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周期蛋白A在白血病细胞中表达意义的临床与实验研究
不断增殖是肿瘤的基本特征.一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成.细胞周期蛋白A(cyclin A)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白(cyclin),其异常高表达参与了肿瘤的形成.为了探讨cyclin A异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系,采用流式细胞仪胞浆内间接免疫荧光/DNA双染色法半定量分析了急性白血病患者、门诊修回骨髓穿刺的患者、健康献血者这三种不同来源的外周血或骨髓标本细胞,以及白血病细胞系(HL-60) cyclin A表达水平.为了进一步研究cyclin A在白血病细胞增殖中的作用,用在体内、体外均有抗肿瘤作用的六亚甲基二乙酰胺(HMBA)在体外抑制白血病细胞系HL-60增殖,并诱导其分化.增殖抑制效应采用四唑盐还原试验和细胞周期分析来检测.细胞表面分化抗原CD33、CD11b改变来检测分化.结果发现,两组来自白血病标本的细胞S期cyclin A (即急性白血病患者外周血或骨髓幼稚细胞和白血病细胞系)表达阳性率要远远高于另两组(门诊骨髓穿刺的患者骨髓细胞和健康献血员外周血细胞);在HMBA抗肿瘤细胞系HL-60增殖实验中发现随药物剂量的加大,增殖抑制和分化程度呈剂量依赖性;同时,胞内cyclin A蛋白表达水平被明显下调了,也呈剂量依赖性.结论:白血病细胞S期cyclin A异常高表达,HMBA能下调 S期cyclin A表达水平,且随着胞内S期cyclin A表达下调,细胞增殖被抑制和分化程度亦不断加深,两者均呈剂量依赖性,这证明了下调cyclin A表达是HMBA抗白血病细胞系增殖的主要机理,同时提示cyclin A的异常高表达参与了白血病恶性增殖的环节.
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不同强度跑台运动对脑缺血大鼠学习记忆及细胞周期蛋白表达的影响
目的:探讨不同强度跑台运动预处理对脑缺血大鼠学习记忆及细胞周期蛋白表达的影响.方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(n=20)、模型组(n=20)、强度Ⅰ组(n=20)和强度Ⅱ组(n=20).造模前2周开始对强度Ⅰ和强度Ⅱ组大鼠进行跑台运动训练,其中强度Ⅰ组设置为20m/min*30min,强度Ⅱ组使大鼠运动强度递增,在3min内南10m/min的速度提高到预定的19.3m/min的速度,保持速度直到力竭.用四血管阻断法(Pulsinelli 4VO法)制备全脑缺血模型,分别在建模后3h、6h、24h、48h进行HE染色法观察各组大鼠脑组织神经元细胞形态的变化情况,免疫组织化学染色法检测各组大鼠脑组织海马区细胞周期蛋白A(CyclinA)和细胞周期蛋白E(CyclinE)的表达情况.建模后48h大鼠在处死前采用水迷宫检测各组大鼠学习记忆功能.结果:与正常组比较,其他三组神经元存活数日显著减少,逃避潜伏期明显延长,穿台次数明显减少,差异均有显著性意义(P＜0.05).其中,模型组神经元存活数目、穿台次数明显少于强度Ⅰ组(P＜0.05),显著高于强度Ⅱ组(P＜0.05),逃避潜伏期明显长于强度Ⅰ组(P＜0.05),显著短于强度Ⅱ组(P＜0.05).与正常组比较,模型组各时间点CyclinA、CyclinE的表达水平明显增加(P＜0.05).这两个因子的表达在模型组中多于强度Ⅰ组(P＜0.05),但明显少于强度Ⅱ组(P＜ 0.05).结论:中强度的跑台运动可保护脑组织,改善全脑缺血大鼠学习记忆功能,但高强度的运动会产生不良反应,可能与调控全脑缺血再灌注大鼠细胞周期蛋白的表达有关.
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大肠癌组织bFGF,PKB,Cyclin A的表达及其与临床的相关性
目的:研究大肠癌组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),蛋白激酶B(PKB)及细胞周期蛋白A(Cvclin A)mRNA的表达水平及与临床病理的关系.方法:采用TRIzol法分别提取60例大肠癌组织,癌旁组织和10例正常组织的RNA,应用RT-PCR方法检测bFGF,PKB,Cyclin A mRNA的表达水平,PCR产物经凝胶成像及分析系统扫描后,以β-actin为参照标化bFGF,PKB,Cvclin A的含量.通过统计学分析其与临床病理关系.结果:bFGF,PKB,Cyclin A在大肠癌组织中的表达与癌旁组织相比有显著差异(bFGF:60%vs 10%;PKB:55% vs 35%;CyclinA:70% vs 5%;all P＜0.05),其表达水平与大肠癌Dukes分期有关(bFGF:χ2=4.434,P＜0.05;PKB:χ2=13.549,P＜0.01;CyclinA:χ2=21.210,P＜0.01).PKB在低分化肿瘤中的表达阳性率高于中高分化肿瘤(14/14 vs 29/46,P＜0.05).Cyclin A的表达在高、中分化肿瘤中明显高于低分化肿瘤(37/46 vs 3/14,P＜0.05).结论:bFGF,PKB,Cyclin A的mRNA水平与大肠癌的发生、发展相关.
关键词： 大肠癌 碱性成纤维细胞生长因子 蛋白激酶B 细胞周期蛋白A 逆转录-聚合酶链反应 -
Cyclin A在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
目的:观察细胞周期因子Cyclin A在非小细胞肺癌(NSCLS)中的表达,探讨其临床意义.方法:采用免疫组化SP法,观察66例非小细胞肺癌患者及12例正常肺组织中细胞周期因子Cyclin A的表达,并对其与临床预后关系进行了相关分析.结果:在66例非小细胞肺癌病例中,Cyclin A表达阳性率分别为90.9%.Cyclin A与肿块大小、病理分级和TNM分期间显著相关,P<0.05,与年龄、性别、组织学类型及淋巴结转移间无显著相关,P>0.05.与阴性患者相比,Cyclin A阳性患者生存时间明显缩短,P＝0.006,估计增加相对风险为3.6;分析显示,Cyclin A给出佳预后诊断信息.LN/Cyclin A,P=0.001 2,两因子协同的预后判断价值优于佳单个因子.结论:Cyclin A过表达与非小细胞肺癌不良预后有关.
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主要细胞周期蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系
目的 研究主要细胞周期蛋白(cyclins)在胃癌细胞中非时相表达特征,探讨主要cyclins(cyclin D1、cyclin E、cyclin A和cyclin B1)表达与胃癌临床病理特征的关系.方法 采用流式细胞术双参数法半定量检测68例胃癌组织中cyclin D1、cyclin E、cyclin A和cyclin B1的表达,并结合患者的临床病理特征进行分析.结果 根据不同cyclins在细胞周期中的作用及其异常表达特征,胃癌细胞中主要cyclins表达可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型.根据细胞周期内cyclin E、cyclin A 和cyclin B1表达特征,Ⅱ型～Ⅳ型分为a亚型、b亚型、c亚型和d亚型.68例胃癌组织中,cycins Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型表达分别占10.3％ (7/68)、22.1％ (15/68)、25.0％ (17/68)、29.4％ (20/68)和13.2％(9/68).cyclins表达类型与胃癌浸润深度、淋巴结转移程度和TNM分期有关(P＜0.01).cyclinsⅠ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型表达的胃癌淋巴结转移率分别为26.6％、43.8％、82.3％、95.0％和100.0％,Ⅳ期患者所占比例分别为0、6.7％、17.6％、25.0％和55.6％,差异有统计学意义(P＜0.01).cyclins表达亚型与胃癌生长方式、细胞分化程度和Bormann分型相关(P＜0.01).结论 主要cyclins在胃癌的发生、发展及转移过程中有不同形式的异常表达,其不同表达形式与胃癌临床病理特征相关.
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微小RNA-519b-3p对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制
目的 探讨微小RNA-519b-3p(miR-519b-3p)对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响及其在喉癌发生发展过程中的作用及机制.方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞仪分别检测转染miR-519b-3p类似物前后Hep-2细胞生长和细胞周期的变化,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测细胞中相关基因和蛋白的表达.实时定量RT-PCR技术检测48对喉癌组织及癌旁组织中miR-519b-3p的表达水平.结果 喉癌组织中miR-519b-3p的表达水平明显低于癌旁组织(S△Ct=2.989,f =2.693,P＜0.01).miR-519b-3p类似物能显著抑制Hep-2细胞的增殖,使细胞周期被阻滞在G2/M期(10.29％±4.63％,(x)±s,t=4.395,P＜0.05),并明显减少S期细胞(7.56％±2.05％,t=3.555,P＜0.05),使细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin dependent kinase 1,CDKl)表达显著增加,而显著抑制CDK2和细胞周期蛋白A(Cyclin A)的表达.RT-PCR和Western blot结果显示,miR-519b-3p类似物在不影响HuR和环氧化酶-2(cyclooxgenase-2,COX-2)mRNA表达水平情况下,却明显下调其蛋白表达水平.结论 miR-519b-3p在喉癌组织中低表达,它可能作为抑癌因子通过翻译后抑制HuR和COX-2的表达而使细胞周期被阻滞在G2/M期,从而抑制细胞生长.
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细胞周期蛋白A正反义基因对人舌癌细胞增殖的影响
目的探讨细胞周期蛋白A(cyclin A)正、反义基因对人舌鳞状细胞癌(Tca8113)细胞系增殖的影响及调控，为肿瘤基因治疗提供新思路。方法通过脂质体介导的基因转染方法，将正、反义cyclin A基因分别导入Tca8113细胞系，观察转染和未转染细胞的生长情况、体内外增殖变化以及cyclin A和Ki-67蛋白的表达情况。结果转染反义cyclin A基因的细胞系，其细胞生长速度、DNA合成、细胞增殖及代谢能力均下降；而转染了正义cyclin A基因的细胞系则有相反结果。结论反义cyclin A能有效抑制靶基因的表达，使舌癌细胞恶性表型部分逆转。
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胰岛素对人肺腺癌细胞株A549影响的体外研究
目的:探讨用胰岛素提高人肺腺癌细胞A549生长代谢水平及其机制.方法:采用MTT比色法,分析胰岛素对肺腺癌A549细胞代谢的影响,用流式细胞仪作细胞周期分析,用Western Blot印迹方法检测细胞周期蛋白CyclinA和CyclinD1的表达情况.结果:胰岛素(2.0～32.0mU/mL)可促进人肺腺癌细胞A549的增殖(P＜0.05),细胞周期结果显示胰岛素(8mU/mL)可使S期细胞增多.Western Blot印迹方法检测结果显示胰岛素(8mU/mL)后CyclinD1的表达明显增强,CyclinA的表达变化不明显.结论:胰岛素能促进人肺腺癌细胞株A549增殖,并且其增殖作用是可逆的.胰岛素主要作用于人肺腺癌细胞株A549细胞的S期.CyclinD1的表达增强在胰岛素促增殖机制中起着重要作用.
关键词： 人肺腺癌细胞株A549 胰岛素 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白A -
细胞周期蛋白A在成人急性白血病中的表达及意义
目的探讨细胞周期蛋白A(cyclin A)在成人急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义.方法采用RT-PCR法对100例初治及复发的AL患者进行cyclin A mRNA水平的检测,对其阳性表达的PCR扩增产物进行DNA测序分析.对其中75例AL患者,用流式细胞术检测cyclin A蛋白表达水平,10例正常人作为对照.结果 (1)AL患者cyclin A蛋白表达在细胞周期中的分布无异常,cyclin A蛋白及mRNA的阳性率(分别为66.7%,59.0%)和中位表达水平(分别为18.5%,0.539±0.490)明显高于正常人,同一实验条件下未发现在正常人中有cyclin A蛋白及mRNA阳性表达(P<0.01);经测序分析发现cyclin A阳性扩增片段序列与基因库中的目标序列完全一致;(2)cyclin A蛋白及mRNA水平与S期、G2/M期细胞所占的比例呈正相关(P<0.01).(3)复发组急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者的cyclin A蛋白表达水平(15.4%)明显低于初治组(29.5%),差异有统计学意义(t=14.418,P=0.022).(4)cyclin A蛋白或mRNA高表达患者的完全缓解率(分别为87.9%、85.7%)明显高于低表达患者(分别为38.2%、53.3%)(P<0.05).结论 cyclin A在AL患者中是一种增殖标志,是影响AL患者完全缓解率的因素,其高表达可能是AL患者良好预后的指标之一.
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siRNA沉默细胞周期蛋白A2基因对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用
目的 研究siRNA对骨肉瘤MG-63细胞株及正常成纤维细胞细胞周期蛋白cyclin A2基因表达的抑制及对细胞增殖的影响.方法 设计并化学合成靶向cyclinA2基因的siRNA,用oligofectamine将其转染到骨肉瘤细胞系MG-63及正常人成纤维细胞(HSF)中,用无义siRNA转染作为阴性对照,以单加缓冲液磷酸盐缓冲液(PBS)作为空白对照,实时-聚合酶链反应(PCR)、Western印迹方法检测cyclinA2基因沉默效果,采用MTT、RT-PCR、流式细胞、平板克隆培养等方法评价cyclinA2基因表达后被抑制后细胞的生长状态,同时检测细胞PCNA及cyclinB1基因表达的改变.结果 1、10、50、100 nmol/L浓度的cyclinA2-siRNA分别使MG-63细胞cyclinA2基因表达降低了9.4%,56.4%,79.2%和84.3%,同时cyclinA2蛋白表达也相应降低.转染10 nmol/L及50 nmol/L siRNA后48 h,MG-63细胞增殖抑制分别达到39.1%及54.9%,细胞周期阻滞于G0/G1期,平板克隆形成率降低,细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)及cyclinB1的mRNA表达水平明显下降.对正常成纤维细胞HSF,50 nmol/L cyclinA2-siRNA可抑制58.1%的cyclinA2基因及蛋白表达,其导致细胞周期出现轻度改变,但细胞的增殖及平板克隆形成能力未受影响.结论 cyclinA2是肿瘤细胞增殖所依赖的关键基因,针对cyclinA2基因的siRNA能有效降低细胞中cyclinA2 mRNA及蛋白的表达,其能抑制骨肉瘤细胞的生长而对正常细胞的增殖影响很小,靶向cyclinA2的siRNA有望成为治疗骨肉瘤的新途径.
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细胞周期蛋白A对培养大鼠血管平滑肌细胞起始识别复合物1表达水平的影响
目的 探讨细胞周期蛋白A (Cyclin A)对培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)周期起始识别复合物1(ORC1)表达水平的影响.方法 采用组织块贴片法原代培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,利用双胸苷使VSMCs达到细胞周期同步化,应用逆转录聚合酶链反应技术和流式细胞仪检测不同细胞周期VSMCs的ORC1和Cyclin A mRNA和蛋白表达.结果 经鉴定培养的细胞为VSMCs,采用血清饥饿法、双胸苷阻断法和秋水仙素阻抑法分别获得了处于不同细胞周期的同步化的VSMCs:G0/G1期(89.22 ±3.54)％,G1/S交界期(66.74±7.16)％,S期(63.24±4.06)％,G2/M期(51.64±11.18)％,各期比较差异有统计学意义(P均＜0.01).Cyclin A在静止状态对VSMCs的ORC1 mRNA和蛋白无影响,在G2/M期达到高峰[(52.133 3 ±2.122 1)％],与G1/S期[(10.9167±0.531 1)％]、S期[(7.656 7±0.412 4)％]比较,差异有统计学意义(P均＜0.01).ORC1在G2/M期达到低值[(1.276 7 ±0.161 7)％],与G1/S期[(13.371 0±1.057 3)％]、S期[(3.043 3 ±0.538 0)％]比较,差异有统计学意义(P均＜0.01),可能原因是Cyclin A阻止ORC1结合在VSMCs染色质上.结论 CyclinA可能调控ORC1在VSMCs细胞周期的启动.
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脂质体转染细胞周期素A反义脱氧寡核苷酸对HL-60细胞增殖及凋亡的调控作用
目的探讨脂质体转染细胞周期素A(cyclin A)反义脱氧寡核苷酸(ASON)对HL-60细胞增殖及凋亡的影响.方法采用脂质体转染技术将cyclin A ASON与HL-60细胞共同培养,用MTT法绘制细胞生长曲线,用电镜、细胞原位凋亡检测(POD)等方法观察细胞凋亡,用流式细胞术(FACS)及RT-PCR法检测cyclin A、bcl-2表达,并通过裸鼠成瘤实验验证cyclin A在白血病发生中的作用.结果脂质体转染cyclin A ASON组和cyclin A ASON组的HL-60细胞生物抑制率分别为68.9%和24.8%(P<0.01).脂质体转染cyclin A ASON组cyclin A及bcl-2表达水平(1.1%和21.9%)较对照组(38.8%和65.0%)明显减低(P值均<0.01),并能检测出DNA断裂,观察到凋亡细胞.裸鼠实验中发现脂质体转染cyclin A ASON组与对照组相比,其成瘤率低,成瘤时间延长,同一时间成瘤的瘤体体积明显缩小.结论脂质体转染cyclin A ASON能在体外及动物体内明显抑制白血病细胞的生长,且有诱导细胞凋亡的作用,可能会成为基因治疗的一个新靶点.
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细胞周期蛋白A在儿童急性白血病患者中的表达及意义
目的 探讨细胞周期蛋白A(Cyclin A)在儿童急性白血病患者中的表达及临床意义.方法 应用Western blot方法检测47例初诊急性白血病(AL)患儿和33例非血液系统恶性疾病患儿(对照组)骨髓单个核细胞Cyclin A的表达.结果 47例AL患儿Cyclin A表达水平(0.38±0.20)显著高于对照组(0.03±0.15)(P<0.01);急性淋巴细胞白血病(ALL)高危组(HR-ALL)患儿Cyclin A表达水平(0.62±0.38)高于ALL标危组(SR-ALL)(0.33±0.33)(P<0.05);33例外周血WBC≥50 × 109/L患儿组和14例外周血WBC<50×109/L患儿组Cyclin A的表达水平分别为0.64±0.36和0.39±0.38,差异有统计学意义(P<0.05);Cyclin A表达阳性的18例患儿中8例完全缓解(CR),CR率44.4%,较阴性患儿CR率(100%)低(P<0.01).结论 Cyelin A参与儿童急性白血病的发生、发展.
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成人急性白血病患者细胞周期蛋白A基因表达与耐药的关系
目的探讨细胞周期蛋白A(cyclin A)基因在成人急性白血病(AL)患者中的表达以及与耐药的关系.方法采用半定量RT-PCR技术对32例多药耐药和32例化疗敏感的AL患者和20名正常人进行细胞周期蛋白 A、mdr1、TopoⅡα、bcl-2 mRNA水平的测定.结果耐药组患者细胞周期蛋白A及TopoⅡα mRNA的表达水平均明显低于敏感组患者(P<0.01),20名正常人在同一实验条件下未检出细胞周期蛋白A mRNA的表达; 耐药组患者mdrl及bcl-2 mRNA表达水平均明显高于敏感组(P<0.01);64例AL患者中,细胞周期蛋白A与TopoⅡα表达水平呈高度的正相关(r=0.794,P=0.000); 细胞周期蛋白A与TopoⅡα同时阳性低表达的10例AL患者全部耐药;经Binary逻辑回归分析显示细胞周期蛋白A与耐药显著相关.结论细胞周期蛋白A可能会成为判断AL患者预后的新指标,联合TopoⅡα检测对判断AL耐药有意义.
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CD44抗体对卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞增殖的抑制作用
目的:观察抗CD44单克隆抗体A3D8对卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞增殖的作用,并初步探讨其作用机制.方法:用MTS法检测A3D8及顺铂(DDP)对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪法观察A3D8对卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞细胞周期的影响;彗星电泳法检DNA损伤;通过westem blot法,进一步探讨A3D8作用于卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞后cDK2、cyclinA蛋白表达水平的变化.结果:A3D8作用于卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞后,细胞抑制作用明显增强(P<0.05),而且随着A3D8质量浓度的增加和时间的延长,抑制作用明显增强,与DDP联用,抑制率较单独用DDP增高;A3D8可将细胞周期阻滞于S期;A3D8作用于卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞24 h后可引起DNA损伤;A3D8组CDK2、cyclinA蛋白表达水平明显降低.结论:A3D8可能通过阻滞细胞周期发挥抑制卵巢癌实体瘤源球形体形成细胞增殖的作用.
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脑胶质瘤组织中的细胞周期分析与意义
目的:探讨脑胶质瘤组织中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Cyclin A、Cyclin B1和核分裂特异性抗体(PHH3)的表达特征及规律.方法:采用免疫组化S-P法检测Cyclin D1、CyclinA、Cyclin B1和PHH3在59例脑胶质瘤组织(Ⅰ级10例、Ⅱ级15例、Ⅲ级15例、Ⅳ级19例)和37例正常脑组织中的表达情况.结果:Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、 PHH3在正常脑组织中不表达.胶质瘤组织中Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的阳性表达率分别为69.5％、69.5％、62.7％和84.7％.4级脑胶质瘤中Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的阳性标记指数比较差异有统计学意义(P＜0.01).随着胶质瘤级别升高,Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的标记指数呈升高趋势.结论:通过免疫组织化学法分析细胞周期的数据有利于肿瘤分级,并与预后相关.
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Cyclin-A、cyclin-D1和cyclin-E在有HBV感染的HCC中的表达及其相关性研究
目的 探讨细胞周期A、D1、E在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达与有无HBV感染的HCC的相关性研究.方法 对64例HCC组织分别进行HE、HBV(HBsAg,HBcAg)、cyclin-A、cyclin-D1及cyclin-E的检测.结果 ①HCC组织学以小梁型、透明细胞型、腺泡型和实体型为主;②在HCC组织中,HBsAg阳性40例(40/64,62.5%),HBcAg阳性33例(33/64,51.56%);③cyclin-A在HCC组织中的表达率为40.63%(26/64).有HBV感染的HCC组织中的表达率为48.84%(21/43,P=0.083);④cyclin-D1在HCC组织中的表达率为34.78%(22/64),有HBV感染的HCC组中的表达率为44.19%(19/43,P=0.018);⑤cyclin-E在HCC组织中的表达率为18.75%(15/64),有HBV感染的HCC组织中表达率为27.91%(12/43,P=0.246).结论 HBV感染可延长G1期到S期的时间,促进肿瘤细胞的增殖.预防和抗HBV的感染,可降低或减少HCC的增殖能力.
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苦参碱对U937细胞周期调控蛋白的影响
目的:观察苦参碱对U937细胞内周期调控蛋白的影响.方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生长受抑情况,流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫细胞化学法及Western blot检测cyclin E、cyclin A 蛋白表达.结果:MTT检测显示苦参碱能显著抑制U937细胞增殖,其抑制作用呈时间和剂量依赖性;U937细胞受阻于S期,苦参碱作用后细胞内cyclin E及cyclin A表达显著下调.结论:苦参碱能减少细胞内cychn E及cyclin A蛋白的表达,从而抑制U937细胞增殖.
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朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物的抗血管生成作用
目的:本研究旨在证实朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物(water extract of Pulsatilla koreana (Yabe ex Nakai) Nakai ex T.Mori.,Panax ginseng C.A.Meyer and Glycyrrhiza uralensis Fisch,WEPPG)的抗血管生成作用.方法:使用纤维母细胞生长因子致血管生成的人类脐静脉内皮细胞模型衡量细胞的增殖、黏附及迁移,同时进行细管形成实验及纤维母细胞生长因子致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验检测WEPPG的抗血管生成作用.结果:WEPPG能够显著抑制纤维母细胞生长因子所致血管生成的人类脐静脉内皮细胞的增殖、黏附及迁移.信号蛋白分析显示多种蛋白表达变化,如细胞周期素A、p63、KIP2的上调及nibrin蛋白和黏着斑激酶的下调.与对照组相比,WEPPG显著减少了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成.结论:本研究的结果证实了WEPPG的抗血管生成作用,这可能是这种药物具有抗癌功效的原因之一.
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全反式维甲酸对培养大鼠主动脉平滑肌细胞Cyclin A表达水平及增生的影响
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白A(Cyclin A)表达水平及增生的影响.方法:血管平滑肌细胞采用组织贴块法培养.ATRA(2.5×10-6mol/L)作用于经20%FBS刺激后的VSMC,作用24h后分别行蛋白印迹检测Cyclin A蛋白表达和3H-TdR掺入实验测定. 结果:ATRA明显抑制由20%FBS促进的DNA合成[每孔每分钟脉冲数(3725.48±643.77)对(11567.09±1974.67)],同时降低Cyclin A蛋白的表达[平均光密度(122.50±9.59)对(135.92±11.95)]. 结论:ATRA抑制Cyclin A蛋白的表达是抑制VSMC增生的原因之一.ATRA可能成为预防和治疗动脉粥样硬化(AS)的有效药物.
