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传代培养对基于肽质量指纹谱的细菌识别稳定性的影响分析
目的 应用肽质量指纹谱技术对多次传代细菌进行识别,分析细菌传代对细菌识别能力的影响.方法 将幽门螺杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌分别连续传57、50、100代,金黄色葡萄球菌留取抗原.每一代新鲜培养菌和冻存抗原通过乙醇/甲酸法提取蛋白,采用肽质量指纹谱技术进行谱图采集和菌株鉴定.进一步采用NanoLC-MS/MS对幽门螺杆菌基于肽质量指纹谱识别的蛋白进行批量鉴定.结果 幽门螺杆菌、大肠埃希菌分别连续传57代和50代,采用肽质量指纹谱每代均能正确识别到种水平;金黄色葡萄球菌连续传100代,采用肽质量指纹谱每代新鲜菌株及冻存抗原均能正确识别到种水平,各代冻存抗原和新鲜菌株的肽质量指纹谱具有很好的一致性.幽门螺杆菌蛋白扫描分析,鉴定出206个蛋白,包括各种酶类(29.6％)、核糖体蛋白(15.5％)、外膜蛋白(10.7％)、假想蛋白(19.0％)、转运相关蛋白(2.0％)、其他蛋白(22.0％).结论 细菌连续传代和抗原冻存不影响肽质量指纹谱对菌株的正确识别,细菌的肽质量指纹谱具有传代稳定性.
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医院感染菌455株的耐药性分析
为了更好地控制细菌感染,指导临床合理使用抗菌药物,本研究笔者对所在医院2011年全年临床分离的455株细菌进行了分析,现报告如下.1 资料与方法1.1 资料:取自南京市浦口区中心医院2011年1月1日至12月31日住院患者各类细菌学标本中分离的细菌455株,剔除同一患者相同部位的重复菌株.1.2 方法:应用法国生物-梅里埃公司鉴定及药敏测试仪及配套微生物榆测试剂进行细菌鉴定和药敏试验.同时用标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922,铜绿假单胞菌ATCC27853作室内质量控制.标准菌株均山卫生部临床检验中心提供.
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生物梅里埃提供全面食品微生物鉴定解决方案
食品微生物实验室的 项基本的工作就是进行微生物鉴定.根据食品安全国家标准的规定,对于食源性致病菌,如检测结果为阳性,则需进行微生物鉴定实验,选择通过生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行相关的鉴定实验. 作为全球食品微生物鉴定市场的领导者,法国生物梅里埃可以提供从手工鉴定条到全自动化微生物鉴定系统的完整解决方案,本文在此做简单介绍.1.API系统细菌鉴定国际金标准 API系统原理是根据微生物生理生化特征鉴定的结果,进行的数值分类鉴定,是国际细菌鉴定的金标准,几乎所有的微生物教科书都对该技术有所介绍.
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六价铬还原菌Cr4-1的鉴定和还原影响因素的优化
目的 对六价铬[Cr(Ⅵ)]还原菌Cr4-1进行鉴定,并给出细菌生长和Cr(Ⅵ)还原的较好条件.方法 采用生理生化法和16s rDNA测序法,对细菌Cr4-1进行鉴定,并分别研究温度、pH、初始Cr(Ⅵ)浓度和摇床转速对细菌生长和Cr(Ⅵ)还原效果的影响,用质量平衡法分析还原反应终产物.结果 从驯化后的活性污泥中筛选的Cr(Ⅵ)还原菌Cr4-1,经鉴定为蜡样芽孢杆菌.细菌生长的较好条件为:25℃,pH 7～8,摇床转速200 r/min;还原Cr(Ⅵ)的适宜温度为35℃,pH8～9.Cr(Ⅵ)初始浓度从20 mg/L增加至60 mg/L,还原效果呈下降趋势.在较好的还原条件下,Cr(Ⅵ)初始浓度为30 mg/L时,9h的还原率可达100％,还原反应终产物为可溶性三价铬.结论 细菌Cr4-1为高效Cr(Ⅵ)还原菌,还原终产物为可溶性三价铬.
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分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展
由于全球范围内肺结核及非结核分支杆菌病的发病呈逐年上升趋势,准确而快速的菌种鉴定技术对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义.目前国内外采用传统的分支杆菌菌种鉴定方法需依据细菌生长速度、色素产生及多种生化试验等结果综合分析才能获得结果;而BACTEC TB460、TB960培养基系统虽快速(2～6d),但只能初步鉴定结核分支杆菌复合群和非结核分支杆菌,不能将细菌鉴定至种.近年来建立的色谱方法虽能达到部分菌种鉴定的目的,但需特殊仪器,临床尚未普遍开展.目前国内外研究者都致力于使分支杆菌菌种鉴定从细胞表型水平进入分子基因水平.现对分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展综述如下.
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上海出入境人员结核病实验室检测情况分析
[目的]了解2008年上海出入境人员结核病的实验室检测情况.[方法]对2008年上海口岸出入境人员检疫疾病监测过程中,胸片X射线检测怀疑活动性肺结核的患者进行痰液的抗酸染色检查、分支杆菌培养以及细菌鉴定.[结果] 2008年1-12月上海地区出入境人员X射线检测怀疑活动性肺结核患者28人.痰涂片抗酸杆菌阳性的共5例(占17.86%),其中1～9条/100视野的3例,1～2条/300视野的2例.痰培养阳性16例,占57.14%;阴性12例,占43.86%;其中液体培养及LJ培养均为阳性9例;液体培养阴性、LJ培养阳性1例;液体培养阳性、LJ培养阴性6例.培养阳性的菌株中鉴定为结核分支杆菌复合群的为4例,占25.00%;鉴定为非结核分支杆菌(MTM)的为12例,占75.00%.经核酸测序显示NTM中,胃、堪萨斯分支杆菌2例,脓肿、龟分支杆菌8例,戈登分支杆菌1例,偶然分支杆菌1例.[结论] 加强对出入境重点人群的结核病监测具有重要意义,同时实验室需要提高痰涂片的检出率,重视疾液培养技术,努力提高检测能力.
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布鲁菌病的实验室特征分析
目的：：探讨益阳市布鲁菌病的实验室特征，为布鲁菌病的诊断和治疗提供依据。方法：回顾性分析益阳市中心医院送检的11例布鲁菌病患者的临床资料、职业特性、血液检验结果、细菌培养鉴定特征。结果：11例患者中男性10例，均有明确接触史，血液炎症指标均有不同程度的升高，细菌鉴定均为马耳他布鲁菌。结论：微生物工作人员应加强对布鲁菌病的认知，为临床提供准确的病原学诊断依据。
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细菌鉴定在临床血液检验中的有效运用
目的：探讨直接药敏试验和常规药敏试验在临床血液检验中的应用效果，为临床血液检验提供有效方法。方法：2013年1月-2014年1月收治发热合并全身感染患者700例，采用无菌原则采集患者静脉血20 mL，并分别采用直接药敏试验和常规药敏试验给予检验。结果：直接药敏试验和常规药敏试验总检出一致率达84.6%，两种检测方法差异无统计学意义(Z=-0.214，P＞0.05)。结论：直接药敏试验和常规药敏试验对细菌鉴定的检出符合率较高，但是直接药敏试验操作方法简便、省时，值得首选。
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COMPACT微生物全自动分析系统的质量控制
VITEK 2 COMPACT是法国生物梅里埃公司生产的快速细菌鉴定及药敏试验全自动分析仪,带有专家分析系统,使用简单、方便,在细菌的鉴定及药敏传统方法上缩小了孵育时间,快速地给临床提供细菌鉴定结果和用药情况,但其鉴定的细菌种类数相对较窄,不是绝对的无菌操作所以我们必须从细菌鉴定及药敏试验步骤的精密度和准确度、试验所用试剂和仪器的质量,工作人员的操作规范进行严格的质量控制.
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临床血液检验中的2种不同细菌鉴定法应用分析
目的 探讨在临床血液检验中采用直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验.方法 本文将选取2010年5月～2011年12月期间我院收治的发烧并伴全身感染症状者患者中的720例阳性血培养标本,并分别对其采用直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验对比.结果通过对720例血液样品进行BacT9050型全自动血培养仪检出的420例的阳性样,其中通过直接法鉴定出G+球菌282株,而G-球菌66株,而通过采用常规法鉴定出G+杆菌332株,G-球菌88株.两种检测方法的符合率为82.86％,然后对阳性样行药敏试验,其检测结果两种方法的总符合率均比较高,其中G+球菌和G-杆菌的耐药、敏感、中度敏感结果均无显著差异.结论 通过本实验的表明,对阳性血培养标本进行直接药敏试验,其检验结果不仅操作简便,而且检测结果准确以及检测时间较短,因此,直接法可替代常规药敏实验对G-杆菌和G+球菌的抗菌药物敏感度进行检测.其将有效提高败血症以及菌血症的临床诊治效率.
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血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏分析
目的：对血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏进行分析。方法研究我院收治的发热合并全身感染患者86例，在专用接种水中混掺患者的血培养标本，并在鉴定板上接种，通过直接法鉴定，同时把阳性标本转种平板进行分离培养，根据常规法对分纯后的菌落实施上机鉴定及药敏实验，然后进行对比。结果在86例样品当中，直接法和常规法符合率：细菌鉴定总符合率为96.4%，其中革兰阴性菌95.8%，革兰阳性球菌97.1%；两种方法的细菌结果均有着较高的准确率，细菌鉴定准确率在95.7%以上。结论血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏实验能够准确的早期诊断菌血症患者，值得推广。
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浅析4家药企洁净室环境检出菌
目的 收集4家药企洁净室环境中24株微生物并进行初步鉴定,旨在了解洁净室微生物污染趋势.方法 4家药企采用平皿法收集洁净室环境中的微生物,通过Vitek2-compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定收集到的环境菌并进行分析.结果 共检出8种革兰氏阳性球菌、3种革兰氏阳性芽孢杆菌、2种革兰氏阴性杆菌.其中革兰氏阳性菌占检出菌的87.5%,革兰氏阴性菌占检出菌的12.5%、革兰氏阳性球菌占检出菌的75.0%、革兰氏芽孢杆菌占检出菌的12.5%、 革兰氏阴性杆菌占检出菌的12.5%.结论 4家药企洁净室收集的24株环境微生物主要检出菌类为革兰氏阳性球菌,各洁净室需采取相应的消毒措施对其控制.
关键词： Vitek2-compact 洁净室 细菌鉴定 -
莆田学院附属医院1917株多重耐药菌检测分析
为了解莆田学院附属医院多重耐药菌感染情况、分布及耐药特点,采用VITERK2COMPACT细菌分析系统和K-B法对2012年6月1日至2013年12月27日临床科室送检样本进行细菌鉴定和药敏试验,并对认定为多重耐药菌株进行病原菌耐药和分布情况分析.结果多重耐药菌株占所检出病原菌的19.99％(1 917/9 590),革兰阳性多重耐药菌株中凝固酶阴性溶血葡萄球菌检出多,占73.28％ (96/131)、革兰阴性菌则以大肠埃希菌检出率高,为64.70％ (603/932);多重耐药肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBLs)分别达到84.65％ (215/254)和73.30％(442/603),耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌占多重耐药肺炎克雷伯菌的11.81％ (30/254);多重耐药铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类高达91.10％ (133/146)、94.86％ (166/175),表现为强的耐药性;多重耐药的屎肠球菌、粪球菌分别占多重耐药肠球菌的45.87％ (50/109),25.69％ (28/109),耐万古霉素肠球菌检出率相对低,为2.06％,对替加环素、利奈唑胺100％的敏感,但对其他抗生素具有较高的耐药性;金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林的检出率分别为30.65％ (422/1 377)和64.60％ (208/322),其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS)较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)诱导克林霉素耐药高(P＜0.05),未发现替加环素、利奈唑胺、万古霉素、奎奴普汀/达福普汀耐药菌株;临床科室均检出多重耐药菌,其中检出多前五位分别为重症ICU、呼吸科、神经外科、儿科、小儿外科.多重耐药菌在临床检出较为普遍,提示该院可能存在多重耐菌的播散,应建立有效的控制措施使多重耐药在医院内的感染得到遏制.
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旋转恒温箱在快速细菌培养及鉴定中的应用
目的:探究分析旋转恒温箱进行快速细菌和鉴定的实用性.方法:选取本县人民医院在2017年1月～2017年12月收治的怀疑沙门杆菌感染的败血症患者的血液标本,经BACTEC9120仪培养确定为阳性的50株细菌为当做临床标本,选取已知菌株和标准菌株组成模拟标本100份,随机分为两组,研究组采用旋转恒温箱进行培养,对照组采用普通恒温培养箱进行培养.结果:研究组阳性显示时间多在24h之内,显著低于对照组96h之内(P<0.05),两组快速法判读结果相同,快速法结果判读所需时间少于常规法(P<0.05).结论:旋转恒温箱能够减少快速细菌培养和鉴定的时间,应用效果理想.
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评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定临床病原菌的效果
目的 评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对临床细菌的鉴定能力.方法 收集2014年9月至2015年1月苏州市立医院门诊和住院患者临床标本中分离出的4 511株病原菌,包括3 727株常见细菌,784株真菌,32株少见菌,按标准操作流程分离和培养后,用MALDI-TOF MS和Phoenix-100分别鉴定所分离菌株,鉴定结果不一致菌株采用细菌16S rRNA基因测序技术予以确认;采用MALDI-TOFMS和传统手工法鉴定真菌.结果 3 727株常见细菌,MALDI-TOF MS检出率为97.0％,Phoenix-100检出率为98.6％.另有35株黏液性肺炎克雷伯菌和42株黏液性铜绿假单胞菌,MALDI-TOF MS未能鉴定出,而Phoenix-100均可正确鉴定.两者对克雷伯菌属和假单胞菌属的检出率差异有统计学意义(x2值分别为36.219、17.288,P均=0.000),对摩根氏菌属、无色杆菌属、黄杆菌属、变形杆菌属的检出率均为100％,对其余菌属检出率差异均无统计学意义(葡萄球菌属、肠球菌属、埃希氏菌属、肠杆菌属、不动杆菌属、伯克霍尔德氏菌属的x2值分别为2.304、0.000、0.000、1.185、1.343、0.611、0.000,沙雷氏菌属、枸橼酸杆菌属、普罗威登斯菌属、窄食单胞菌属均经fisher检验;P均＞0.05).两系统鉴定结果不一致的80例菌株经16S rRNA基因测序,有47株被MALDI-TOF MS正确鉴定,有28株被Phoenix-100正确鉴定,且差异有统计学意义(x2=9.060,P=0.003).MALDI-TOF MS对念珠菌属、酵母菌属以及丝孢酵母菌属的检出率分别为90.7％、100％和100％.32株临床少见菌(芽孢杆菌属、乳杆菌属、丝孢酵母菌属、莫拉氏菌属、产单核李斯特菌等)经MALDI-TOF MS鉴定均得到可信结果.结论 MALDI-TOF-MS能够对葡萄球菌属、肠球菌属、肠杆菌科、非发酵菌群等临床常见细菌以及念珠菌属、酵母菌属等真菌进行可信鉴定,是临床微生物实验室病原菌诊断的有力工具.
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山西省细菌鉴定室间质量评价结果回顾分析
目的 了解山西省医疗机构近9年来临床微生物学室间质量评价(external quality assessment,EQA)细菌鉴定项目的检测能力.方法 收集2009年至2017年山西省细菌鉴定EQA反馈结果,对所涉及菌株鉴定正确率进行统计学分析.结果 参加山西省临床微生物室间质量评价的实验室以二级公立医疗机构为主,占74.5％.9年来共发放质评样本90份,共涉及33个菌属,54个菌种.累积通过网络上报结果1530份.质评合格率以2012年低为83.8％,2015年高为95.7％,9年累积合格率为91.0％.质评样本鉴定正确率从33.1％～100.0％不等.结论 通过参加室间质量评价,可以加强临床微生物实验室质量管理,找出存在的问题和不足,促进检测能力的提高.
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141例医院感染患者病原菌耐药性监测
为了解医院感染情况和加强对细菌耐药性监测,对某医院2004年4969例出院患者中发生医院感染的141例,依据中华医院感染管理委员会审定的医院感染诊断标准进行回顾性分析.细菌鉴定和药敏试验采用美国BD PHOENIX全自动微生物鉴定/药敏系统,判断标准及结果解释参照美国实验室标准化委员会(NCCLS)制定的标准.
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10例脑膜败血性黄杆菌感染分析
国内关于脑膜败血性黄杆菌所致感染的报道较少,我们收集了10例,现将其特点作一分析.1.资料与方法:回顾分析我院10例脑膜败血性黄杆菌感染病案,其中男7例,女3例,年龄36～76岁,平均59.6岁.其中基础疾病为心脑血管病3例,尿路感染1例,颅脑损伤2例,创伤性湿肺2例,慢性阻塞性肺病1例,急性有机磷农药中毒1例.住院时间4～219天不等,平均68.8天.转归情况:除1例因原发病严重而死亡外,其余均治愈.所有菌株均采用美国Dade Behring Microscan Walkaway 40全自动细菌鉴定及药敏测试仪及其配套药敏鉴定板测定MIC值.药敏判断根据美国NCCLS 1999年标准.
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西安市部分腹泻患儿病原检出情况分析
对我院1997年急住腹泻患儿1 510例进行分析,现报道如下.对象及方法:我院1997年1～12月住院和部分门诊急性腹泻患儿1 510例,年龄0～14岁 ,均符合1998年<中国腹泻病诊断治疗方案>的诊断标准,所有患儿均在就诊当天用无菌棉拭子沾取大便,将大便接种于SS和麦康培养液中,37℃,24 h培养,可疑菌落进行细菌鉴定与药敏试验.
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北京昌平地区1990～1999年腹泻病原菌监测
为了解北京昌平地区腹泻病原菌分布及构成特点，探讨其流行规律，制定可行的防治措施，于1990～1999年6～8月采集昌平区医院肠道门诊腹泻病人大便标本2 226份进行病原菌检测及细菌耐药性调查，结果总结如下。 1.材料和方法： (1)标本来源：昌平区医院肠道门诊1990～1999年6～8月就诊腹泻病人大便。 (2)检测内容：所有标本均检测霍乱弧菌、沙门菌、志贺菌、病原性大肠杆菌(EPEC、EIEC、ETEC)，部分标本还检测了肠出血性大肠杆菌(EHEC)及其他引起腹泻的细菌。 (3)分离和鉴定方法：粪便标本直接接种SS、Mac、SIB、弧菌琼脂分离，按常规方法进行鉴定，1998年后用API细菌鉴定系统鉴定。 (4)诊断血清：沙门菌、志贺菌、病原性大肠杆菌血清购自成都生物制品研究所，API试条及配套试剂购自法国梅里埃公司，药敏试验培基及纸片购自中国药品生物制品检定所，标准菌株由北京市卫生防疫站提供。以上全部诊断试剂及培基均在有效期内使用。
