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纳米银抗菌医用敷料创面外用后纳米银在体内的分布
背景:纳米银以小尺寸效应、量子效应和极大的比表面积优势,传统银制品抗菌效果更为突出,有关其进入体内后产生的负面生物效应或不良反应尚不明确.目的:观察创面外用纳米银敷料后纳米银在兔体内的分布变化.方法:将新西兰白兔以抽签法随机分为正常对照组(创面自然愈合)、单次敷料组(又分为6小组)、多次敷料组(分为6小组).均于兔双耳腹侧制作创面,次敷料组单次使用纳米银敷料外敷,更换敷料;多次敷料组多次使用纳米银敷料外敷,6小组分别于0 d,d,d和4 d,d和4 d,d和4 d,d和4 d更换敷料.于创面制作后2,,7,4,0,0 d检测兔血、肝、肾、脾中银浓度.结果与结论:应用纳米银敷料2d后,次敷料组、多次敷料组血液、肝、肾、脾中银浓度均明显高于正常对照组(P < 0.01).应用第4天,次敷料组、多次敷料组各脏器银浓度仍明显高于正常对照组(P < 0.01),多次敷料组各脏器银浓度随时间呈进行性上升趋势,单次敷料组各脏器银浓度呈进行性下降,种变化在第7天时更为明显,次敷料组各脏器银浓度显著高于单次敷料组(P < 0.01).移除纳米银敷料后,次敷料组、多次敷料组各脏器银含量均较前一时间点银浓度显著降低,以多次敷料组更为明显(P < 0.01).制作创面后第30,0天,次敷料组、多次敷料组各脏器银浓度与正常对照组已无差异(P > 0.05).说明纳米银敷料用于创伤创面时能迅速入血,过血液循环分布于肝、肾、脾等脏器;移除敷料后,、肝、肾、脾中纳米银含量迅速下降至正常值,会产生累积现象.
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3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响
背景:3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能.目的:体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响.方法:将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态.结果与结论:在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组(2D培养组)(P < 0.05);扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长.表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期.
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人转铁蛋白修饰载阿霉素海藻酸钠纳米粒的制备与评价
背景:对抗肿瘤药物靶向治疗和肿瘤细胞多药耐药产生的问题,载阿霉素海藻酸钠纳米粒经改性,偶联人转铁蛋白,生成的人转铁蛋白修饰载药纳米粒,可用于靶向肿瘤药物载体.目的:制备人转铁蛋白修饰的载阿霉素海藻酸钠纳米粒并进行表征鉴定,检测其表面蛋白活性.方法:采用优化的微乳化-离子交联方法制备包覆阿霉素的海藻酸钠复合纳米粒,以水溶性碳二亚胺为交联剂,将载阿霉素海藻酸钠纳米粒与人转铁蛋白连接,制备出人转铁蛋白修饰载阿霉素海藻酸钠纳米粒.透射电镜观察纳米粒的外观大小、形态;高效液相色谱法分析纳米粒的包封率和载药量;流式细胞仪检测其表面人转铁蛋白的活性.结果与结论:人转铁蛋白修饰载阿霉素海藻酸钠纳米粒呈球形,平均粒径为170 nm.阿霉素的加入量可影响纳米粒的包封率,当阿霉素的加入量为纳米粒的10%时,包封率和包裹量均佳.每毫克载药纳米粒可与约65 μg人转铁蛋白连接.人转铁蛋白修饰的载药纳米粒在流式细胞仪上除去非特异性吸附后还有67 3%荧光显示,说明人转铁蛋白修饰的载药纳米粒大部分都偶联上了人转铁蛋白抗体并能保持抗体活性,从而为载药纳米粒特异性靶向肿瘤细胞提供了足够的靶向动力.微乳化-离子交联方法制备方法简便可靠,制得的人转铁蛋白修饰载阿霉素海藻酸钠纳米粒有望成为具有潜在价值的一种特异性靶向药物载体.
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近红外照射下金纳米链及Anti-EGFR/Au共轭物对人喉癌Hep-2细胞的抑制
背景:金纳米颗粒在近红外激光照射下对肿瘤细胞具有杀伤效应.目的:评价金纳米链及anti-EGFR/Au共轭物近红外照射对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制和热杀伤作用.方法:取对数生长期的Hep-2细胞,随机分为空白对照组、单纯照射组、金纳米链照射组和anti-EGFR/Au照射组,加入不同培养液后,各照射组进行近红外激光照射.观察照射后细胞凋亡情况和凋亡程度.结果与结论:倒置显微镜下观察显示空白对照组和单纯照射组Hep-2细胞仍具有活性,金纳米链照射组有明显的损伤,但anti-EGFR/Au照射组损伤程度更重.流式细胞分析显示金纳米链照射组及anti-EGFR/Au靶向照射组均有不同程度的Hep-2细胞凋亡,且照射时间越长,凋亡细胞越多.说明金纳米链近红外照射可以杀伤人喉鳞癌Hep-2细胞,anti-EGFR/Au靶向照射比金纳米链照射效果更好,并呈现一定照射时间的依赖性.
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聚丁二炔纳米粒快速检测日本血吸虫
背景 采用PCR、ELISA、免疫荧光球法及基因芯片技术进行日本血吸虫的快速检测,需要数小时才能得到结果,并且对日本血吸虫有量的要求,还需配备专门人员、一定的仪器设备,故非常不适用于现场快速检验.目的 制备聚丁二炔纳米粒,并对日本血吸虫进行免疫检测.方法 采用超声分散法制备聚丁二炔纳米粒,并利用其检测日本血吸虫.结果 与结论 制备的聚丁二炔纳米粒粒径均匀,分布范围窄,结构稳定.取血吸虫感染兔血清稀释液滴入聚丁二炔免疫纳米粒稀释液中,溶液颜色由蓝变红,颜色变化约20 s 时,体系有70%~80%发生了颜色变化,在约2 min 体系颜色变化即基本完成.吸收光谱、透射电镜、激光粒径分布均显示,加入血吸虫感染兔血清后聚丁二炔免疫纳米粒变化很大.表明利用聚丁二炔免疫纳米粒比色检测日本血吸虫操作简便、快速.
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金纳米链与人喉癌Hep-2细胞共培养自由进出细胞的形式
背景 金纳米颗粒对肿瘤细胞具有杀伤效应.目的 观察金纳米链对人喉癌Hep-2 细胞增殖的影响.方法 首先运用葡萄糖体系合成法制备金纳米链溶胶,然后MTT 法检测不同终浓度(10%,25%,50%,75%,95%)金纳米链溶胶对人喉癌Hep-2 细胞增殖的影响,并通过电镜观察金纳米链进出Hep-2 细胞的过程.结果 与结论 金纳米链在75%和95%高浓度时对Hep-2 细胞增殖有一定的抑制,但并没有随着浓度的增加而加重,均属于一级范围,表明金纳米链对人喉癌Hep-2 细胞无毒性.金纳米链在与Hep-2 细胞共培养8 h 后即能以胞吞的方式进入细胞,48 h 后大部分出胞,能够自由进出细胞.
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乳酸-羟基乙酸共聚物缓控释微球的制备及突释成因与影响因素
背景:乳酸-羟基乙酸共聚物是一种生物可降解高分子材料,以乳酸-羟基乙酸共聚物为原料制备的载药微球和纳米粒既可提高药物的稳定性,又能实现缓释、控释和靶向释放.目的:分析乳酸-羟基乙酸共聚物缓控释微球的制备方法以及突释的成因、影响因素和改进方法.方法:应用计算机检索1990/2010中国期刊全文数据库和PubMed数据库与乳酸-羟基乙酸共聚物缓控释微球的制备及突释联系紧密的文章.结果与结论:目前乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球制备方法主要有单凝聚法、乳化-固化法、喷雾干燥法.造成其突释的原因首先是药物分子和聚合物分子之间的相互作用太弱,导致药物很容易从微球进入释放递质中,其次是在微球释放初期,药物从微球中的孔洞和缝隙中释放出来导致突释.影响突释程度的具体因素有乳酸-羟基乙酸共聚物的相对分子质量、浓度、微球载药量、主药理化性质、微球制备方法及制备参数等.虽然国内外对突释机制以及控制突释措施的研究都还处于初步阶段,通过对各影响因素加以适当优化与控制,可在一定程度上减少微球的突释率,突释问题应该能够得到解决和控制.
关键词： 乳酸-羟基乙酸共聚物 微球 制备 突释 生物材料与纳米技术 -
磁性四氧化三铁纳米颗粒作用于前成骨细胞的生物相容性
背景：将磁性纳米颗粒作为骨组织工程领域新兴材料并植入生物体时，其毒性机制基础研究及安全性评价就显得格外重要。
目的：探索磁性四氧化三铁纳米颗粒作用于前成骨细胞的生物相容性。
方法：将含有0，200，400，800 mg/L磁性四氧化三铁纳米颗粒的细胞培养液作用于小鼠前成骨细胞24 h后，采用碱性磷酸酶活性测试试剂盒、骨钙素酶联免疫试剂盒、CCK-8试剂盒、倒置显微镜、细胞骨架荧光染色法及实时荧光定量PCR，观察处理后小鼠前成骨细胞的碱性磷酸酶活性/总蛋白比值、骨钙素浓度、细胞增殖率、细胞形态和骨架改变、细胞凋亡以及自噬相关半胱氨酸蛋白酶3、LC3A、LC3B基因mRNA表达情况。
结果与结论：①磁性四氧化三铁纳米颗粒作用小鼠前成骨细胞24 h后，200 mg/L组与对照组(0 mg/L)相比，各项指标差异无显著性意义；②作用24 h后，400，800 mg/L组细胞内碱性磷酸酶活性/总蛋白比值、骨钙素浓度上升，细胞增殖率明显下降，细胞形态及骨架结构改变明显，LC3B基因转录水平升高，而半胱氨酸蛋白酶3、LC3A基因转录水平与对照组相比差异无显著性意义；③结果提示，高质量浓度的磁性四氧化三铁纳米颗粒作用于小鼠前成骨细胞24 h后，虽具有一定的促成骨作用，但同时可造成细胞毒性损伤，促进细胞自噬相关基因LC3B表达上调，影响细胞形态、骨架结构及细胞增殖率。 -
磁性碳纳米管载附5-氟尿嘧啶对结肠癌淋巴结转移的靶向抑制作用
背景:将碳纳米管制备成磁靶向药物载体后,在磁场作用下能更好地把药物运送至体内靶器官或靶组织.目的:观察磁性碳纳米管新化疗载体对结肠癌淋巴结转移的抑制效果.方法:MTT法检测5-氟尿嘧啶、磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶、磁性多壁碳纳米管(每种药物分别含0.000 3,0.003,0.03,0.3,3 g/L 5-氟尿嘧啶)对结肠癌SW480细胞的抑制作用.将含相同浓度5-氟尿嘧啶的5-氟尿嘧啶、磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶、磁性多壁碳纳米管分散液分别注入SD大鼠足垫皮下及结肠癌淋巴结转移裸鼠体内.结果与结论:体外各质量浓度的5-氟尿嘧啶和磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶对癌细胞的毒性存在剂量依赖性,相同5-氟尿嘧啶质量浓度时两者对体外SW480细胞的抑制作用无明显差异,说明磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶的主要药效成分为5-氟尿嘧啶.体内研究高效液相检测显示磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶能有效聚集在淋巴结,长时间持久释放,淋巴结浓集效果明显优于5-氟尿嘧啶(P < 0.05),且不良反应小,肉眼容易辨识,细胞穿透性好;TUNNEL检测见磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶化疗后结肠癌淋巴结转移灶细胞有明显凋亡现象,在磁场作用下效果更显著.说明磁性多壁碳纳米管-5-氟尿嘧啶对结肠癌SW480细胞淋巴结转移有明显抑制作用.
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聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯载生长因子的缓释纳米微球
背景：骨形态发生蛋白2可增加软骨细胞和祖细胞基质的产生，可增强组织金属蛋白酶抑制因子1、sox9基因、Ⅱ型胶原以及聚集蛋白聚糖的表达，具有诱导间充质细胞迁徙、增殖、分化，终促使软骨、骨形成的作用。目的：制备重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球缓释系统，观察微球生长因子形态和粒径分布、载药量、包封率、体外缓释时间及生物活性。
方法：采用复乳-干燥法制备重组人骨形成蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统，体外分离培养猪软骨细胞。实验分为3组：第1组培养液不添加药物做为对照；第2组培养液中添加含20μg/L重组人骨形态发生蛋白2；第3组培养液中添加20μg/L重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球；其中在第2组和第3组又将重组人骨形态发生蛋白2和重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球分别设为55，100μg/L两种的有效浓度，采用MTT法检测微球对软骨细胞增殖的影响，模拟体内条件观察纳米微球的体外缓释性及生物活性。
结果与结论：该纳米微球表面光滑圆整，球体大小均匀，粒径为231-415 nm，扫描电镜平均粒径323 nm。微球的包封率和载药量分别为(79.63±0.16)%和(1.92±0.16)%。根据15 d内对重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球的体外释药的观察，保持持续释放重组人骨形态发生蛋白2，且释放的浓度呈增长水平。该微球缓释系统有生物活性，能显著促进猪软骨细胞的增殖，其效应高于单纯重组人骨形态发生蛋白2的效应。提示重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球缓释系统包封率、载药量、体外释药性以及生物活性符合纳米微球的一般规律，能够满足相应的软骨缺损修复要求。
