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苯并[a]芘对原代培养大鼠神经元细胞损伤及Hsp70表达的影响

许国耀;郑金平;王春芳;李鹏飞;蔚洪恩

摘要: 目的 研究苯并[a]芘(B[a]P)对体外原代培养大鼠神经元细胞损伤及热休克蛋白70(HBpT0)表达的影响.方法 分离培养l -3 dSD大鼠皮层神经元细胞,不同剂量B[a]P+s9染毒处理24 ho光镜观察神经细胞的形态学变化,MTT法检测细胞活性,紫外分光光度法检测细胞培养液中LDH活力和MDA的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,碱性单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤情况,Western blot法检测细胞Hsp70的表达水平.结果 随着B[a]P剂量的增大,神经元细胞的轴突和树突的数量减少,长度缩短,部分细胞出现空泡化,细胞活力下降.培养液中LDH活力、MDA含量和细胞Olive尾距、细胞凋亡率均随B[a]P剂量增大而升高,0.5~10 μmol/L组与Oμmol/L组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).0.5~10 μmoL/L组神经细胞Hsp70表达水平随剂量增大而下降,显著低于0.1μmol/L组(P<0.05),10 μmol/L组显著低于0μmol/L组(P<0.05).相关分析显示,MDA与LDH、Olive尾距、细胞凋亡率呈显著正相关,与细胞活力、Hsp70表达水平呈显著负相关.HspT0表达水平与LDH、Olive尾距、细胞凋亡率呈显著负相关,与细胞活力(A值)呈显著正相关.LDH、Olive尾距与细胞凋亡率之间呈显著正相关.结论 B[a]P代谢产物可导致体外原代培养神经元细胞损伤和凋亡,抑制Hsp70表达.BEa]P抑制Hsp70表达可能与其神经毒性有关.

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