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利用噬菌体肽库筛选汉滩病毒受体结合表位的研究

吕欣;薛小平;杨乔欣;马文煜;尹文

摘要: 目的 确定汉滩病毒(HTNV)上可与宿主细胞受 体结合的一段配基表位. 方法 型特异性mAb 3G1,与HTNV 糖蛋白G 2及核蛋白(NP) 具有双结合活性,且中和效价很高. 以纯化的mAb 3G1作为配基,淘筛噬菌 体随机12肽库,经ELISA法鉴定后,对阳性克隆进行测序并与天然病毒蛋白G2及NP的序列进 行同源性比较分析. 结果 经3轮筛选,噬菌体显示有良好的富集效 果. 从第3轮筛选产物中,随机挑取21个克隆进行ELISA结合实验. 结果显示, 9个克隆与mAb 3G1有较强的特异结合活性;DNA测序结果表明,具有保守性序列模式PX(1-2)HX (0-2)H. 该基序分别与G296YPWHTAKCHY105及NP 81PTGVEPGDHL KERS94相似. 结论 从噬菌体随机肽库中,筛选到能与 mAb 3G1特异性结合的一段短肽基序PX(1-2)HX(0-2)H, 其与HTNV G2部分氨 基酸的同源性较高, 可能是与宿主细胞受体结合的表位, 为进一步证实和研究HTNV的受体 奠定了基础.

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