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  • 乙型肝炎疫苗细胞免疫应答检测用参考品的制备和初步应用研究

    作者:胡忠玉;方鑫;何鹏;邱少辉;梁争论;李河民

    目的 通过研究重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫小鼠诱导细胞免疫应答的特点,制备一批细胞免疫应答检测用参考品,规范乙型肝炎疫苗细胞免疫实验条件和操作. 方法 背部皮下分别免疫小鼠(BALB/c,H-2d)0.5、1、2、4 和 8 μg的 HBsAg,于免后 7 d,检测小鼠脾单个核细胞(MNC)体外刺激诱生 IFN-γ的水平.分别免疫小鼠 2、4 μg HBsAg,免后 7 d,检测MNC分泌 IFN-γ 水平.结果 1 μg组可检测小鼠 IFN-γ阳转;免疫剂量与 IFN-γ阳转率存在剂量效应关系(r=0.951,P=0.049),IFN-γ SFC 与免疫剂量也存在剂量效应关系(r=0.996,P=0.000).2μg HBsAg 组 IFN-γ阳转率在 50%~75% 之间;4 μg 组 IFN-γ阳转率均为 75%. 结论 制备一批乙肝疫苗细胞免疫参考品,用于规范疫苗诱导细胞免疫应答的方法 检测.

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