中国实验血液学杂志
Journal of Experimental Hematology 중국실험혈액학잡지
- 主管单位： 实验血液学杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 0.98
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-4423/R
- 国内刊号： 陈潮
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
慢性移植物抗宿主病的研究进展
慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植后晚期并发症中为常见的一种.该病严重影响移植的成功.本文综述cGVHD发病机制、诊断、预防和治疗的研究进展.
-
微柱凝胶间接抗球蛋白法筛选和鉴定不规则抗体
为了建立微柱凝胶间接抗球蛋白法筛选与鉴定不规则抗体的实验方法,探索采用血浆代替血清进行抗体筛选的可行性,采用多人份标准红细胞混合检测不规则抗体法,并与传统抗球蛋白法加木瓜蛋白酶两步法进行了对比;采用微柱凝胶间接抗球蛋白法对我院受血者抗凝标本进行抗体筛选.对筛检阳性的受血者首先采用微柱凝胶间接抗球蛋白法进行抗体鉴定,然后采用传统抗球蛋白法加木瓜蛋白酶两步法再次进行抗体鉴定.抗体鉴定所用的标准细胞均为11个标准细胞的单人份混悬液.研究结果显示,采用微柱凝胶间接抗球蛋白法混合标准细胞筛检5 000份受血者标本,共检出不规则抗体20例,阳性率为0.4%,其中抗-D 2例,抗-E 8例,抗-C 1例,抗-c 2例,抗-Mia 2例,抗-Jka 2例,抗-Lea 1例及抗-Fya 2例.采用传统抗球蛋白法检出了其中的19例,而木瓜蛋白酶法检出其中的13例.抗-Lea抗体经加入Le(a-b-)型人的补体后也检出.结论:微柱凝胶间接抗球蛋白法混合细胞筛检受血者不规则抗体可以取代传统抗人球加酶法在临床大批量推广应用,使用血浆进行抗体筛选比血清更具优越性.
-
冰冻干燥红细胞超微结构的分析
本研究的目的是探讨冰冻干燥红细胞在电镜下的形态变化.全血采自健康献血者,实验分为3组. 组1: 新鲜红细胞,4℃保存不超过24小时; 组2: 红细胞中加入终浓度为35%的甘油,-80℃保存24小时; 组3: 红细胞经过预处理,冰冻干燥16小时.对解冻红细胞或水化重悬冰冻干燥的红细胞进行计数,电镜下观察3组红细胞超微结构,并对电镜下红细胞平均直径、平均光密度及积分光密度进行图像分析.平均光密度及积分光密度代表细胞内血红蛋白的相对含量.结果表明,冰冻干燥后红细胞回收率为53%,红细胞具有圆盘状的结构.组1红细胞平均直径(μm)、平均光密度及积分光密度分别为4.7±0.4, 0.14±0.02, 1.58±0.46; 组2红细胞平均直径(μm)、平均光密度及积分光密度分别为4.6±0.7, 0.14±0.02, 2.35±0.64; 组3红细胞平均直径(μm)、平均光密度及积分光密度分别为4.4±0.4, 0.17±0.05和2.35±0.46.对电镜下红细胞平均直径、平均光密度及积分光密度数据进行统计学处理,三元方差分析的 Wilks′ Lambda 检验显示,组3与组2之间无显著差异,组3与组1相比较差异显著.结论:冰冻干燥红细胞具有相对完整的超微结构,平均直径及血红蛋白的含量与冰冻保存红细胞相似.
-
3种同种异基因混合骨髓移植小鼠(A+B+C→A)的模型
本研究目的为建立3种异基因小鼠(BALB/c, H-2d; C57BL/6, H-2b和CBA/N, H-2k)混合骨髓移植模型(A+B+C→A),观察此模型能否延长骨髓移植后受体鼠的存活时间.采用受致死量照射的小鼠接受同基因与2种异基因3种混合(比例为1∶4∶4)的骨髓移植.同时还观察了3种混合淋巴细胞培养及2种不同抗原混合刺激的迟发型超敏反应.结果显示,混合骨髓移植的小鼠存活时间明显长于单纯异基因移植的小鼠,混合移植组平均存活时间为56.6±27天,长者为103天,而单纯异基因移植的对照组存活时间为15±5天,两组比较有显著性差异(P<0.001);3种混合的淋巴细胞培养,不管是2种反应细胞与1种刺激细胞混合培养,还是1种反应细胞与2种刺激细胞混合培养,均表现明显低于一对一的混合淋巴细胞反应,2种混合细胞刺激的迟发型超敏反应亦明显低于1种抗原刺激的反应.结论:同基因与2种异基因3种混合的骨髓移植可使受髓小鼠存活时间明显延长.
-
异种骨髓移植移植物抗宿主反应的实验动物模型
为了观察大鼠和小鼠间异种骨髓移植中移植物抗宿主病(GVHD)的现象,建立动物模型.受体BALB/c小鼠接受8.5 Gy全身照射后,一组(n=10)输入SD大鼠骨髓细胞4×107,另一组(n=10)输入SD大鼠骨髓细胞4×107及脾细胞2×107,观察60天,记录受鼠发生GVHD情况.结果表明:单纯骨髓细胞输入组8只鼠存活超过60天,另2只鼠分别于18天和31天死亡,肝、小肠病理切片未见明显GVHD.而骨髓细胞及脾细胞输入组均于14天内死亡,肝、小肠病理切片证实有GVHD.结论:大、小鼠间异种全骨髓细胞移植未见明显GVHD,建立GVHD模型需要加入脾细胞.
-
抗人粒细胞单克隆抗体的研制和鉴定及其放射免疫显像
以人粒细胞常规免疫和融合BALB/c小鼠,建立一株稳定的高效价的抗人粒细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株SZ-102,并对其组织特异性进行鉴定及探讨在炎症模型显像中的潜在价值.结果表明,McAb SZ-102免疫球蛋白亚类为IgG1.流式细胞术测定显示其与外周血液中的粒细胞和单核细胞呈强阳性反应,而与淋巴细胞、红细胞和血小板不起反应,但与正常人骨髓中的较成熟的粒细胞、单核前体细胞发生反应.SP免疫组化法检测正常人组织切片中SZ-102抗原阳性细胞分布的结果显示,该抗原主要表达在肝、肺、脾、胸腺、淋巴结组织中的巨噬细胞表面.以亚氨基噻吩(2-IT)修饰,99Tcm标记葡庚糖酸钠(GH)配体交换法标记SZ-102.给具有左下肢炎症模型的家兔,由耳缘静脉注入99Tcm-抗人粒细胞单克隆抗体SZ-102进行SPECT显像,以99Tcm标记非特异性鼠IgG作为阴性对照,结果表明99Tcm-SZ-102在家兔炎症部位显像清晰,其佳显像时间为注射后2-4小时,而99Tcm标记非特异性鼠IgG在家兔炎症部位未能清晰显像.结论: 99Tcm-SZ-102具有活体内炎症定位导向能力,显像时间短,对隐匿性炎症疾病或肿瘤感染病灶的放射免疫显像诊断有一定的潜在临床价值.
-
寡核苷酸芯片用于HLA-B分型的初步研究
HLA基因具有复杂的多态性.本研究根据HLA-B基因序列的多态性,设计了一套寡核苷酸探针,并用基因芯片点样仪点样到醛基修饰的载玻片上,制成寡核苷酸芯片用于HLA-B基因的分型.本研究以克隆并已测序的HLA-B基因序列作为标准样品,经PCR分别扩增其具有多态性的第二和第三外显子,PCR扩增产物与芯片进行杂交,利用分析软件将杂交模式转变成为HLA-B基因型.结果表明,利用芯片进行分型的结果与标准样品序列结果完全符合.结论:寡核苷酸芯片用于HLA-B基因分型是一种简便、快捷和有前景的方法.
-
一组血液病患者血清GM-CSF水平的研究
为了探讨血液病患者体内粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)自分泌水平的变化,采用放射免疫法检测了36例慢性再生障碍性贫血(CAA),42例慢性粒细胞白血病(CML),54例急性髓系白血病(AML),31例急性淋巴细胞白血病(ALL),40例健康查体者血清GM-CSF水平.结果发现,慢性再生障碍性贫血患者血清GM-CSF水平显著增高,急性和慢性的白血病患者的血清GM-CSF水平显著降低.结论:急、慢性白血病和慢性再障患者体内GM-CSF自分泌水平有明显异常.
-
国产rhG-CSF治疗肿瘤化疗所致白细胞减少的临床分析
骨髓抑制引起白细胞减少是许多化疗药物的剂量限制性毒性之一.为评价国产rhG-CSF(粒生素)对肿瘤患者化疗所致白细胞减少症的疗效,对132例恶性肿瘤患者,其中包括肺癌80例,乳腺癌35例,鼻咽癌10例,恶性淋巴瘤3例(NHL ),胃癌2例,原因不明骨转移癌2例,在528周期的化疗中,针对不同程度白细胞减少,采用不同剂量粒生素治疗,于化疗结束后24小时至15天内复查血常规.结果表明,Ⅰ-Ⅱ度白细胞减少患者皮下注射粒生素75 μg/d×3天,Ⅲ度150 μg/d×4天,Ⅳ度300 μg/d×5天,使Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ度患者白细胞恢复到正常时间分别为2.5,4.2和7天,缩短了白细胞缺乏症的持续时间.结论:促进白细胞的恢复不仅可使肿瘤患者不发生因白细胞减少所致的发热、感染等并发症,还可使患者能够获得足够剂量强度的抗肿瘤药物,按期完成计划剂量强度治疗;粒生素无明显副作用,且疗效较好.
-
特发性血小板减少性紫癜病人外周血像及骨髓巨核细胞数与预后关系
为了探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)病人初诊时血像及骨髓涂片巨核细胞计数的预后价值,作者回顾性分析了229例ITP病人外周血白细胞计数、血小板计数、治疗过程中血小板上升速度及骨髓涂片巨核细胞计数与治疗结果之间的关系.结果显示,ITP病人初诊时外周血白细胞计数及血小板计数与疗效无关,治疗2周内血小板达到100×109/L以上的病人,其基本治愈率较高(94.9%);初诊时骨髓涂片巨核细胞计数越多,病人的预后越好,每单位涂片(1.5×3 cm)巨核细胞计数大于100个的病人治愈率达86.1%.结论:ITP病人初诊时进行骨髓检查,并计数巨核细胞数,对诊断及预后的判定均是必要的.在治疗过程中及时复查血像,观察血小板上升速度,对预后的判定亦有重要价值.
-
恶性血液病伴发侵袭性肺曲霉病3例诊治分析
侵袭性肺曲霉病诊断困难,病情凶险,死亡率高.本文对合并有侵袭性肺曲霉病的3例恶性血液病(2例急性白血病和1例MDS-RA)患者的诊治过程进行了回顾性分析.3例患者均有免疫力低下的病史,虽经过预防性抗真菌治疗,仍发生了肺曲霉菌感染,经过痰培养确诊后采用脂质体两性霉素B,伊曲康唑和氟胞嘧啶联合治疗.结果表明,联合治疗7-14天后,3例中2例痊愈,1例显效.结论:对侵袭性肺曲霉病的早期诊治很关键,脂质体两性霉素B,伊曲康唑和氟胞嘧啶联合治疗起效快,效果好.
-
周期蛋白A在白血病细胞中表达意义的临床与实验研究
不断增殖是肿瘤的基本特征.一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成.细胞周期蛋白A(cyclin A)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白(cyclin),其异常高表达参与了肿瘤的形成.为了探讨cyclin A异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系,采用流式细胞仪胞浆内间接免疫荧光/DNA双染色法半定量分析了急性白血病患者、门诊修回骨髓穿刺的患者、健康献血者这三种不同来源的外周血或骨髓标本细胞,以及白血病细胞系(HL-60) cyclin A表达水平.为了进一步研究cyclin A在白血病细胞增殖中的作用,用在体内、体外均有抗肿瘤作用的六亚甲基二乙酰胺(HMBA)在体外抑制白血病细胞系HL-60增殖,并诱导其分化.增殖抑制效应采用四唑盐还原试验和细胞周期分析来检测.细胞表面分化抗原CD33、CD11b改变来检测分化.结果发现,两组来自白血病标本的细胞S期cyclin A (即急性白血病患者外周血或骨髓幼稚细胞和白血病细胞系)表达阳性率要远远高于另两组(门诊骨髓穿刺的患者骨髓细胞和健康献血员外周血细胞);在HMBA抗肿瘤细胞系HL-60增殖实验中发现随药物剂量的加大,增殖抑制和分化程度呈剂量依赖性;同时,胞内cyclin A蛋白表达水平被明显下调了,也呈剂量依赖性.结论:白血病细胞S期cyclin A异常高表达,HMBA能下调 S期cyclin A表达水平,且随着胞内S期cyclin A表达下调,细胞增殖被抑制和分化程度亦不断加深,两者均呈剂量依赖性,这证明了下调cyclin A表达是HMBA抗白血病细胞系增殖的主要机理,同时提示cyclin A的异常高表达参与了白血病恶性增殖的环节.
-
间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征20q-染色体异常
为了探讨间期荧光原位杂交(FISH)技术在检测骨髓增生异常综合征(MDS)20号染色体长臂部分缺失异常中的价值,应用绿色荧光素SpectrumGreen直接标记的酵母人工染色体(YAC)克隆912C3(跨越20号染色体长臂q12断裂点)作为探针,对52例MDS患者和5名正常对照者的骨髓细胞进行单色间期FISH检测,每例分析200-300个细胞,以1个绿色荧光杂交信号>7.16%作为阳性标准,并与常规细胞遗传学(conventional cytogenetics, CC)检测结果相比较. 结果显示,52例MDS患者中FISH检测7例(13.5%)为阳性,CC检测其中4例为阳性,3例为阴性.结论: YAC912C3为探针的间期FISH技术是检测MDS患者20q-染色体异常的有效方法,是CC检测的一个重要补充.
-
bcr/abl融合转录子阳性的B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型特点
为探讨B细胞型急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中bcr/abl融合转录子阳性白血病细胞的生物学特征,用流式细胞术检测26例bcr/abl阳性及32例bcr/abl阴性B-ALL病例的免疫表型,用PCR法检测免疫球蛋白重链(IgH)基因重排.结果表明:所有的病例均为CD19阳性.bcr/abl阳性与bcr/abl阴性B-ALL表面分子有显著统计学差异(P<0.05)的是CD34(96.2%与65.6%),CD10(96.2%与71.8%)及CD38(43.8%与95.4%).在26例bcr/abl阳性病例中,原始细胞共表达CD10+/CD19+/CD34+,CD10+/CD34+/HLA-DR+和CD10+/CD34+/CD38-分别为92.3%(24/26),73.1%(19/26)和56.2%(9/16).对bcr/abl阳性组的17例进行了IgH基因重排检测,10例阳性(58.8%).14例bcr/abl阴性组中12例(85.7%)阳性.在32例bcr/abl阴性病例中,原始细胞共表达CD10+/CD19+/CD34+和CD10+/CD34+/HLA-DR+分别为43.8%(14/32)和37.5%(12/32),无1例表型为CD10+/CD34+/CD38-.结论: bcr/abl阳性B-ALL患者CD34和CD10阳性率较高,而CD38阳性率较低,且IgH基因重排检出率较低,其独特的免疫表型特征是CD10+/CD34+/CD38-.该研究结果提示该类型白血病细胞具有较早期的B系祖细胞免疫表型特点.
-
四色流式细胞术分析B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型
为了研究国人B细胞型急性淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型特点,使用了四色流式细胞术CD45/SSC设门分析181例B-ALL的免疫表型.研究结果发现,所有检测病例CD19阳性率100%,HLA-DR阳性率98.9%,CD38,CD10和CD34阳性率分别为88.5%,76.8%和76.8%,CD117与T系抗原CD2和CD7在B-ALL中很少表达.儿童组(≤14岁)CD10+比例较高,青少年(15-18岁)和成人组(≥19岁)髓系相关抗原CD13和(或)CD33表达较高.各年龄组CD10+/CD34+型比例高,随年龄增长CD10-/CD34+型比例升高.CD10-/CD34+型伴髓系抗原表达率明显高于其它亚型.与CD45+病例相比,CD45-或者CD45+/-病例常伴有较高的CD10表达.43例标本RT-PCR检测bcr/abl结果显示:bcr/abl+组和bcr/abl-组伴髓系抗原表达率无显著性差异,m-bcr/abl+主要见于CD10+/CD34+型.结论:典型的B-ALL细胞表达CD19和HLA-DR, 不表达CD117.不同发育阶段CD34, CD10和CD45表达不一.青少年组免疫表型与成人组相似.CD45+多见于CD10- B-ALL.儿童组髓系抗原表达率较低.m-bcr/abl+多见于CD10+/CD34+型B-ALL.
-
白血病中FHIT基因的异常表达和缺失
FHIT基因位于染色体3p14.2,实验室的研究证实FHIT基因具有抑癌基因活性.FHIT基因异常表达或表达缺失出现在多种实体肿瘤和造血系统恶性疾病.为了探讨白血病细胞中FHIT基因的异常表达及意义,采用巢式RT-PCR法对急性髓性白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性粒细胞白血病(CML)以及骨髓增生异常综合症(MDS)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、骨髓瘤(MM)等不同类型白血病患者FHIT基因转录本进行检测,并对FHIT基因转录本进行序列测定.98份血液系统恶性疾病患者的骨髓或外周血标本中AML 38例,ALL 16例,CML 34例,其它恶性血液病10例.全部患者经骨髓细胞形态检查,诊断符合FAB诊断标准.肝素抗凝骨髓或外周血2-3 ml, 分离单个核细胞,取5×107个细胞,用RTIZOL试剂一步法提取细胞总RNA,行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物. 回收目的片段,克隆到PGEM-T载体,进行序列测定.结果表明:在55/98(56%)的被检测病例有FHIT基因的异常表达,在AML、ALL和CML异常表达的发生率分别为22/38(58%),9/16(56%)和19/34(56%).正常骨髓或外周血标本未见有FHIT基因的异常表达.43/98(44%)的患者表达正常转录本(Ⅰ型),40/98(41%)的患者同时表达正常转录本和异常转录本(Ⅱ型),5/98(5%)(Ⅲ型) 的患者仅表达异常转录本,10/98(10%)的患者不表达任何转录本(Ⅳ型).对FHIT基因转录本进行序列分析发现,白血病时FHIT异常转录本存在不同程度的外显子缺失,包括缺失外显子4-8,5-8,5-6等.FHIT基因缺失与疾病预后具有一定的相关性.复发难治和早期死亡组患者较治疗有效组患者FHIT基因的异常表达率显著升高.结论:FHIT基因在血细胞中有表达,在白血病细胞中常有FHIT基因异常转录本表达或表达缺失,异常转录本与正常转录本共存的情况多见.异常转录本存在不同程度的外显子缺失,位于外显子5处的起始密码子的缺失导致异常转录本不能编码蛋白.在正常人骨髓和外周血标本中未见FHIT基因转录本缺失.FHIT基因缺失提示预后不良.
-
高三尖杉酯碱诱导HL-60细胞人端粒酶逆转录酶mRNA的变化
为了探讨高三尖杉酯碱(homoharringtonine, HHT)抑制HL-60细胞端粒酶活性的机制及意义,采用半定量RT-PCR和PCR-ELISA法检测HHT作用后的HL-60细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA表达和端粒酶活性的变化,用TUNEL法检测HL-60细胞的凋亡率.结果发现:与空白对照相比,0.005-0.03 μg/ml HHT作用HL-60细胞12小时,hTERT mRNA表达无明显变化,随HHT浓度增加至0.04-0.05 μg/ml,hTERT mRNA表达明显下降至检测不出.与0小时相比,0.02 μg/ml HHT 作用6-18小时后,HL-60细胞hTERT mRNA表达无明显变化,24小时后hTERT mRNA表达明显减少,至30小时未能检出hTERT mRNA表达.HL-60细胞端粒酶活性的抑制与hTERT mRNA的表达下降趋势基本一致.随HL-60细胞hTERT mRNA的表达下降和端粒酶活性的抑制,其凋亡率明显增加.结论:HHT能抑制HL-60细胞hTERT mRNA的转录,其与细胞凋亡的关系值得进一步研究.
-
TNF-α刺激的人脐静脉内皮细胞组织因子表达及其分子机制
为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激下组织因子(TF)的表达及其分子机制,用流式细胞术检测HUVEC膜表面TF蛋白的表达,用RT-PCR方法检测TF mRNA的表达和用Western印迹方法检测HUVEC核蛋白中核因子κB(NF-κB).结果发现,TNF-α能刺激HUVEC细胞膜表面TF表达增加,其增加与TF mRNA合成增加具有高度一致性,且TF表达的增高滞后于mRNA升高数小时之后;TF表达增加的同时伴有核蛋白(κB)显著的活化.结论:TNF-α刺激HUVEC后,迅速活化NF-κB,启动TF的转录,TF mRNA表达增加,TF蛋白合成增加,导致TF在HUVEC膜表面表达增加,激活凝血途径.
-
一种新型血小板生成素(TPO)模拟肽的合成及功能研究
为了获得具有与血小板生成素相似的生物学活性且没有其副作用的血小板生成素模拟肽,对一种从肽库中筛选到的血小板生成素模拟肽P1进行改构,运用多肽化学合成方法制备了模拟肽P2,然后进行P2与葡聚糖偶联以及自身氧化形成二聚体,利用MTT法测定其体外活性.结果表明:所获得的血小板生成素模拟肽P2的EC50值较P1提高了700倍,达到了20 nmol/L,P2与葡聚糖偶联产物D-P2以及P2的二聚体形式(P2)2的EC50值则分别为0.35 nmol/L和0.14 nmol/L.将模拟肽给小鼠皮下注射后检测其外周血指标,测定结果证实该肽可以显著提高血循环中血小板数量,且不影响其他血液学指标.结论:这种血小板生成素模拟肽在血小板减少性疾病的治疗方面具有潜在的应用前景.
-
骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞向造血分化
为观察骨髓内皮细胞条件培养液(BECM)和(或)细胞因子(VEGF+SCF+EPO)对小鼠胚胎干细胞(ESC-D3细胞)生成造血干/祖细胞的促进作用,先将ESC-D3细胞形成4天胚状体(Day 4 embryoid body, 4dEB),再诱导4dEBs生成造血干/祖细胞.实验分4组,第1,2和3组分别为BECM+VEGF+SCF+EPO,BECM和VEGF+SCF+EPO组,第4组为自发分化对照组.检测各组造血干/祖细胞特异抗原、造血转录因子表达以及造血集落的形成.结果显示,BECM和(或)细胞因子诱导生成的细胞均表达造血干/祖细胞抗原(c-kit, Sca-1, Thy-1和CD34)和造血转录因子(c-myb, SCL和β-H1)基因mRNA,培养后可产生HPP-CFC和BFU-E.从诱导ESC-D3细胞生成造血干/祖细胞的数量和生成的集落总数看,BECM联合细胞因子组诱导效率均显著高于单用组和对照组.结论:骨髓内皮细胞条件培养液能显著促进胚胎干细胞早期造血分化,且骨髓内皮细胞条件培养液与细胞因子联合时效果更强.
-
三七皂苷对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的增殖分化作用
为了探讨三七皂苷(PNS)对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的刺激增殖和诱导分化的作用,用Dynal M-450 CD34+免疫磁珠阳性选择法获取高纯度的人骨髓CD34+细胞,采用多向祖细胞(CFU-Mix)体外集落培养和流式细胞术检测细胞增殖与分化.结果显示:经免疫磁珠阳性选择,从骨髓细胞收获的CD34+细胞获得率为(1.03±0.74)%,流式细胞术分析纯度达到86%-93%.PNS 10 mg/L和25 mg/L能刺激CD34+细胞增殖,使CFU-Mix集落生成增加,25 mg/L的PNS 对CFU-Mix产率提高(34.7±16.0)%(P<0.01),是促进造血的适浓度;PNS 25,50和100 mg/L时,能诱导CD34+细胞向粒系细胞分化,粒系表面标记CD33+和CD15+的细胞百分比均明显高于无PNS的对照组,而红系细胞表面标记CD71+和G-A+细胞百分比则无明显变化.结论:PNS对CD34+造血干/祖细胞不但具有显著的刺激增殖作用,而且能够诱导其向粒系细胞定向分化的效应.
-
人骨髓间充质干细胞表达多种造血细胞因子
为了研究培养的人骨髓间充质干细胞在造血中的生物作用,采用RT-PCR方法在mRNA水平上分析体外培养的人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)造血因子的表达,以及氢化考的松对BM-MSC表达造血细胞因子的影响.结果显示,体外传代培养的正常人、白血病和淋巴瘤等血液病人BM-MSC均能表达SCF, Flt3-ligand TPO, LIF, IL-6和IL-11等重要的造血细胞因子,但不表达G-CSF, GM-CSF和IL-3.不同代数的BM-MSC细胞,造血细胞因子的表达相同.BM-MSC 经氢化考的松作用7-21天后,可诱导G-CSF mRNA表达,但不诱导GM-CSF的表达,细胞在形态学上也未发生明显改变.结论:体外培养的正常人和本组血液病病人BM-MSC具有促造血功能.
-
磁珠双阳性分选法在阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34+CD59+细胞体外扩增的应用
应用磁珠双阳性分选法在体外扩增阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的CD34+CD59+细胞,为实现PNH患者进行临床自体骨髓移植(ABMT)或自体外周血干细胞移植(APBSCT)奠定基础.流式细胞术分选虽然经常用于细胞纯化,但难于满足大规模临床细胞分选的需要.本研究利用免疫磁珠系统,应用隔夜孵育法去除第一次分选时CD34+细胞吸附的磁珠,经过两次磁珠双阳性分选,从PNH患者骨髓中分离出足够数量的CD34+CD59+细胞,用于体外培养扩增.结果显示:磁珠双阳性法分选的CD34+CD59+细胞与磁珠-流式细胞术二步分选法比较,在细胞生存、增殖、扩增及形成造血集落形成单位(CFU)的能力上均无显著性差异.结论:磁珠双阳性分选法可能推广应用于其它双阳性或多阳性细胞的分离纯化,尤其是造血干/祖细胞的分离纯化.
-
实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性
为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率,同时行实时PCR检测,对二者结果进行对比分析;利用线性扩增介导的PCR(LAM-PCR)技术和逆转录病毒5′LTR插入细胞基因组位点的分析,确定单细胞内基因转染的拷贝数.结果显示:①在低转染率的情况下(<36%)二者的结果相近,但是在高转染率情况下二者的结果差别明显; ②逆转录病毒载体介导的转染,在原代成肌细胞中为单拷贝基因导入基因组内.结论:实时PCR可以比较精确地估计体内病毒载体介导的基因转染效率;而在体外由于多为高转染率,不适合用此方法进行检测.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
