目的 分析、报告安徽省首例人感染猪链球菌病例的实验室诊断结果,为该类实验检测提供依据.方法 采用PCR试验方法对病人的血液标本进行猪链球菌2型特异性核酸片段的体外扩增.结果 在病人血液标本中扩增出特异性目标核酸片段.结论 在病原培养无法捡出病原菌,病人难以得到及时确珍的情况下,PCR实验检测特异性核酸片段是诊断人感染猪链球菌病的有效技术手段,具有极高的实用价值.
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人感染猪链球菌病流行态势
猪链球菌病是由多种不同菌群的链球菌感染引起的人兽共患传染病,在北欧和东南亚的畜间广泛流行.人感染猪链菌病以散发为主,我国于1998年和2005年发生了人感染猪链球菌病暴发疫情,发病人数占全世界病例总数的半数以上.文章主要对猪链球菌病病原学特性和人感染猪链球菌病的临床表现特征、流行情况、流行病学特征以及流行环节、流行因素等方面的新研究进展进行介绍,为今后该病的有效诊断、防治及研究提供参考.
