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单细胞凝胶电泳技术在军事毒理学中的应用
由Ostling和Jonhanson首先提出,后又经Singh和Olive建立和改进的单细胞凝胶电泳(Single Cell Gel Electrophoresis,简称SCGE)技术,因其细胞电泳形状颇似慧星,又称慧星试验(Comet Assay).它是一种测定和研究单个细胞DNA链断裂的新电泳技术,与传统方法相比,其简便、快速、灵敏、样品量少、无需放射性标记,具有极高的实用价值.
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Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤
目的:研究Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤作用.方法:用Isogoniotriol衍生物处理体外培养白血病K562细胞,MTT法测定IC5o,应用单细胞凝胶电泳(sCGE)检测细胞核DNA的损伤.结果:Isogoniotriol衍生物处理K562细胞IC50为4×10-5mol/L,不同浓度的Isogoniotriol衍生物处理细胞后可见彗星状拖尾.结论:Isogoniotriol衍生物可造成肿瘤细胞DNA损伤,抑制肿瘤细胞生长.
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硒、维生素E和C联合拮抗X射线致DNA损伤作用
目的 探讨硒、维生素E(VE)和维生素C(VC)对经X射线照射后的细胞抗氧化损伤作用.方法 利用碱性单细胞凝胶电泳法(彗星实验),观察面积和尾长2个指标,并进行分组设计,分析3种抗氧化剂硒、VE和VC不同水平的抗氧化作用以及二者或三者之间的交互作用.结果 硒、VE和VC单因素作用下,不同水平的彗星平均面积和尾长间差异均有统计学意义(P<0.0001),硒与VC的交互作用差异有统计学意义(P<0.05).结论 硒、VE和VC分别可以拮抗因射线而产生的DNA损伤作用,其作用随浓度的增加而加强;硒与VC之间存在拮抗DNA损伤的协同交互作用.
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杀菌剂粉唑醇遗传毒性试验研究
目的 探讨杀虫剂粉唑醇的遗传毒性.方法 应用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、慧星试验研究粉唑醇的遗传毒性.结果 Ames试验中,TA97、TA98、TA100和TA102 4个标准菌株无论代谢活化或非代谢活化,皆为阴性结果;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,与阴性对照组比较,差异无统计学意义;慧星试验中各评价指标与溶剂对照组比较差异无统计学意义.慧星试验剂量80 mg/(kg·bw)时,尾部DNA含量与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而其他评价指标与溶剂对照组比较差异无统计学意义.Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、慧星试验试验结果均为阴性.结果 在本次实验条件下,粉唑醇无遗传毒性.
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甘氨酸-钼锗酸盐体内抑瘤效应及机理研究
目的:观察甘氨酸-钼锗酸盐体内抑瘤效应及其抑瘤机理.方法:建立荷MGC-803小鼠模型,灌药物10 d,MTT法测定抑瘤率;MTT法测定MGc-803小鼠淋巴细胞转化功能及NK细胞活性;通过荧光染色观察BGC-823细胞凋亡形态及慧星细胞形成.结果:甘氨酸-钼锗酸盐显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(P＜0.05);显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的转化功能及NK细胞活性(P＜0.05);诱导肿瘤细胞发生凋亡及破坏肿瘤细胞DNA.结论:甘氨酸-钼锗酸盐可通过提高机体免疫细胞活性、诱导肿瘤细胞凋亡及破坏肿瘤细胞DNA来抑制肿瘤细胞生长.
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单细胞凝胶电泳在电离辐射DNA损伤中的应用研究
单细胞凝胶电泳检测(single cell gel electrophoresis, SCGE),又称彗星试验(comet assay, CA),于1984年由OSTLING等人首创,1988年后经SINGN等人[1]改进与完善.我国于20世纪90年代中期开始应用该方法进行检测与研究.目前SCGE在检测由理、化及环境生物等因素所致的DNA损伤方面与以往常用的检测DNA损伤方法(如染色体分析、微核分析、双核微核分析及姐妹染色单体互换等)相比,具有方法简便、快捷、灵敏等优点[2,3],能反映单个有核细胞的DNA损伤情况,近几年来已被广泛用于放射生物学领域DNA损伤与修复等方面的检测.
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适用于彗星试验的神经细胞分离方法研究
单细胞凝胶电泳试验(SCGE),又称慧星试验(comet assay),是近年来发展起来的一种高效、快速、形象化、灵敏度很高的检测哺乳动物细胞DNA损伤的新技术[1～3],它突破了传统短期测试在许多领域的局限性,而且该方法更适合于测定DNA单链断裂损伤,故在检测化学物质致突变性方面有其独特之处.该试验方法的优点之一是可以检测体内各种组织器官的DNA损伤作用,包括过去很少开展的神经细胞的遗传损伤研究.
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用彗星试验研究低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后DNA损伤的影响
目的研究低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA损伤的影响.方法采用中性单细胞凝胶电泳检测低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA双链断裂的情况.观察了尾长、彗星长、头DNA%、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩等指标的变化.结果2.0 Gy局部放疗前6 h接受5 cGy低剂量全身照射并连续5d组,其尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩均较单纯局部放疗组明显减小,各项指标差异均有显著性(P＜0.01).结论局部放疗前荷瘤鼠预先接受低剂量全身照射能减轻荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA损伤.
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硫辛酸对细胞DNA损伤保护作用的初步研究
目的:用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究不同浓度过氧化氢(H2O2)分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系,同时观察硫辛酸对H2O2损伤细胞DNA的保护作用. 方法: 将细胞分为对照组、损伤组和保护组,依次加入不同浓度的H2O2及硫辛酸,应用SCGE检测H2O2引起细胞DNA损伤. 结果: 随着H2O2浓度的增加,细胞DNA的损伤程度加重,能使尾长、尾部DNA百分含量和尾距显著增加(P《0.05). 硫辛酸能使H2O2损伤细胞的尾长、尾部DNA百分含量和尾距均较对照组减少(P《0.05). 结论: H2O2对细胞DNA损伤具有剂量效应关系,硫辛酸可以有效地减少H2O2引起的细胞DNA的断裂损伤.
