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高剂量率60Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线
目的高剂量率60Co γ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线.方法60Coγ射线照射离体人血,吸收剂量为1.0～8.0Gy,剂量率为3.0 Gy/min,染色体采用微量法,培养开始加秋水仙碱,主要记录染色体型畸变的非稳定性畸变,包括无着丝粒断片、微小体、无着丝粒环、双着丝粒体和着丝粒环(双+环),对实验数据做曲线拟合,并检验回归系数的显著性和曲线的拟合度.结果60Coγ射线照射离体血诱发的"双+环",在0～8.0Gy范围内,呈良好的剂量-效应关系,拟合的佳回归方程为Y=0.269 792D+7.730 83×10-2 D2(R=0.991 98).结论高剂量率60 Coγ射线照射离体人血,采用微量法培养染色体,在0～8.0 Gy范围内,"双+环"佳数学模式为Y=bD+cD2.
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60Co γ线超大剂量照射人离体血早熟凝集染色体环的剂量-效应曲线
目的 建立超大剂量γ线离体照射后人血淋巴细胞早熟凝集染色体环(PCC-R)的剂量.效应曲线.方法 外周静脉血样采自3名健康男性,经60Co γ线(剂量率2.35 Gy/min)照射0、1、3、5、8、10、13、16、20、26和30 Gy.于37℃恒温箱培养48 h,收获前1 h加入冈田酸以诱导产生早熟凝集染色体(PCC),计数PCC细胞中的PCC-R频率,拟合剂量-效应曲线.结果 PCC指数随照射剂量增加而逐渐减少;每细胞PCC-R频率随照射剂量增加而增加直到20 Gy,>20 Gy后趋于饱和.对所获数据进行回归分析,所拟合的曲线符合线性模型(上限剂量到20 Cy):y=-0.020+0.052D(y为每细胞PCC-R频率,D为剂量,Gy).结论 本研究用药物诱导PCC-R法所建立的剂量-效应曲线可估计的上限剂量达20 Gy,它的可靠性和实用性还有待于在今后的辐射事故中实际应用加以验证.
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BAC FISH与PAINT法检测辐射诱发染色体易位的比较
目的 比较自行建立的BAC FISH方法和常规染色体涂染(PAINT)方法分析辐射诱发染色体易位有效性的不同.方法 对正常人外周血照射不同剂量(0～5.0 Gy)的60Co γ射线,用1、2和4号染色体特异性端粒和着丝粒探针BAC FISH及PAINT分析染色体易位,将观察到的染色体易位率换算为全基因组易位率,并建立两种方法分析辐射诱发的染色体易位率剂量-效应曲线.结果 用两种方法分析0～5.0 Gy 60Coγ射线诱发的全基因组易位率均随着吸收剂量的增加而增高;在相同的剂量点,BAC FISH染色体易位检出率高于PAINT方法.两种方法分析吸收剂量和全基因组易位率之间的剂量-效应曲线均为二次方程模式,分别为Y=0.043D2+0.0008D+0.0048(BAC FISH)和Y=0.043D2+0.006D+0.0027(PAINT).结论 自行建立的BAC FISH方法分析辐射诱发染色体易位检出率高于常规染色体涂染方法,两种方法建立的剂量-效应曲线方程的β系数相同.
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重离子12C对60Co γ射线诱发人染色体畸变效应的比较研究
目的重离子和高剂量率60Co γ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线;比较重离子12C照射与60Co γ射线照射诱发染色体畸变的相对生物效能.方法重离子12C和60Co γ射线照射离体人血,吸收剂量率为3 Gy/min,吸收剂量为1.0～8.0 Gy.主要记录染色体型畸变的非稳定性畸变,对双着丝粒体和着丝粒环做曲线拟合,并检验回归系数的显著性和曲线的拟合度.结果重离子12C和60Co γ射线照射离体血诱发的染色体畸变(双+环),在0～8 Gy范围内,呈良好的剂量-效应关系.12C离子诱发染色体畸变的RBE值是不恒定的,它随吸收剂量增加而减少,在0.3～8.0 Gy范围内,RBE值(Dγ/D\-c)从2.62到1.00,平均1.58.结论 12C离子对60Co γ射线照射诱发染色体畸变,在照射剂量较低时,有较高的生物效应.
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重离子束12C6+照射人离体血建立淋巴细胞微核的剂量-效应曲线
目的研究建立重离子束12C6+照射人离体血诱发淋巴细胞微核的剂量-效应曲线.方法用地面加速器产生的重离子12C6+(平均LET为36.70 keV/μm),不同吸收剂量、不同吸收剂量率照射离体人血,用CB微核法观察双核淋巴细胞中的微核.结果在0～6 Gy吸收剂量范围内,淋巴细胞微核率随吸收剂量的增加而增加,拟合的佳方程为Y=665.09×D0.85.结论12C6+照射人离体血诱发淋巴细胞微核在0～6 Gy吸收剂量范围内呈幂函数关系.
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60Co γ射线超大剂量照射离体人外周血染色体畸变的剂量-效应研究
目的 探讨超大剂量γ射线离体照射后人外周血淋巴细胞染色体畸变的量效关系,建立双+环(dic+r)大剂量-效应曲线.方法 外周静脉血样采自3名健康男性,经60Co γ线(0～50 Gy,剂量率2.35 Gy/min)照射.采用即刻加秋水仙素的微量全血法,分别培养52、72及96 h.计数有丝分裂指数(MI)、双着丝粒体(dic)和环(r)畸变数,拟合dic+r剂量-效应曲线,对2例受大剂量照射的事故患者进行剂量估算.结果 MI随照射剂量的增加而逐渐减少.每细胞dic+r频率随照射剂量增加而增加直到23 Gy(5 Gy之后增加幅度较前变小),＞23 Gy后趋于饱和.对所获数据进行回归分析,拟合dic+r大剂量.效应曲线(5～23 Gy):每细胞dic+r频率γ=-1.608(±0.300)+0.830(±0.051)D-0.013(±0.002)D2(R2=0.998).用拟合曲线对2例受照患者剂量的估箅结果 与用物理方法 和电子自旋共振(ESR)法估箅的剂量及临床表现基本一致.结论 本研究建立的dic+r大剂量-效应曲线,可估计的上限剂量达23 Gy,有可能提高常规染色体畸变分析用作生物剂量计的实用价值.
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不同传能线密度射线0～1Gy照射诱发染色体畸变的量-效关系研究
目的 建立0～1 Gy范围内60Coγ射线、252Cf中子、单能中子及12C重离子诱发染色体畸变剂量-效应曲线,用于评价职业受照或低剂量辐射损伤.方法 采用不同照射装置1 Gy以内照射离体人外周血,于培养开始加秋水仙素,培养48 h收获,制备染色体标本,Metafer中期细胞自动寻找系统,人机交互计数染色体畸变,优拟合数据得到相应模型.结果 在低剂量范围内,以双着丝粒体+环(dic+r)为终点,60C0γ射线为线性模型,252Cf中子、单能中子及12C重离子为线性平方模型；以无着丝粒断片( ace)为终点,60C0 γ射线和12C重离子为线性平方模型,252Cf中子和单能中子为线性模型；以总畸变为终点,4种射线均为线性平方模型.结论 高传能线密度(LET)射线损伤效应高于低LET射线,4种射线损伤效应依次为252Cf混合中子＞单能中子＞12C重离子＞60C0 γ射线.在低剂量范围内dic+r指标适用于高LET照射的剂量估算.
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SAS在辐射剂量-效应研究中的应用
简述辐射剂量-效应研究中常用的13种数学模型。应用SAS 6.12 for windows统计软件包编写的程序可以方便、快捷地实现辐射剂量-效应曲线的拟合并筛选出佳的数学模型。
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肥胖对女性患者罗库溴铵剂量-效应曲线的影响
目的：观察肥胖对女性患者罗库溴铵剂量-效应曲线的影响,并计算肥胖女性患者罗库溴铵的95%有效剂量(ED95)。方法选择择期行全身麻醉女性患者80例,年龄18~45岁,ASAⅠ或Ⅱ级,手术时间<1.5 h。根据 BMI 20~25 kg/m2和30~35 kg/m2分为 N 组与 B 组,每组40例。两组患者根据随机数字表法各分为0.075、0.1、0.15、0.3 mg/kg 四个剂量组,分别为 N1~N4组和 B1~B4组。麻醉诱导同时开启注射泵,待患者意识消失后,校对肌松监护仪,启动 TOF 模式, N1~N4组和 B1~B4组分别给予罗库溴铵单次剂量0.075、0.1、0.15、0.3 mg/kg。记录各组患者给予罗库溴铵的首次剂量、第一个肌颤搐反应(T1)的大抑制程度和肌松药起效时间。采用直线回归法建立罗库溴铵量效关系回归方程,计算 N 组和 B 组患者的 ED50和 ED95及其95%CI。结果 N 组和 B 组的量效关系回归方程分别为 Y1=3.464X1-2.230和 Y2=3.843X2-2.750。B 组 ED50、ED75、ED90、和 ED95分别为0.103、0.145、0.201和0.251 mg/kg 明显小于 N 组0.122、0.176、0.254和0.324 mg/kg(P <0.05)。N 组与 B 组 T1大抑制程度均随药量的增加而增大(P <0.05)。结论肥胖影响年轻女性患者罗库溴铵的量效曲线,使其对罗库溴铵的敏感性增强,肥胖女性罗库溴铵 ED95为0.251 mg/kg。
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快中子与60Co-γ射线诱发人淋巴细胞生物效应研究
目的 18MeV中子和60Coγ射线照射离体人血淋巴细胞,建立染色体畸变和淋巴细胞微核的剂量-效应曲线;计算中子染色体畸变和微核的相对生物效应.方法 中子和60Coγ射线照射离体人血,吸收剂量率都为O.2Gy/min,吸收剂量为0.5～3.O Gy.记录染色体型畸变和双核淋巴细胞的微核,分别对双着丝粒体+着丝粒环和微核做曲线拟合,并计算中子的RBE.结果 中子和60Coγ射线照射离体人血诱发的染色体畸变(双+环)和淋巴细胞微核,呈良好的剂量-效应关系.中子诱发染色体畸变和微核的RBE值都随吸收剂量的增加而减少,在0.5～3.O Gy 范围内,诱发染色体(双+环)的RBE值是3.59～1.77;诱发微核的RBE值是2.91-1.24.结论 快中子照射离体人血淋巴细胞产生的染色体畸变(双+环)和微核的剂量一效应关系都符合线性平方模型.中子与60Coγ射线相比较,在照射剂量较低时,有较高的生物效应.
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重离子照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线
目的用重离子12C照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线.方法重离子12C照射离体人血,吸收剂量为1.0～8.0 Gy,剂量率为3.0 Gy/min.染色体采用微量法,培养开始加秋水仙硷,主要记录染色体型畸变的非稳定性畸变,对实验数据做曲线拟合,并检验回归系的显著性和曲线的拟合度.结果重离子12C照射离体血诱发的染色体畸变(双+环),在0～8.0 Gy范围内,呈良好的剂量-效应关系,拟合的佳回归方程为Y＝0.858503D+0.3615×10-2D2.结论重离子12C照射离体人血在0～8.0 Gy范围内,"双+环"拟合的佳数学模式为Y＝bD+cD2.
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遵循药理学原理的细胞毒检验方法探讨
细胞毒检验是了解和评价机体免疫功能状态的重要方法,历来受免疫学家重视.51Cr释放法是上世纪60年代建立的细胞毒活力检验方法,随后又建立了多种检验方法,包括荧光标记流式细胞术方法,统称为传统细胞毒检验方法(TCA).TCA方法用杀伤率表示细胞毒活力是概念应用错误,以效靶细胞比为条件检测的杀伤率是实验条件应用错误,违背药理学原理,不反映细胞毒活力,没有实用性.本文通过对TCA错误理念和方法条件的探讨分析,遵循药理学原理建立了一个比较实用的细胞毒活力检验方法.新方法以极限稀释分析方法为基础,以效应细胞密度为自变量,用效应细胞含有的细胞毒活性细胞频率(CCF)和100％杀伤率限定的效应细胞密度(ID100)做细胞毒活力指标,通过量-效曲线和条件标准化测定CCF和ID100;不标记细胞,用全或无计数方法定量靶细胞;而且可以预置实验误差和可信度.新方法用K562细胞作为靶细胞,在96孔细胞培养板上检测细胞毒活力,健康人外周血单核细胞(PBMC)的ID100为6.8 × 104/孔左右;CIK细胞ID100≤4.0×104/孔;人红细胞的克隆抑制率为0;同一个细胞样品,用红细胞裂解液处理,克隆抑制率随处理强度成比例变化;样本批间检测结果变异不大,表明该方法能真实反映细胞毒活力.
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双氢杨梅树皮素对离体兔胸主动脉条钙通道阻滞作用的研究
目的:探讨双氢杨梅树皮素对血管平滑肌的作用机制.方法:采用家兔离体胸主动脉条标本,观察双氢杨梅树皮素对去甲肾上腺素(NA)、氯化钾(KCl)和氯化钙(CaCl2)所致收缩反应的剂量-效应曲线的影响,同时与钙通道阻滞剂维拉帕米(Ver)作比较研究.结果:双氢杨梅树皮素能舒张已被NA、CaCl2和高K+收缩的兔胸主动脉条,使NA、KCl、CaCl2诱导的剂量-效应曲线非平行右移,大反应降低;这一作用与Ver相似,是通过阻钙通道实现的.但它们阻断钙通道的方式可能有所不同.双氢杨梅树皮素除了能阻断电压依赖的钙通道(PDC),在较高浓度时还能阻断受体激活的钙通道(ROC).而Ver只选择性阻断PDC.结论:双氢杨梅树皮素扩张血管的机制与其钙通道阻滞作用有关.
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X线诱发染色体畸变和微核的剂量-效应关系
目的 用X线照射离体人血检测染色体畸变和微核率,建立淋巴细胞染色体畸变和微核的剂量-效应曲线,用于受照者的受照剂量估算.方法 用BG-6B医用直线加速器在0～5.0Gy的剂量范围内分别选0、0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0及5.0Gy共8个剂量点照射离体的健康人血,经细胞培养收获染色体并检测其畸变,用CB微核法检测淋巴细胞微核,建立淋巴细胞染色体畸变和微核的剂量-效应曲线,并用F检验和曲线拟合指数R2进行验证.结果 人染色体畸变和微核的自发率(本底值)很低,照射后各剂量点的染色体畸变和微核在0～5.0Gy范围内,随着吸收剂量增加而增加,呈正相关.染色体畸变和微核的剂量-效应曲线的回归方程分别为(y)=1.0046×10-2+5.8570×10-3D+8.8984×10-2D2和(y)=4.3260×10-3+2.3248×10-2D+1.4278×10-2D2,经F检验,染色体"dic+r"细胞和微核细胞与剂量(Gy)的回归关系(P<0.01)有高度的统计意义,而曲线的拟合指数R2分别为0.999和0.998.结论 本实验建立的染色体畸变和微核剂量-效应曲线的回归方程式,经F检验和拟合度指数的验证,证明dic+r细胞和微核细胞与剂量的回归关系有高度的统计意义且曲线拟合度好,可作为本地区X线事故剂量估算的数学回归方程式,为慢放病、辐射损伤事故的医疗救治方案的确定和进行预后评估提供依据.
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60 Co γ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线
目的建立60Co γ射线照射离体人血诱发染色体畸变的剂量-效应曲线.方法采集健康成人外周静脉血,60Co γ射线照射,照射吸收剂量为0～5.0 Gy,剂量率为0.38 Gy/min.采用开始加入秋水仙碱法进行细胞培养48 h.制片后观察淋巴细胞中染色体型非稳定性畸变,包括双着丝粒体、着丝粒环、无着丝粒断片等.用双着丝粒体加着丝粒环对剂量进行曲线拟合.结果离体外周血经60Co γ射线照射后,在0～5.0 Gy范围内"双+环"率与剂量在不同剂量范围建立的回归方程为:0～0.5 Gy, y=0.002 17+0.082 83D2; 0～1.0 Gy, y=0.001 46+0.093 10D2; 0～5.0 Gy, y=0.048 51D2.186 01;0.5～5.0 Gy, y=0.048 48D2.186 45.结论成功建立了60Co γ射线照射离体人外周血诱发染色体畸变剂量效应曲线.
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X射线照射离体人血建立染色体畸变剂量-效应曲线
目的 建立X射线照射离体人血诱导染色体畸变的剂量-效应曲线.方法 采用健康男性肘静脉血,经照射剂量为0.00~5.00 Gy、剂量率为0.8 mGy/s的X射线离体照射,以培养开始加秋水仙素法培养细胞,常规制片,经吉姆萨染色后,采用盲法阅片,记录中期细胞的染色体双着丝粒体、多着丝粒体和双着丝粒环及其伴随断片(以下简称"双+环"),拟合"双+环"率与照射剂量的剂量-效应曲线.结果 在0.00~5.00 Gy范围内"双+环"率和畸变细胞率均随照射剂量增加而增高(P<0.01).0.00~1.00 Gy的佳拟合方程为y^=23.22 D2+4.768 D-0.018(P<0.01);0.50~5.00 Gy的佳拟合方程为y^=34.23 D-3.072(P<0.01).结论 所建立的剂量-效应曲线拟合度较好,可为本实验室评估照射量提供参考依据.
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花萼海绵体诱癌素A诱导的早熟染色体凝集的剂量-效应曲线的检验
目的 估算相同剂量照射外周血的剂量,比较花萼海绵体诱癌素A(Calyculin A,CA)诱导染色体凝集(PCC)法与秋水仙素常规法的荆量-效应曲线.方法离体外周血照射、剂量为2.50 Gy,计数CA诱导的PCC的总畸变率、断片率与秋水仙素常规法的双着丝粒染色体+环状染色体(dic+r)率,估算照射剂量.结果秋水仙素常规法估算的照射剂量为2.31 Gy.PCC断片估算的照射剂量为2.87 Gy,而PCC总畸变估算的照射剂量为2.46 Gy;以后者估算出的剂量更加接近实际照射剂量.结论CA诱导的PCC法与秋水仙素常规法的估算剂量-效应曲线基本一致.
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基于三维生物学有效剂量的肺纤维化分层与预测模型
目的:拟建立基于小鼠放射性肺损伤影像学改变的三维生物学有效剂量(BED)预测模型.方法:对研究纳入单次与分次照射的实验结果进行BED与数学建模.采用8～10周龄C57BL6雌性小鼠随机分组进行X线全肺野照射,分别给予单次照射组0.0、10.5、12.5、14.5、17.5、20.0 Gy梯度剂量照射;分割照射组单次0.0、2.0、4.0、6.0、7.0、8.5 Gy,共5次分割照射.照射后24周行CT扫描成像、经三维分割算法获得肺部平均密度与肺部体积值.结果:根据BED分别建立基于CT肺密度、肺体积的剂量-效应关系,其中位剂量(半数有效剂量)分别为(68.17±10.53)Gy(adjusted R2=0.89)、(84.12±19.70)Gy(adjusted R2=0.94).进一步对CT肺密度与肺体积进行线性回归分析后发现两者存在显著线性相关性(R2=0.96,P<0.0001).根据这一重要动态关联,终建立了BED剂量与肺纤维化基于双影像学参数的三维剂量-效应评估模型.结论:首次提出了辐射诱导小鼠肺纤维化的三维BED模型.该模型可以对不同分割剂量组的纤维化程度进行准确地分层与预测,为开展部分肺野照射、抗肺纤维化新药测试等研究奠定放射生物学基础.
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提前获取早熟凝集染色体环快速估算受照剂量的可行性研究
目的:缩短培养时间,拟合γ射线诱发离体人外周血淋巴细胞早熟凝集染色体环(premature condensation chromosomerings,PCC-R)的剂量-效应曲线,探讨快速估算生物剂量的可行性.方法:60Coγ射线照射离体人外周血,剂量为0、1、3、6、10、15、20Gy,照后分别培养44和48 h,收获前1h加入冈田酸,分别计数PCC-R频率,拟合受照44与48 h的剂量-效应曲线并进行比较.结果:培养44h较48 h获得的分析细胞数略少,PCC-R率略低于48 h结果(各个剂量点间的差异均无统计学意义).外周血淋巴细胞PCC-R率随照射剂量的增加而增加,0～15 Gy剂量范围内二者之间满足直线方程y=-0.015 2+0.062 5D(R2=0.983 9).结论:缩短培养时间至44h,PCC-R仍然可以用于15 Gy以内的辐射事故的剂量估算.
