首页 > 文献资料
-
TLR9基因多态性与子宫腺肌病的相关性研究
目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptors/TLRs)9基因多态性与子宫腺肌病发病风险的关系.方法 采用DNA直接测序法检测50例子宫腺肌病患者(病例组)和50例对照组的TLR9基因rs352139和rs352140位点的多态性,比较各基因型和等位基因的分布情况.结果 病例组和对照组中,TLR9基因rs352139位点的TT、CT、CC3种基因型频率分别为38％,40％,22％和48％,32％,20％,两组比较差异无统计学意义(x2＝1.073,P=0.585);T、C等位基因频率分别58％,42％和64％,36％,两组比较差异无统计学意义(x2 =0.757,P=0.384)；TLR9基因rs352140位点的TT、CT、CC3种基因型频率分别为20％,40％,40％和18％,38％,44％,两组比较差异无统计学意义(x2=0.174,P=0.917);T、C等位基因频率分别为40％,60％和37％,63％,两组比较差异无统计学意义(x2=0.190,P＝0.663).结论 TLR9基因rs352139和rs352140位点多态性与子宫腺肌病的发病风险无关.
-
白芍总苷下调果糖-高脂诱导大鼠非酒精性脂肪性肝病ERK1/2,TLR4和TRL9蛋白表达的作用
目的 观察白芍总苷对果糖-高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏组织胞外信号调节激酶-1/2(p-ERK1/2)、Toll样受体-4(TLR4)和Toll样受体-9(TLR9)蛋白的表达.方法 SD大鼠随机分为正常对照组和果糖-高脂诱导造模组,后者连续10周果糖-高脂喂饲;第6周末建立疾病模型后,病鼠随机分为模型组、二甲双胍组(200mg·kg-1)、白芍总苷低剂量组(100 mg·kg-1)和高剂量组(200mg· kg-1),每组均为10只.用药4周后处死所有实验大鼠,观察上述药物对血清空腹血糖(FBG),胰岛素含量(Fins),胰岛素敏感指数(ISI),胆固醇(TC),低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),三酰甘油(TG),游离脂肪酸(FFA)含量,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胱甘肽转移酶(GST)活性和肝脏指数(liver index),以及采用蛋白质印迹法检测肝脏组织p-ERK1/2、Toll样受体-4、TLR9蛋白表达.结果 与正常大鼠比较,模型大鼠血糖、胰岛素、胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、三酰甘油及游离脂肪酸含量、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和谷胱甘肽转移酶的活性单位、肝脏指数、p-ERK1/2、Toll样受体-4和TLR9蛋白表达明显上调(P＜ 0.01或P＜0.05),胰岛素敏感指数水平及高密度脂蛋白-胆固醇含量明显降低(P＜0.01),二甲双胍和白芍总苷低、高剂量组均能改善此现象(P＜0.01或P＜0.05),但对丙氨酸氨基转移酶的含量改变没有统计学差异(P＞0.05).结论 白芍总苷能改善果糖-高脂诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢异常及拮抗胰岛素抵抗,增强胰岛素敏感性,改善肝功能;其作用机制与白芍总苷下调肝脏组织p-ERK1/2、Toll样受体-4、TLR9蛋白表达作用有关.
-
IRF5、TLR-9基因多态性与山东汉族人群系统性红斑狼疮的相关性研究
目的 研究山东地区汉族人群干扰素调节因子5(IRF5)基因rs2004640、rs10954213及Toll样受体-9(TLR-9)基因rs187084、rs352139的单核苷酸多态性,探讨其与系统性红斑狼疮(SLE)易感性之间的关系.方法 采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性等方法对92例SLE患者和88名健康对照IRF5基因rs2004640 G/T、rs10954213 G/A及TLR-9基因rs187084C/T、rs352139A/G的多态性进行分析,计算基因型和等位基因频率.结果 (1)SLE患者IRF5 rs2004640GG、GT、Tr基因型频率分别是0.198、0.521和0.281,与对照组比较差异有统计学意义(X~2=8.73,P<0.05);SLE患者IRF5 rs109542130GG、GA、从基因型频率分别是0.318、0.409和0.273,与对照组间比较差异有统计学意义(X~2=6.36,P<0.05).(2)SLE患者TLR-9 rs187084CC、CT、Tr基因型频率分别是0.185、0.413和0.402,与对照组比较差异无统计学意义(X~2=2.99,P>0.05);SLE患者TLR-9基因rs352139AA、AG、GG基因型频率分别是0.228、0.533和0.239,与对照组比较差异无统计学差异(X~2=4.54,P>0.05).结论 山东汉族人群IRF5基因位点rs2004640、rs10954213的多态性,可能与山东地区汉族人群SLE的易感性有关,而TLR-9基因rs187084、rs352139多态性与山东汉族人群SLE的易感性与无关.
-
Toll样受体-9在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的 明确Toll样受体-9(Toll like receptor-9,TLR-9)在喉鳞状细胞癌及癌旁正常组织的表达及分布,并探讨其在喉癌发病机制中的作用及临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),免疫印迹(Western blot)及免疫组织化学技术检测TLR-9在喉癌组织和癌旁正常组织中的表达和分布.结果 RT-PCR检测表明,TLR-9 mRNA在喉癌及喉正常组织内均有表达,TLR-9在喉癌组织中的表达较癌旁正常组织表达明显增多(t=2.743,P=0.017),并且在喉癌组织Ⅰ期+Ⅱ期与Ⅲ期+Ⅳ期表达之间差异具有统计学意义(t=1.787,P=0.040).蛋白质免疫印迹检测发现,癌旁正常组织无TLR-9表达,在喉癌组织Ⅰ期+Ⅱ期与Ⅲ期+Ⅳ期表达之间差异具有统计学意义(t=1.701,P=0.015),TLR-9的表达位置在180 kDa.免疫组化染色发现:TLR-9阳性表达为黄色,主要分布在肿瘤细胞胞浆内.结论 TLR-9可能通过免疫机制参与喉癌的发展过程.
-
Toll样受体-9在肾小球肾炎进展中的作用
目的:通过观察CpG-ODN对肾小球肾炎刺激后Toll样受体-9(TLR9)的变化,探讨TLR9在肾小球肾炎发生、发展中的变化及作用.方法:Wistar雄性大鼠,随机分为正常组(N组)、抗-thy1.1肾炎模型组(M组)、模型+CpG-ODN注射组(CpG组)、模型+GpC-ODN注射组(GpC组).各组大鼠分别于用药后2、4、6和8周留取24 h尿;实验第8周留取24 h尿,心脏采血、留取肾脏后处死.用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量;血清学方法检测血清白蛋白和肾功能;肾脏组织用于肾脏病理检查、NF-κB p65免疫组化染色,RT-PCR法检测肾脏组织内TLR9、INF-γ及IL-6 mRNA的表达.结果:TLR9在M组轻度表达,在给予CpG-ODN刺激后,TLR9、IL-6和IFN-γ mRNA在肾脏表达率与M组比较均明显增加,24 h尿蛋白漏出量增多,血清白蛋白显著降低;光镜下可见病理改变明显加重,MCs弥漫性中、重度增生,部分肾小球有细胞性新月体形成,多处粘连,毛细血管襻开放受限,系膜区可见单核巨噬细胞浸润.结论:TLR9介导的趋化因子和趋化因子受体表达加重肾小球肾炎的生化及病理改变,TLR9介导的免疫反应是引起肾小球肾炎不断进展的机制之一.
关键词： Toll样受体-9 系膜增生性肾小球肾炎 寡聚脱氧核糖核酸 -
CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响
目的 观察CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响.方法 将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、CpG组和GpC组.N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5 ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5 ml/(kg·d),隔日1次,共3次.注射抗-thy1.1单克隆抗体后,隔天,CpG组经尾静脉注射CpG-ODN,300μg/只,GpC组经尾静脉注射GpC-ODN,300μg/只,隔日注射,共3次.各组大鼠分别于用药前和第1针注射后1周测定尿蛋白;用药后第8周留取大鼠24 h尿、血清及肾脏组织,检测24 h尿蛋白定量、血清白蛋白和肾功;肾脏组织用于肾脏病理检查以及RT-PCR法检测TLR-9 mRNA的表达.结果 CpG组与M组和GpC组相比,血清白蛋白含量明显降低,且差异有显著意义;M组、CpG组和GpC组在给药后1周均出现尿蛋白,在给药后8周,24 h尿蛋白含量明显增多;CpG组与M组相比,TLR-9 mRNA在肾脏的表达水平明显增加,且差异有显著意义;GpC组与M组相比,差异无显著意义;光镜下可见CpG组肾组织病理改变明显加重.结论 天然CpG-ODN可促进肾小球肾炎病情加重,TLR-9可能在其发生机理中起重要作用.
-
TLR9信号通路参与急性肺损伤的作用机制研究
目的 研究Toll样受体-9在急性肺损伤中的作用机制,为临床诊疗提供理论依据.方法 分离40例急性肺损伤患者的外周血单个核细胞,采用RT-PCR检测Toll样受体-9 mRNA表达,外周血单个核细胞(PBMC)经过非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸序列的寡脱氧核苷酸(CpG ODN)和不含非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸序列的寡脱氧核苷酸(non-CpG ODN)、空白培养三种形式培养72 h.采用3H-TdR掺入法测定PBMC增值变化,采用流式细胞仪检测T细胞亚群比例、T细胞表面CD69分子变化及CD8+T细胞内IFN-γ和IL-4的表达.采用ELISA法对PBMC上清液IFN-α的浓度,并评价其对氯喹和抑制性ODN的反应程度.结果 急性肺损伤患者PBMC表达TLR9 mRNA的表达强度为(0.75±0.08),与健康组(0.76±0.09)比较差异无统计学意义(P＞0.05);CpG ODN诱导急性肺损伤患者PBMC增殖(P＜0.05),增加CD3+T细胞表面CD69分子的表达(P＜0.05);增强CD8+T细胞产生IFN-γ的能力(P＜0.05);增强CD4+T/CD8+T比值(P＜0.05);CpG ODN可促进IFN-α的分泌(P＜0.05);氯喹和抑制性ODN会抑制CpG ODN产生IFN-α.结论 TLR9参与急性肺损伤患者的免疫调节,其激活效应包括促进PMBC活化、增加PBMC中CD4+T的比例,诱导并增殖IFN-α产生,促进CD8+T分泌IFN-γ.
-
雷公藤内酯醇对系统性红斑狼疮患者树突状细胞Toll样受体-9表达的影响
目的:检测雷公藤内酯醇对体外培养的系统性红斑狼疮(SLE)患者树突状细胞(DC)Toll样受体-9(TLR9)表达的影响.方法:体外培养SLE患者DC,用终浓度分别为20、40、60 μg/L的雷公藤内酯醇刺激细胞3、6、12 h,混合淋巴细胞反应观察DC刺激T细胞后T细胞增殖的变化,RT-PCR检测TLR9 mRNA在DC中的表达情况.结果:与健康对照者相比,SLE患者DC表达CD11c+、CD123+ 的百分率明显下降(P ＜ 0.05);雷公藤内酯醇以剂量依赖的形式抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖;以剂量和时间依赖的形式下调SLE患者DC TLR9 mRNA表达.结论:雷公藤内酯醇可抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖,雷公藤内酯醇可能通过下调SLE患者DC TLR9的表达而发挥免疫抑制作用.
-
羟氯喹对Toll样受体-9介导的干扰素-α表达水平的影响
目的：初步探讨羟氯喹对Toll样受体-9（TLR-9）介导的人外周血单个核细胞（PB-MC）中IFN-α表达水平的影响。方法提取健康志愿者的PBMC。分别将PBMC与0、0.375、0.75、1.5、3.0、6.0μg/ml TLR-9激动剂ODN 2216共同培养12 h，以及与1.5μg/ml ODN 2216共同培养0、6、12、24、48 h，从细胞水平模拟SLE高表达IFN-α。然后用1.5μg/ml ODN 2216与PBMC共同培养6 h，加入羟氯喹1.25μg/ml （实验组）及等量的培养基（阳性对照组），在未加入ODN 2216的PBMC内加入等量的培养基（空白对照组），继续培养12 h后用实时荧光定量PCR法检测并比较各组PBMC中IFN-αmRNA表达水平。结果 PBMC与1.5μg/ml ODN 2216共同培养6 h时，IFN-αmRNA表达水平高（P＜0.01）。阳性对照组PBMC中IFN-αmRNA表达水平明显高于空白对照组（P＜0.01）。与阳性对照组相比，实验组PBMC中IFN-αmRNA表达水平明显降低（P＜0.05）。结论羟氯喹可明显抑制经TLR-9介导的IFN-α高表达。
-
感染诱导抗中性粒细胞胞浆抗体产生的机制研究现状
越来越多的感染性疾病中出现抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA),这提示感染可能是产生ANCA的病因之一.本文就感染引起机体产生ANCA的具体机制进行综述.
关键词： 感染 抗中性粒细胞胞浆抗体 Toll样受体-9 PR3互补肽 -
Toll样受体-9的研究进展
Toll样受体-9(Toll-like receptor 9,TLR9)是哺乳动物TLRs家族中一员,作为细胞表面的天然模式识别受体,主要参与免疫刺激序列(CpG序列)激活免疫细胞的信号传导,从而在天然抗感染免疫及联系天然免疫和获得性免疫中发挥重要作用.通过对TLR9-CpG作用通路的研究,将促进天然免疫机制研究的进一步深入,有利于解决诸如:CpG佐剂、DNA疫苗、CpG抗感染、抑制肿瘤、预防过敏反应等实际应用过程中存在的问题.
