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芸豆植物凝集素对昆明白小鼠精子畸形的影响
目的 测定芸豆植物凝集素(PHA)对小鼠精子的影响.方法 实验小鼠腹腔注射1/3 LD50,1/10 LD50和1/30 LD50的芸豆PHA,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予环磷酰胺,剂量为40 mg/kg 体重.所有各组均按0.1 ml/只腹腔注射,每日一次,连续5 d.各组于首次给药后35 d和70 d取样制片观察.结果 给药后35 d和70 d取材,高、中、低剂量组分别与阴性对照组相比,小鼠精子畸形率无显著差异(P>0.05),与阳性对照组相比,有极显著差异(P<0.01).各剂量组之间相比,无显著性差异,即无剂量效应关系.结论 PHA并不引起小鼠精子畸形率升高.
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卵巢早衰实验动物模型的建立
目的探讨以透明带抗原建立自身免疫性卵巢早衰实验模型的方法.方法分别用合成的透明带的多肽片段、完全弗氏佐剂及三蒸水免疫实验组、佐剂对照组和空白对照组小鼠,并观察小鼠的性周期,用免疫荧光法检测小鼠外周血及卵巢中抗透明带抗体,在光镜及电镜下观察小鼠卵巢的组织学改变,观察小鼠的发病情况.结果实验组有70%小鼠表现为性周期紊乱,80%外周血、70%卵巢中出现抗透明带抗体,90%小鼠出现自身免疫性卵巢炎,均与对照组差异显著(P＜0.01).结论以透明带诱导自身免疫性卵巢早衰模型的发生率高,并且方法简单,是一种很好的实验方法.
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子宫内膜异位症子宫内膜及输卵管细胞对鼠胚胎发育的影响
目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜及输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响.方法 小鼠 2 细胞期胚胎202个与卵巢巧克力囊肿患者术中切除的子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养(实验组),314个与非卵巢巧克力囊肿患者子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养作为对照. 结果 体外培养72～96 h后,与对照组输卵管上皮细胞及子宫内膜共培养时有25.7%和26.2%的2细胞期胚胎发育到扩张期囊胚,与实验组输卵管上皮细胞共培养有25.9%发育到扩张期囊胚,二者无显著差异(P＞0.05),而子宫内膜仅为11.1%,二者有显著差异(P＜0.05). 结论 内异症患者的输卵管上皮细胞对鼠早期胚胎体外发育无影响;子宫内膜对胚胎发育有明显的抑制作用,这可能与内异症的生育率降低有关.
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醋酸铅对雄性小鼠生殖功能的毒性作用
目的探讨醋酸铅对雄性小鼠生殖功能的毒性作用. 方法不同浓度醋酸铅(1.5、6及24 mg/kg)腹腔注射4周龄雄性小鼠,共10次.50 d后与正常雌鼠合笼交配(1∶2),观察雌鼠受孕率、胚胎总数、异常胚胎数(率)、胎鼠重量;测定睾丸指数、附睾精子数量、精子活动率和精子畸形率. 结果对照组、醋酸铅各组合笼21 d,雌鼠受孕率和胚胎总数无显著差异(P>0.05).醋酸铅24 mg/kg组异常胚胎数(率)显著高于对照组和1.5 mg/kg组(P<0.05),胎鼠重量和雄鼠睾丸指数显著低于对照组(P<0.05).其他实验组异常胚胎率、胎鼠重量和雄鼠睾丸指数与对照组比较无显著性差异.各实验组附睾精子数显著低于对照组(P<0.05,P<0.005),附睾精子畸形率显著高于对照组(P<0.05,P<0.005),中、高浓度醋酸铅组附睾精子活动率显著低于对照组(P<0.05). 结论醋酸铅24 mg/kg处理雄鼠对睾丸、精子数量和质量、合笼雌鼠胚胎产生影响.1.5 及6 mg/kg只影响精子数量和质量而不影响生殖功能和子代.合笼雌鼠异常胚胎率增高和胎鼠重量下降可能与醋酸铅引起精子质量下降有关.
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胰岛素对小鼠早期胚胎体外发育的影响
目的探讨胰岛素对小鼠体内外来源早期胚胎体外发育的影响. 方法用添加不同浓度胰岛素和胰岛素+葡萄糖的CZB培养液对小鼠体内外来源胚胎进行体外培养,观察囊胚发育率和囊胚细胞数的变化. 结果小鼠2-细胞胚胎体外培养102 h后,0.05 μg/ml 胰岛素添加组扩张囊胚率、孵化囊胚率和囊胚细胞数均显著高于其他各浓度添加组.葡萄糖加入显著提高了这一效应.添加0.05 μg/ml 胰岛素和葡萄糖的CZB培养液同样显著提高体外受精(IVF)胚胎的孵化囊胚率和囊胚细胞数. 结论添加胰岛素和葡萄糖培养液对体内或IVF小鼠胚胎发育具有相同的促进作用.
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玻璃化冷冻小鼠胚胎对胎鼠及胎盘H19DMD甲基化状态的影响
目的 研究胚胎玻璃化冷冻对胎鼠及胎盘H19基因印记控制区(DMD)甲基化状态的影响. 方法 以正常生育期雌雄鼠合笼获得的14 d胎龄的胎鼠及胎盘为对照组；以促排卵、体外受精、体外培养及胚胎移植后获得14 d胎龄的胎鼠及胎盘作为体外受精组；冷冻组与体外受精组不同的是体外培养的胚胎经玻璃化冷冻复苏后再移植.对获得的胎鼠及胎盘提取基因组DNA,经亚硫酸盐变性后克隆测序分析H19 DMD的甲基化状态. 结果 体外受精组胎鼠H19 DMD区有甲基化丢失,胚胎冷冻组中丢失更严重；胎盘中也存在明显的甲基化丢失,但冷冻组与体外受精组相比无明显改变. 结论 本研究提示小鼠胚胎的玻璃化冷冻过程会加重体外操作等引起的植入后胎鼠H19 DMD甲基化丢失；对胎盘H19 DMD甲基化状态无明显影响.
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不同阶段小鼠囊胚玻璃化冷冻保存效果观察
目的 探讨合适玻璃化冷冻保存的小鼠囊胚发育阶段.方法 对575枚小鼠初级囊胚和577枚扩张囊胚分别采用六组玻璃化溶液进行玻璃化冷冻,比较不同阶段囊胚的冷冻保存效果.结果 各组初级囊胚存活率和孵出率均高于扩张囊胚.除ES35组外,各组初级囊胚存活率均显著高于扩张囊胚(P<0.05);EDS35、ESF20和EDSF20组的初级囊胚的孵出率均显著高于扩张囊胚(P<0.05).结论 初级囊胚较扩张囊胚更适合玻璃化冷冻保存.
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冷冻平衡液及保护剂的不同组合对小鼠未成熟卵母细胞OPS法冷冻效果的影响
超低温冷冻保存小鼠卵母细胞的研究开始于20世纪50年代,此后研究者对各种动物的卵母细胞冷冻保存进行了探索,但其效果远不及胚胎冷冻水平.自从1998年Vajta等[1]发明了OPS法(open pulled straw, OPS)成功地冷冻保存了牛卵母细胞和囊胚以来,OPS法已成功地应用于小鼠成熟卵母细胞[2]、原核胚[3]、2-cell胚[4]等的冷冻保存,认为该冷冻方法是一种比较理想的玻璃化冷冻法.本实验采用改良的OPS法,以解冻后形态正常率和成熟率为判定指标,探讨冷冻溶液的不同组合、两种渗透性抗冻保护剂的配比对小鼠未成熟卵母细胞冻后生存性的影响,以期为人类卵母细胞玻璃化冷冻提供有效的动物模型试验.
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单个胚胎、精子或细胞的保存与寄送
鉴于当今仅一个细胞即可进行聚合酶链反应(PCR)分析研究[1-4];动物或少精症患者也可通过单个精子或生精细胞用于胞质内精子注射(ICSI)获得妊娠和胎儿出生[5.6];将小鼠的精子保存在70%的乙醇中1 d[7]或将小鼠的精子经冷冻处理后再进行ICSI也可完成受精并获得后代[8-9].因此,在某些情况下贮存或发送单个胚胎、精子或细胞供进一步的研究、分析及治疗是必要的.为此,我们采用拉长的细玻璃毛细管进行了胚胎、部分分割的半透明带、单个及数个精子和体细胞贮存在玻璃毛细管中邮寄到千里之外的实验.
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小鼠卵母细胞透明带膨胀辅助去核方法的研究
目的探讨新的小鼠卵母细胞透明带膨胀(ZPD)辅助去核法的可靠性.方法本实验用ZPD辅助去核法与其他常用方法对小鼠卵母细胞进行去核操作,比较其去核操作效率.结果ZPD辅助去核方法显著提高去核操作后卵母细胞存活率,减少去核操作时间,经卵丘颗粒细胞核移植构建重构胚胎,激活后原核形成率达62.8%,经体外培养可发育至4细胞期.结论ZPD辅助去核方法是一种适用于小鼠卵母细胞操作的快速、简单、实用的去核方法.
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亚慢性钐染毒小鼠睾丸某些生化和组织学变化
我国稀土储量十分丰富,占世界稀土资源总储备量的80%.随着稀土在工业、农业和医药卫生等领域应用的日益扩展,稀土元素正广泛进入环境,并通过食物链等进入人体[1].尽管人体本身含有微量的稀土,但由于其具有蓄积性,人体长期摄入稀土后的安全性问题值得关注.有研究表明,稀土在动物体内脏器和组织间呈不均匀的分布[2],在睾丸中残留量较高,对睾酮分泌有一定的抑制作用并使精子畸形率增高.但迄今人们关于稀土对睾丸组织结构和抗氧化能力的影响研究很少.本研究通过观察亚慢性染毒硝酸钐后小鼠睾丸结构的改变、主要器官的绝对重量和脏器系数及丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)的变化,旨在为进一步揭示稀土元素对雄性生殖性腺的毒性作用及稀土农用的安全性评价提供科学依据.
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二甲苯对小鼠染毒后肝肾某些形态学变化
二甲苯无色,有芳香气味,具有挥发性,主要用作建筑材料、装饰材料及人造板家具的溶剂和粘合剂,工业用途广泛,具有广泛的生物学毒性.主要危害是影响中枢神经系统,并伴有头痛、头晕和恶心,影响造血机能,可引起血液系统的疾病,是白血病诱病因子,它被世界卫生组织确认为有毒致癌物质[1].
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TOSC法在测定Cr6+对小鼠总抗氧化能力影响方面的应用
Cr6+化合物既是一种诱变剂,又是一种致癌物质[1,2],有关Cr6+诱导的氧化应激变化是备受关注的热点.有体内外实验结果显示,铬酸盐能导致特征性的氧化损伤[3],其中铬的氧化作用是这种损伤的关键所在[4].其中强氧化性的Cr6+是各价铬化合物中损伤作用严重的[5,6],而且是多脏器损伤[7].本实验采用了Winston等[8]建立的一种以气相色谱为检测手段的总氧自由基清除能力检测法(total oxyradical scavenhing capacity assay,TOSCA).该方法不但具有操作简单、反应灵敏和结果直观等特点,重要的是它还考虑了任何可与氧自由基结合的物质所发挥的作用,有全面反映机体氧化防御系统能力的优势.本实验室已有研究证实该方法可作为一项有潜在应用价值的生物标志物用于化学物对生物造成的氧化损伤的评价[9-11].本实验旨在探讨Cr6+在24 h内对小鼠不同脏器总体抗氧化能力影响的时间和剂量-效应关系.
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齐螨素油膏对小鼠急性毒性和致畸性
1 材料与方法1.1 受试物齐螨素油膏,体积分数为5.5%,褐色粘稠膏状物,某农药厂生产,以食用植物油配制成不同浓度混悬液.1.2 实验动物昆明种小鼠,由天津市医学实验动物开发中心提供,实验前观察1周.饲养室温度22～25 ℃,自然光照.
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天门冬水提液对D-半乳糖致小鼠衰老过程中脏器显微结构改变的影响
目的 探讨天门冬水提液对D-半乳糖致小鼠衰老过程中脏器显微结构改变的影响.方法 采用D-半乳糖诱导小鼠衰老,60只小鼠随机分为6组,分别为生理盐水对照组、衰老模型组、Vc对照组、天门冬水提液高、中、低剂量组,分别皮下注射或灌胃,给药30 d后,取其心、肝、脾、肺、肾、胰、脑等主要脏器石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色观察显微结构.结果 正常对照组和Vc组器官形态正常,结构清晰;模型组脏器均出现不同程度的损伤;天门冬给药组的小鼠,随给药浓度的增加,心肌纤维结构由模糊到清晰,由扭曲缩短变成舒展;脾脏淋巴细胞数量显著增加,排列紧密;肺泡隔逐渐恢复正常,肺泡囊结构逐渐完整;胰岛细胞数量由少到多,结构渐清晰;肝、肾细胞结构逐渐恢复正常;脑部海马CA3区神经细胞逐渐增加.结论 天门冬水提液在D-半乳糖诱导小鼠衰老过程中对内脏器官损伤程度均有一定抑制作用,且随给药剂量增加抑制作用增强,但不同器官抑制效果不同,效果明显的是脾和肺,其次是心和胰.
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火龙果排铅功能的试验研究
目的 通过铅中毒小鼠口服火龙果观察火龙果是否具有排铅作用.方法 选用18～ 22 g SPF雌性昆明种小鼠50只,随机分成阴性对照组、模型对照组和高、中、低剂量火龙果受试物组共5组,每组10只.采用自由饮用醋酸铅水溶液建立铅中毒小鼠实验模型,连续灌胃给药45d.摘眼球采集血液,断颈处死动物,取肝脏、骨骼用原子吸收法测定铅含量.结果火龙果可增加铅中毒小鼠铅的排出量,降低血液、骨骼和肝脏中的铅含量,结果 提示火龙果对铅中毒小鼠有促进排铅作用.结论 火龙果的排铅效果是由火龙果所含的营养成分(维生素、果胶、鞣酸、微量元素等)与铅作用的结果.
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空气负离子对小鼠血液学生化指标和血乳酸的影响
目的 观察负离子发生器产生的空气负离子对小鼠血液生化指标和血乳酸的影响.方法 每天连续给小鼠使用负离子发生器4h,分别连续接触负离子7、14和30 d后,测定小鼠的血液生化指标和运动后的血乳酸浓度.结果 负离子发生器产生的空气负离子对血液中的白细胞、血小板等无影响,对小鼠的各项生化指标无影响;而每日接触负离子4h,连续30 d,对红细胞数量和血红蛋白含量都有明显的提高,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);每天接触空气负离子4h,连续接触7d可使运动后动物血乳酸曲线下面积明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 负离子发生器释放的空气负离子可以通过改善红细胞数量、血红蛋白含量提高机体的携氧能力,也可以减缓血乳酸的堆积.
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仔鼠出生后早期虫螨威染毒对成年期的学习记忆影响
目的 观察仔鼠出生后早期虫螨威染毒对仔鼠成年后的学习记忆能力的影响.方法 将出生后的小鼠随机分为4组,于P2开始腹腔注射虫螨威,3个实验组分别注射不同剂量的虫螨威(0.01、0.1和1 mg/kg),同时设溶剂对照DMSO,于P60成年期进行水迷宫实验测定小鼠的学习与记忆能力.结果 在水迷宫实验中,随着小鼠染毒剂量的增加,小鼠登台潜伏期逐渐延长.撤去平台后,小鼠在平台所在象限游泳的时间逐渐缩短,60 s内穿越平台次数也逐渐减少.结论 出生后早期接触虫螨威能够造成子代小鼠成年后的学习与记忆障碍.
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赤霉素GA3对小鼠不同组织器官氧化应激指标的影响
目的 研究赤霉素GA<,3>对小鼠脾脏、肝脏和心脏组织是否发生氧化应激.方法 赤霉素GA<,3>在较低剂量(197、394和788 mg/kg)暴露条件下,观察赤霉素GA<,3>对小鼠各脏器的氧化应激指标.结果 染毒后各组间体质量无显著性差别;染毒高剂量组肝体系数显著低于溶剂对照组(P<0.05);染毒组脾、心体系数无显著性差别.394和788 mg/kg剂量组脾脏SOD、GSH-Px活性有所下降,与对照组相比,分别降低了21.01%,29.02%和23.36%,35.03%;肝脏SOD、GSH-Px活性分别降低了9.01%.13.05%和12.81%,16.17%,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).同时赤霉素GA<,3>处理后MDA含量显著升高,394,788 mg/kg剂量处理组脾脏和肝脏分别升高了19.06%,23.61%和22.33%,26.39%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).另外,心脏的的相关指标与对照组相比差异无统计学意义.结论 赤霉素对小鼠不同组织器官的氧化应激表现不同,对肝脏、脾脏有氧化应激作用,对心脏作用不明显.
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金银花菌子实体对小鼠免疫功能调节作用的实验研究
目的 探讨金银花菌子实体对ICR正常小鼠的免疫调节作用.方法 240只ICR小鼠随机分为4组,每组60只,设置溶剂对照组,低、中和高剂量组(1.25、2.50和7.50 ml/kg·bw).灌胃金银花菌子实体提取液30 d后,通过测定小鼠T淋巴细胞转化能力、迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素、巨噬细胞吞噬活性及NK细胞活性来评价金银花菌子实体对免疫功能的影响.结果 金银花菌子实体各剂量组能明显增强小鼠迟发型变态反应,中高剂量组抗体生成细胞数和巨噬细胞吞噬活性,高剂量组提高T淋巴细胞转化能力和NK细胞活性.结论 金银花菌子实体能增强ICR小鼠的免疫功能.
