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20例血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的临床、病理及预后分析
目的:探讨血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的临床、病理及预后特征,关注相关的诊断措施和鉴别诊断,以期为临床的诊断及治疗提供理论支持.方法:收集我院确诊的20例血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的患者,关注临床资料、光镜、免疫组化及原位杂交的特征,并进行整理.结果:患者主要症状为全身淋巴结肿大、发热等全身症状,组织学表现为淋巴结结构破坏、免疫母细胞增生、树枝状血管增生.免疫表型为成熟外周T细胞性,19例CXCL-13弥漫阳性,原位杂交显示EBER少量较大细胞阳性.患者血清中乳酸脱氢酶、白细胞介素-6和白细胞介素-12的含量明显高于正常值.结论:血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤是一种相对少见的淋巴瘤,临床应注意诊断要点,同时注意与淋巴结反应性增生、非特殊性周围T细胞淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤相鉴别,免疫组化在该肿瘤的诊断和鉴别诊断中具有重要作用.
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系统性红斑狼疮26例IL-10及IL-12的异常表达及其相互作用
目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者白细胞介素(IL)-10、IL-12异常表达的相互关系,探讨IL-10对IL-12分泌的影响.方法:取26例SLE患者及正常对照18例志愿者的外周血(PBMCs),用ELISA法测定其血清、单个核细胞(PBMCs)培养上清、植物血凝素(PHA)刺激培养上清中IL-10、IL-12水平;在SLE患者及正常对照PBMCs中分别加入正常人血清、SLE血清、SLE血清+IL-10抗体,PHA刺激培养24 h,用ELISA法测培养上清中IL-12的水平.结果:SLE患者血清、PBMCs培养上清中自发产生和PHA刺激诱生的IL-10及IL-12P40水平均异常增高.然而仅血清IL-10水平与SLEDAI呈正相关,但血清IL-12P40水平、PBMCs培养上清自发产生的及PHA刺激诱生的IL-12P40水平均与SLEDAI呈正相关.尽管SLE患者血清IL-10水平与IL-12P40血清及PBMCs培养上清水平呈正相关,但体外实验时,在PBMCs培养中,加入SLE血清,可显著抑制IL-12的产生,采用IL-10抗体中和掉SLE血清中的IL-10后,正常人或SLE患者的PBMCs培养上清中IL-12可明显增多.结论:SLE患者IL-10及IL-12表达水平异常增高,且血清水平与SLE活动性正相关;体外细胞培养实验中SLE血清中IL-10可明显抑制IL-12的分泌,但在细胞因子网络环境中两者之间相互作用更为复杂.
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雷公藤多甙和白细胞介素-1 0对人树突状细胞表面人类白细胞抗原-DR和CD80表达及白细胞介素-12 p40转录和分泌的影响
目的:研究雷公藤多甙和IL-10对人树突状细胞(DC)表面人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)和CD80表达及IL-1 2 p40转录和分泌的影响.方法:通过粒细胞-巨噬细胞型集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)体外培养体系,从人外周血单个核细胞中获得DC,细胞表面HLA-DR和CD80表达采用流式细胞仪分析,IL-12 p40转录和分泌分别采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和ELISA法.结果:雷公藤多甙(5～20μg/m1)、IL-10(50～200 ng/ml)能下调DC表面HLA-DR和CD80的表达,同时雷公藤多甙、IL-10能抑制DC内IL-12 p40 mRNA的转录和分泌.结论:雷公藤多甙、IL-10能通过抑制表面分子的表达和细胞因子的合成而干扰DC的成熟和功能.
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IL-12p35 siRNA干涉对大鼠髓源性树突状细胞表面分子表达的影响
目的:研究IL-12p35 siRNA干涉对大鼠髓源性树突状细胞(DC)免疫功能的影响.方法:通过粒细胞-巨噬细胞型集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和脂多糖(LPS)体外培养体系,从大鼠骨髓中获得DC,化学合成小型干扰RNA(siRNA),体外转染DC.检测IL-12p35转录采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术.DC细胞表面分子CD80、CD40和MHCⅡ表达采用流式细胞仪分析.结果:IL-12p35 siRNA转染后的DC表面分子CD80和MHCⅡ表达无明显改变,而CD40表达明显下降.结论:IL-12p35 siRNA的转染不能干扰DC的成熟,但可以抑制其免疫应答功能.
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黄芪多糖诱导的树突状细胞疫苗对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用研究
目的 探讨经黄芪多糖诱导的树突状细胞疫苗对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及机制.方法 小鼠骨髓来源的树突状细胞体外培养,以黄芪多糖诱导成熟,用S180肿瘤抗原致敏,获得树突状细胞肿瘤疫苗.S180荷瘤小鼠分成模型组(生理盐水0.2 mL/只)、环磷酰胺组(50 mg/kg/只)、黄芪多糖组(黄芪多糖诱导的树突状细胞2×105/只)、细胞因子组(TNF-α诱导的树突状细胞2×105/只),于荷瘤第5天和第10天给予相应治疗.荷瘤第12天,用ELISA法检测小鼠血清IL-12、TNF-α的水平;处死小鼠,剥瘤称瘤质量,计算抑瘤率.另外4组小鼠经相应治疗后观察生存时间.结果 黄芪多糖组的抑瘤率与生命延长率均显著高于环磷酰胺组和模型组(P＜0.05),与细胞因子组无显著性差异(P＞0.05).黄芪多糖组小鼠血清IL-12、TNF-α水平高于环磷酰胺组和模型组(P＜0.05),与细胞因子组无显著性差异(P＞0.05).结论 黄芪多糖诱导的树突状细胞肿瘤疫苗在荷瘤小鼠体内可有效发挥抑瘤作用,延长荷瘤小鼠生命,其机制可能与促进荷瘤小鼠产生抗肿瘤细胞因子IL-12、TNF-α有关.
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糖皮质激素对哮喘患儿IL-12,IL-13和IgE水平的影响
目的:观察哮喘患儿血清中IL-12、IL-13和IgE水平的变化及糖皮质激素对其的影响.方法:采用ELISA法检测哮喘急性发作期患儿及口服强的松1周后、健康对照组血清中IL-12、IL-13和IgE水平.结果:哮喘组患儿IL-12的水平急性发作期较治疗后和健康对照组低(P<0.05).IL-13水平急性发作期较治疗后和健康对照组高(P<0.05),IeE的水平急性发作期较治疗后和健康对照组高(P<0.05).结论:哮喘的患儿血清中IL-12水平下降,IL-13和IgE水平升高.糖皮质激素可使IL-13水平下降,IL-12水平升高.
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白介素-2对胃癌术后患者免疫功能影响
目的:通过观察胃癌术后病人白介素 -2(IL-2)治疗过程中外周血淋巴细胞表型、血清白介素-2受体(SIL-2R)和血清白介素- 12(IL-12)水平的变化, 对胃癌术后患者的免疫机能的影响进行评价.方法:胃癌术后患者64例随机分成两组:一组给予IL-2,另一组为对照组.用药前、后分别行IL-12和SIL-2R测定以及用流式细胞仪测定淋巴细胞的表型.结果:用药后血清IL-12及CD4+、 CD8+ 、CD56+比用药前明显升高(P<0.05).而SIL-2R明显下降(P <0.05).结论:应用IL-2治疗胃癌术后患者,其细胞免疫机能明显改善.
关键词： 胃癌 免疫 白细胞介素-2 白细胞介素-12 血清白细胞 介素-2受体 -
鱼腥草蒸馏液对大鼠变态反应性鼻炎的影响
目的 观察不同剂量的鱼腥草蒸馏液灌胃对大鼠变态反应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的影响.方法 采用卵清蛋白(ovallbumin,OVA)致敏建立大鼠AR模型,40只雌性SD大鼠随机分为对照组、AR组、小剂量鱼腥草组、中剂量鱼腥草组和大剂量鱼腥草组.观察不同剂量的鱼腥草蒸馏液干预对大鼠AR的影响.结果 中剂量和大剂量鱼腥草蒸馏液能减轻AR大鼠搔鼻和喷嚏次数,降低血清IgE含量,增加血清白细胞介素-12(IL-12)的含量,减轻大鼠AR时鼻黏膜损害.结论 中剂量和大剂量鱼腥草蒸馏液对大鼠AR具有保护作用,以中等剂量效果佳;这种保护作用是通过减轻大鼠鼻黏膜损伤,下调血清IgE含量,增加血清IL-12的含量而实现的.
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小鼠白细胞介素-12基因在乳酸乳球菌中的表达
目的 在乳酸乳球菌中表达小鼠白细胞介素-12基因.方法 用Nsi Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-IL-12质粒后,与经同样酶切的含有乳链杆菌肽A(nisA)启动子的pSEC-E7质粒连接,从而构建成pSEC-IL-12质粒;经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养.用乳链杆菌肽(nisin)诱导白细胞介素-12表达,SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物;用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-12的量.结果 建立了白细胞介素-12乳酸菌基因表达系统.在nisin的诱导下,NZ9000能够产生并分泌白细胞介素-12约80 ng/L.结论 乳酸乳球菌能够表达一定数量的小鼠白细胞介素-12.
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乙型病毒性肝炎患者外周血T辅助细胞1、2型细胞因子含量的测定及临床意义
目的探讨Th1、Th2细胞因子在乙型肝炎发病中的作用.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测10例急性乙肝患者、35例慢性乙肝患者及12例正常对照者外周血单个核细胞(PBMC)在植物凝血素(PHA)和脂多糖(LPS)刺激下,产生白细胞介素-10(IL-10),γ-干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-12(IL-12)的水平.结果①所有患者在PBMC培养上清液中,3种细胞因子的水平均显著高于正常对照(P均<0.05);与慢性乙肝组相比,急性乙肝组IL-10较低(P<0.01),而IFN-γ、IL-12较高(P<0.05),慢性乙肝轻、中、重度3组间呈现重度>中度>轻度,但是差异无显著性(P均>0.05).②IL-12、IFN-γ水平与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBIL)呈正相关(r=0.6、0.7,P均<0.01;r=0.6、0.6,P均<0.05);而与病毒含量呈负相关(r=-0.75、-0.73,P均<0.05);IL-10与ALT、TBIL无相关性(r=0.03、0.05,P均>0.05).③Th2/Th1比值:与正常相比,慢性患者较高,急性患者较低,差异均有显著性(P<0.05);急性患者明显低于慢性患者(P<0.05);慢性轻度组高于慢性中、重度组(P<0.05),而后二组间无明显差别(P>0.1).结论 Th2细胞因子与HBV感染的慢性化有关,当Th1型细胞因子占优势时,则倾向于发生急性自限性乙型肝炎,Th1细胞因子与肝组织的炎症活动相关,并且有利于病毒清除.
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乙型肝炎肝组织中IL-12表达与干扰素疗效的关系
目的研究慢性乙型肝炎肝组织中白细胞介素-12(IL-12)的表达与干扰素(IFN)疗效的关系.方法用免疫组织化学方法检测肝组织中IL-12.结果干扰素治疗有效组(14例)与无效组(8例)之间肝组织中IL-12的表达量之间差异有显著意义(H＝59,P＜0.05).结论 IL-12有助于临床IFN-α治疗乙型肝炎的决策.
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白细胞介素-12抑制肿瘤血管生成的研究进展
白细胞介素-12(IL-12)可诱导干扰素-γ(INF-γ)的产生,上调干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、单核因子(MIG)、组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等血管生成抑制因子,下调血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶(MMP)等血管生成诱导因子,协同抑制肿瘤新生血管的形成,促进肿瘤消退.IL-12可以不依赖免疫系统而发挥抑制肿瘤血管生成的作用.
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小鼠肠癌RNA转染mIL-12修饰的树突细胞诱发特异性细胞毒性T淋巴细胞的研究
目的:研究小鼠结肠癌细胞CT-26 RNA体外转染mIL-12基因修饰的树突细胞(DC),观察其诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)能力. 方法:小鼠骨髓细胞体外经rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取DC,流式细胞仪检测其纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染DC;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染mIL-12基因修饰的DC;ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12,LDH释放法检测小鼠体内特异性CTL活性. 结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的DC,流式细胞仪检测CD11c+的DC＞90%;携带mIL-12基因重组腺病毒转染的DC细胞高表达mIL-12;CT-26细胞总RNA体外转染mIL-12基因修饰的DC后,回输小鼠,能明显提高小鼠体内mIL-12的水平,并可诱导体内生成较高水平的CTL活性,而以该RNA转染Ad-LacZ修饰DC后的对照组及RNA转染DC的对照组,可诱导机体生成中等水平的特异性CTL活性,DC、PBS对照组则均无此作用. 结论:小鼠肠癌CT-26细胞总RNA转染mIL-12基因修饰的DC后,免疫接种小鼠,可提高小鼠体内mIL-12的水平,并能有效诱导机体产生较高水平的特异性CTL活性.
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mIL-12基因转染J558肿瘤细胞疫苗的抗瘤实验研究
目的探讨mIL-12基因转染的肿瘤细胞疫苗的抗肿瘤作用.方法将鼠源性mIL-12基因转染J558细胞制备工程瘤细胞后免疫20只BALB/c小鼠,另选20只小鼠为对照组,用ELISA法测定J558/mIL-12瘤细胞培养上清液及对照组中mIL-12水平.经工程瘤细胞免疫的小鼠淋巴结细胞与J558肿瘤细胞共同培养后用ELISA法测定其上清液中mIFN-γ水平.用J558瘤细胞攻击免疫小鼠及对照组小鼠以观察其存活情况.结果J558/mIL-12瘤细胞培养上清液中mIL-12水平显著高于对照组(895.2±28.4 vs 6.64±1.53 pg/ml,P=0.000);免疫小鼠淋巴结细胞与肿瘤细胞共同培养后上清液mIFN-γ水平显著高于对照组(997.61±116.36 vs 6.36±1.27pg/ml,P=0.000);CTL细胞毒实验证实免疫小鼠CTL杀伤J558肿瘤细胞为特异性杀伤;特异性肿瘤保护试验显示该型瘤苗具有良好的抗瘤作用.结论mIL-12基因转染的J558肿瘤细胞疫苗具有良好的抗瘤作用.
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防喘膏防治哮喘大鼠的疗效及其对血清IL-12、IL-13水平的影响
目的：观察防喘膏防治哮喘大鼠的疗效及其对血清白细胞介素（IL）-12、13水平的影响。方法将麻黄、大黄、白芥子、地龙、细辛、甘遂六味药按比例研成末，以生姜汁调和成膏状，敷贴于哮喘大鼠背部穴位；再以卵清白蛋白（OVA）激发哮喘，观察引发大鼠哮喘的潜伏期；末次雾化吸入卵清白蛋白后，采用ELISH法测定大鼠血清IL-12、IL-13水平。结果与哮喘模型组比较，防喘膏敷贴能延长哮喘大鼠的哮喘潜伏期（P<0.01）；与正常对照组比较，哮喘模型组大鼠血清IL-12水平降低（P<0.01），IL-13水平升高（P<0.01）；与哮喘模型组比较，防喘膏敷贴组及辅舒酮气雾剂组IL-12水平均升高（P<0.01），IL-13水平均降低（P<0.01）；防喘膏敷贴组及辅舒酮气雾剂组IL-12、IL-13水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论防喘膏穴位敷贴能延长哮喘大鼠的哮喘潜伏期，降低哮喘大鼠血清IL-13水平，提高IL-12水平可能是其作用机制之一。
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鼠白细胞介素-12质粒联合小剂量环磷酰胺对荷瘤小鼠NK及巨噬细胞功能的影响
目的探讨联合应用鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒(pCmIL-12)和小剂量环磷酰胺(CTX)治疗小鼠黑色素瘤的效果以及对NK和巨噬细胞功能的影响.方法荷瘤小鼠经肌注pCmIL-12和皮下注射CTX后,观察肿瘤大小,测定小鼠NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及NO释放量.结果肿瘤重量、NK和巨噬细胞杀伤活性及NO释放量的结果提示pCmIL-12与CTX合用具有交互(协同)作用.结论联合应用pCmIL-12质粒和小剂量环磷酰胺有较明显的抑瘤作用,并可增强荷瘤小鼠NK及巨噬细胞的功能.
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IL-12的研究新进展
白细胞介素12(IL-12)，又称细胞毒淋巴细胞成熟因子(cytotoxic Iymphoctyto maturation factor,CLMF)或称自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulation factor,NKSF)。后由perusssia和cately等分别完成和公布，后来统一命名为IL-12。它是白细胞家族中的较新成员，是近年来被纯化和鉴定的一种新细胞因子。
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乙型肝炎疫苗联合卡介苗素在无或弱应答人群中的免疫效果
目的:探讨乙型肝炎疫苗联合卡介苗素(BCG)在首次接种乙型肝炎疫苗后无或弱应答人群中的免疫效果,寻找一种提高乙型肝炎免疫成功率的方法.方法:放免法定量检测我院产科出生的婴儿按0、1、6方案(每次10 μg)标准全程接种重组乙型肝炎疫苗后乙肝表面抗体的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT),筛选无或弱应答者(GMT<100 U/L)60例,随机分为两组,每组各30例,按0、1、6方案进行再免疫,其中一组同时肌内注射卡介苗素,检测复种前后血清中白细胞介素 -12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)的浓度以及乙肝表面抗体的GMT.结果:注射卡介苗素能诱导无或弱应答婴儿产生较高水平的IL -12、IL-10,并呈剂量依赖性;卡介苗素注射组的抗体应答水平较对照组高,两者差异有显著性( P<0.01).结论:卡介苗素能有效诱导无或弱应答婴儿机体产生细胞因子IL -12、IL-10,可以提高接种乙型肝炎疫苗应答率,卡介苗素有望作为一种较好的乙型肝炎疫苗佐剂.
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冠心病患者血清TNF-α、IL-1、IL-8、IL-12的表达及临床意义
目的 检测冠心病患者血清TNF-α、IL-1、IL-8及IL-12的表达情况,探讨其表达与冠心病不同类型及不同病变程度的关系.方法选取确诊的95例冠心病患者作为观察组,另择同期体检健康成人50例作为对照组,采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-1、IL-8及IL-12的含量,观察其在不同疾病类型、不同数量血管病变及不同狭窄程度患者中的表达情况.结果观察组患者血清TNF-α、IL-1、IL-8及IL-12的表达均显著高于对照组(P＜0.01).不同类型(稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死)、不同数量(单支、双支、三支)血管病变以及不同血管狭窄程度(＜80%、80%～90%、＞90%)患者血清TNF-α、IL-1、IL-8及IL-12的表达不同,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 TNF-α、IL-1、IL-8及IL-12在冠心病患者血清中高表达,且与冠心病患者病变程度相关.
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布地奈德雾化吸入对轻中度支气管哮喘患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响
目的 探讨雾化吸入布地奈德对轻中度支气管哮喘患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响.方法 49例轻中度支气管哮喘患者随机分为对照组(25例)和治疗组(24例).两组均予吸氧、抗感染、静脉氨茶碱及对症治疗等.治疗组加用布地奈德混悬液氧气雾化吸入.分别采用ELISA法检测两组哮喘患者治疗前、治疗两周后及健康体检者外周血浆白细胞介素-5(interleukin-5)和IL-12水平;同时测定两组哮喘患者治疗前后的FEV1.结果 两组哮喘患者治疗前后血浆IL-5水平明显高于健康体检组,而IL-12水平则明显低于健康体检组,均P＜0.05;治疗后两哮喘组IL-5、IL-12水平与治疗前比较,均P＜0.01,治疗组与对照组治疗后比较IL-5、IL-12亦均差异显著;无论是治疗前还是治疗后,两组哮喘患者血浆IL-5与IL-12均呈明显的直线副相关.结论 Th1/Th2的失衡与哮喘发病密切相关;布地奈德雾化吸入可通过调节Th1/Th2的平衡而治疗哮喘.
