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大叶蛇葡萄蛋白质组双向电泳分析＊
目的：利用双向电泳法研究大叶蛇葡萄活性成分蛋白表达。方法：采用Tris饱和酚提取和醋酸铵甲醇沉淀大叶蛇葡萄嫩叶中的蛋白质；运用双向电泳法分离蛋白质，并对扫描后的二维凝胶电泳图谱进行分析，得到蛋白质表征图谱。结果：根据各个样品间蛋白点灰度值的比值差异，选择了差异较大的7个蛋白点进行质谱鉴定，鉴定了其中两种蛋白，分别为Hypothetical Protein和Unnamed Protein Product。结论：双向电泳技术的应用为从分子水平研究大叶蛇葡萄活性成分蛋白表达奠定了良好的基础。
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6种大孔吸附树脂对霉茶总黄酮吸附与解吸性能的考察
霉茶为葡萄科蛇葡萄属植物大叶蛇葡萄Ampe-lopsis megalophylla的枝叶,具有降高血压、降胆固醇之功效,民间将其叶置沸水中稍烫,沥干,摊放通风处至表面上有白霉,泡茶服,称为霉茶,临床上用于治疗原发性高血压病[1].
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大叶蛇葡萄化学成分的研究
目的 研究大叶蛇葡萄Ampelopsis megalophylla的化学成分.方法 采用硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱等技术提取分离其化学成分,用UV、1H-NMR、13C-NMR、HSQC及HMBC等光谱方法鉴定化合物结构.结果 得到9个化合物,鉴定了其中8个化合物,分别为大黄素(Ⅰ)、}谷甾醇(Ⅱ)、花旗松素(Ⅳ)、杨梅素(Ⅴ)、蛇葡萄素(Ⅵ)、槲皮素(Ⅶ)、槲皮素-3-O-a-L-鼠李糖苷(Ⅶ)、杨梅苷(Ⅸ),其中化合物Ⅰ结构待定.结论 化合物Ⅰ、Ⅱ～Ⅴ、Ⅶ～Ⅸ等7种成分均为首次从该植物中分离得到.
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筛选大叶蛇葡萄体外抗肿瘤活性物质
目的 研究大叶蛇葡萄提取物对HeLa细胞增殖的影响,筛选有效抗肿瘤活性物质.方法 采用MTT法检测不同质量浓度的大叶蛇葡萄石油醚、乙酸乙酯及水层萃取物和蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷、槲皮素及槲皮苷分别作用于HeLa细胞24、48、72 h后对细胞增殖的抑制作用.流式细胞仪检测蛇葡萄素对细胞周期的影响.结果 乙酸乙酯萃取物、蛇葡萄素和杨梅素均有不同程度抑制HeLa细胞增殖的作用,且在一定剂量范围内,具有时效或量效关系;碘化丙啶单染法显示蛇葡萄素作用HeLa细胞12 h,G0/G1期细胞比率降低,S期细胞比率增加.结论 乙酸乙酯提取物、蛇葡萄素和杨梅素对HeLa细胞增殖有明显抑制作用,且蛇葡萄素可能通过阻滞HeLa细胞于S期而诱导细胞凋亡.
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大叶蛇葡萄抗高血压有效部位筛选实验研究
目的 以急性肾动脉型高血压大鼠动物模型,筛选大叶蛇葡萄抗高血压有效部位.方法 大鼠造模后,分别经十二指肠插管给予大叶蛇葡萄各部位药液,观察并记录各组的血压变化情况.结果 乙酸乙酯部位组给药后,血压在1h内缓缓下降至正常范围,与空白对照组具有特别显著性差异(P＜0.01).结论 大叶蛇葡萄抗高血压的有效部位是乙酸乙酯部位.
关键词： 大叶蛇葡萄 抗高血压 急性肾动脉型高血压大鼠 实验研究 -
大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定
目的 建立高效液相色谱法测定大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的方法.方法 色谱条件:Angilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85,V/V),检测波长为290 nm.结果 蛇葡萄素的回归方程为Y=24 061X+40.07(r=0.999 9,n=6),线性范围为0.101～1.101 μg;平均回收率为99.65%,RSD为1.49%.结论 该方法简单、结果可靠,为大叶蛇葡萄药材的质量控制提供了快速准确的测定方法.
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大叶蛇葡萄化学成分研究
目的 分离和鉴定大叶蛇葡萄的化学成分.方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果 得到7个化合物,分别鉴定为蛇葡萄素(Ⅰ)、杨梅素(Ⅱ)、花旗松素(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅴ)、杨梅苷(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ).结论 化合物Ⅱ～Ⅶ均为首次从该种植物中分离并鉴定.
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霉茶缓释片的高效液相色谱指纹图谱的研究
目的 建立霉茶缓释片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,更有效地监控其质量.方法 采用梯度洗脱法,对霉茶缓释片进行HPLC测定,检测波长292 nm,流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱对霉茶缓释片中总黄酮进行指纹图谱测定.采用中国药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本: 2004A)进行比较计算.结果 通过软件的比较,霉茶缓释片的指纹图谱相似度均大于0.90,建立霉茶缓释片中总黄酮的共有指纹图谱.结论 所建立的方法可作为霉茶缓释片的指纹图谱,有助于霉茶缓释片的质量控制.
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大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱研究
目的 建立大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱.方法 用70％乙醇回流提取制备大叶蛇葡萄总黄酮提取物,采用RP-HPLC分析.色谱柱为Angilent TC-C18(4.6 mm × 250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸水梯度洗脱,检测波长265 nm,柱温为30℃,进样量为20 μl.结果 测定了11批大叶蛇葡萄总黄酮提取物的指纹图谱,标定了10个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求.结论 建立的大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱,为大叶蛇葡萄总黄酮提取物的质量控制提供了依据.
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大叶蛇葡萄石油醚提取物抗乙肝病毒体外实验研究
目的 研究大叶蛇葡萄石油醚提取物体外抗乙肝病毒(HBV)的作用.方法 将大叶蛇葡萄石油醚提取物作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变(CPE)观察药物对2215细胞的毒性,用酶联免疫测定法(ELISA)检测药物对培养8d的2215细胞分泌的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)表达的抑制作用.结果 石油醚提取物的半数毒性浓度(TC50)为99.1μg/ml,大无毒浓度(TCo)为62.5 μg/ml;石油醚提取物对培养8d的2215细胞的HBsAg、HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度(IC50)分别为4.2 μg/ml,26.3μg/ml,治疗指数(TI)值分别为23.6,3.8.结论 大叶蛇葡萄石油醚提取物具一定的体外抗乙肝病毒的作用,为有效部位.
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大叶蛇葡萄提取物对肾性高血压大鼠降压作用的实验研究
目的:观察大叶蛇葡萄提取物蛇葡萄素(ampelopsin)、杨梅素(myricetin)、杨梅苷(myricetrin)对肾性高血压大鼠的降压作用.方法:建立改良的二肾一夹高血压大鼠模型(G-2K1C).大鼠随机分为5组:模型组、蛇葡萄素组、杨梅素组、杨梅苷组和复方罗布麻片Ⅰ组.采用收缩压及舒张压两个指标进行考察.结果:蛇葡萄素组、杨梅素组、杨梅苷组与模型组比较差异具极显著性(P＜0.01),表明蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷具有明显的降压作用;与复方罗布麻片Ⅰ组比较差异无显著性(P＞0.05),表明它们的降压效果与阳性药物复方罗布麻片Ⅰ无显著差异.结论:从大叶蛇葡萄分离得到的蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷具有明显的降压作用,为该药用植物的降压活性成分.
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霉茶总黄酮提取物HPLC指纹图谱的研究
目的 建立霉茶总黄酮提取物的HPLC指纹图谱,更有效地监控其质量.方法 采用梯度洗脱法,对霉茶总黄酮提取物进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.2%磷酸线性梯度洗脱,检测波长为292nm,记录时间为120min.采用中国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行比较计算.结果 运用梯度洗脱能分离霉茶总黄酮提取物的各种成分,通过相似度评价比较,霉茶总黄酮提取物的指纹图谱相似度均大于0.90.结论 此法可作为霉茶总黄酮提取物的指纹图谱,有助于霉茶总黄酮提取物的质量控制.
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大叶蛇葡萄化学成分的研究探讨
目的 对大叶蛇葡萄的化学成分进行探讨研究.方法 采用硅胶柱,色谱柱等技术提取分离其化学成分,用紫外、碳谱、氢谱等光谱方法对其化合物结构鉴定.结果 得到7个化合物,鉴定了其中3个化合物.结论 鉴定的3种化合物有2种均为首次从该植物中分离得到.
