双胸蚓溶栓酶对体外培养的WISTAR胎鼠大脑神经元突起生长的影响

缺氧诱导因子1α在宫内缺氧缺血性脑损伤的胎鼠脑组织中的表达

目的 探讨宫内缺氧缺血性脑损伤后不同复氧时间胎鼠脑组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的表达规律.方法 孕19 d Wistar大鼠36只,随机分为对照组和8个实验组,每组4只.实验组建立宫内缺氧缺血性脑损伤动物模型后,分别于子宫恢复血供后0、0.5、2…4、8、12、24及48 h取胎鼠脑组织;对照组只暴露双侧子宫15 min后,取胎鼠脑组织,应用免疫组织化学方法检测HIF-1α蛋白的表达.结果 实验组缺氧诱导因子1α蛋白表达在术后8 h明显升高,12 h达到高峰,24 h后明显下降.结论 HIF-1α在宫内缺氧缺血性脑损伤的胎鼠脑组织中的表达随着复氧时间的延长呈现先升高后降低的趋势.

宫内感染致胎鼠脑TNF-α表达及脑细胞凋亡变化的研究

目的:研究孕鼠腹腔注射内毒素(LPS)胎鼠脑肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达及胎鼠脑细胞凋亡的变化.方法:妊娠18d孕鼠随机分为对照组、LPS组,分别腹腔注射盐水和LPS.免疫组化法及RT-PCR法观察不同剂量、不同时间点的LPS腹腔注射后,两组胎鼠脑TNF-α的表达;采用原位末端标记法测定孕鼠腹腔注射LPS 0.4 mg/kg后48 h胎鼠脑细胞凋亡的变化.结果:胎鼠脑组织中TNF-α蛋白水平及mRNA表达,LPS组均显著高于对照组(P＜0.05),随着LPS剂量的增大,差异更为显著(P＜0.01);LPS以4 mg/kg腹腔注射后,胎鼠脑组织的TNF-α蛋白含量及mRNA表达增加,1 h即显著高于对照组(P＜0.01),4 h达高峰,至8 h仍显著高于对照组(P＜0.05);LPS组注药后48 h胎鼠脑海马区见大量棕褐色核染的凋亡细胞,与对照组比较差异显著(P＜0.01).结论:TNF-α可能是LPS致胎鼠脑损伤的关键的细胞因子.

胎鼠海马神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马线粒体膜电位的影响

目的探讨胎鼠神经干细胞培养后移植到阿尔茨海默病(AD)大鼠脑内,对AD的疗效.方法将原代培养的神经干细胞移植入AD大鼠脑内,通过水迷宫和跳台实验观察AD大鼠的学习记忆能力;用分子生物学检测AD大鼠海马的线粒体膜电位的变化.结果神经干细胞移植后的AD大鼠学习记忆能力明显改善;AD大鼠海马线粒体膜电位升高.结论胎鼠神经干细胞移植可以明显改善AD大鼠的痴呆症状.

PTZ诱导孕鼠痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响

目的 探讨母鼠孕期痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响.方法 将雌性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、盐水组(NS组)和癫痫组(PTZ组),采用戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)致痫模型,PTZ组大鼠每天给予腹腔下注射PTZ 35 mg/kg,点燃成功后将雌性SD大鼠与雄性SD大鼠合笼；发现阴栓记为孕0d,孕鼠继续孕前处理至孕20d.NS组腹腔注射相应剂量的生理盐水,NC组不做任何处理.Western Blot方法测定胎鼠海马组织中bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达变化.结果 PTZ组胎鼠海马caspase-3蛋白(2.57±0.08)较NC组(0.53±0.13)明显升高(P＜0.05)；PTZ组胎鼠海马bax蛋白(3.24±0.32)较NC组(1.55±0.11)明显升高(P＜0.05)；PTZ组子鼠海马bcl-2表达水平(1.42 ±0.074)较NC组(2.45±0.07)明显降低(P＜0.05).结论 孕期痫性发作使胎鼠海马促凋亡蛋白bax表达增加,抑凋亡蛋白bcl-2表达降低,凋亡执行蛋白caspase-3表达增加,推测孕期痫性发作可能使胚胎海马神经元凋亡增加.

混合稀土常乐在孕鼠和胎鼠肝中的蓄积及对肝脏钙含量的影响

目的:观察混合稀土常乐在孕鼠和胎鼠肝中的蓄积情况以及对钙(Ca2+)含量的影响 .方法:采用电感耦合等离子体质谱法和电感耦合等离子体原子发射光谱法分别检测孕鼠和胎鼠肝中镧(La3+)、铈(Ce3+)、镨(Pr3+)、钕(Nd3+)和钙含量变化.结果:孕鼠20 mg*kg-1常乐组肝中La3+、Ce3+和Nd3+含量高于对照组(P<0.05);孕鼠肝脏Ca2+含量各实验组高于对照组(P<0.05). 结论:孕鼠20 mg*kg-1常乐组稀土元素在孕鼠肝中有蓄积,各实验组孕鼠肝脏钙含量均有变化;胎鼠肝脏稀土含量和钙含量无变化.

不同浓度异氟醚长时间吸入致妊娠中期胎鼠大脑异常凋亡

目的:模拟妊娠中期妇女非产科手术的临床麻醉,对妊娠第14天母鼠进行长时间吸入异氟醚麻醉,观察不同浓度的异氟醚对其胎鼠大脑的影响.方法:选取50只SD雌性大鼠,定时受孕至妊娠第14天,随机分为5组:Iso1.0组、Iso1.5组、Iso2.O组,Oxy组和Control组,每组10只.各组母鼠分别吸入不同浓度异氟醚及100％氧气混合气体4h,Control组不作任何处置.吸入气体结束4h后行剖宫取胎术.每只母鼠随机选择2只胎鼠,取其大脑组织切片.TUNEL法检测胎鼠神经细胞凋亡量,计算凋亡细胞数与总细胞数的比率.结果:各组胎鼠大脑凋亡细胞比率存在显著性差异(P＜0.05).与Control组比较,吸入异氟醚的各组,即Iso1.0组、Iso1.5组和Iso2.0组,凋亡细胞比率均呈升高(P＜0.05);Oxy组与Control组相似(P＞0.05).Iso1.5组与Iso2.0组相似(P＞0.05);Iso1.0组显著低于Iso1.5组及Iso2.0组(P＜0.05).结论:妊娠第14天母鼠持续吸入异氟醚4h可致胎鼠大脑神经元凋亡显著增加;异氟醚致胎鼠大脑神经元凋亡增加可能存在剂量依赖性.

海妇洁栓对大鼠胚胎发育的影响

目的 评价海妇洁栓对大鼠胚胎发育的影响.方法 将Wistar妊娠大鼠随机分为5组:基质对照组、阳性对照(环磷酰胺7 mg/kg)组、海妇洁栓低(16 mg/kg)、中(32 mg/kg)和高(80 mg / kg)剂量组.基质对照组和海妇洁栓各剂量组孕鼠于妊娠第6天开始经阴道给药,每天1次,连续10d;阳性对照组孕鼠于妊娠第11天开始经大腿外侧肌肉注射给药,每天1次,连续3d.于妊娠第20天剖腹取出活胎,观察海妇洁栓对大鼠胚胎发育的影响.结果 除阳性对照组外,海妇洁栓各剂量组及基质对照组所有受检胎鼠均未见明显外观畸形;平均体重、身长及尾长虽组间比较差异有统计学意义(P<0.05),但均属于正常生理变化,无生物学及毒理学意义,与海妇洁栓无关;除阳性对照组外,海妇洁栓各剂量组及基质对照组所有受检胎鼠骨骼、主要内脏器官均未见明显异常.结论 海妇洁栓剂量在16 - 80 mg/kg之间对Wistar大鼠胚胎无明显的毒性和致畸作用.

参麦注射液对自由基损伤后海马神经细胞凋亡的影响

参麦注射液是中医院急症常备之药,治疗气阴两虚证,疗效确切.我们采用胞形态学、细胞化学方法,试图阐明参麦注射液对胎鼠海马神经细胞氧自由基损伤后发生凋亡的影响,现将研究结果报告于下.

孕期大鼠暴露PFOS对胎鼠肝脏毒性的影响

目的:研究在孕期暴露PFOS对胎鼠的肝脏毒性的影响.方法:将孕期为12天的16只SD雌性大鼠,随机分为4组给予不同剂量的PFOS[0(对照),5,10,20 mg·kg-1],连续灌胃7天,在GD19天时对母鼠和胎鼠的体重、胎鼠肝脏的生化指标、母鼠血清的生化指标进行了相应的检测.结果:与对照组相比,母鼠体重在20 mg·kg-1组显著下降(P＜0.001)；胎鼠的体重和体长在20mg·kg-1组显著下降(P＜0.001)；胎鼠的肝脏重量降低,呈剂量依赖性,并伴有肝细胞浊肿、变性甚至坏死；10 mg· kg-1组胎鼠肝脏中的酶活性(ALT、AST、GGT和ALP等)显著升高(P＜0.001)；母鼠血清的大部分生化指标未发生明显变化.结论:孕期大鼠暴露在PFOS的环境下会严重损伤胎鼠的肝脏功能.

孕期PFOS暴露胎鼠肺相关基因表达

目的:研究孕期PFOS暴露胎鼠肺损伤中相关基因的表达.方法:通过3种剂量的PFOS对孕期SD大鼠处理7天,采取胎鼠全肺分析.结果:通过形态学比较,发现PFOS暴露导致胎鼠体长、体重均显著降低(p<0.05),高剂量暴露会导致胎鼠死亡.通Real-time PCR检测,发现胎鼠肺Hsd11β1显著升高(p<0.01),Hsd11β2显著降低(p<0.05),H6pdh显著升高(p<0.01),Vegfa显著升高(p<0.01).结论:实验结果表明孕期PFOS暴露会导致胎鼠发育抑制、肺脏发育受损,其相关基因表达量出现显著变化.

戊酸雌二醇对大鼠胎鼠睾丸及睾丸引带的影响

目的 研究戊酸雌二醇对大鼠胎鼠睾丸与睾丸引带形态结构及功能的影响,探讨睾丸下降不全的原因.方法 30只健康SD受孕大鼠随机均分为4组:对照组及低、中、高剂量组.戊酸雌二醇以剂量0.8～2.0 mg/ (kg·d)灌胃作用于怀孕6～15dSD母鼠,分娩后正常喂养雄性子代,出生60d测量附睾、睾丸的脏器系数(附睾、睾丸重量/大鼠体重100),进行睾丸组织学切片观察生精小管的形态学变化,测量生精小管直径.结果 中、高剂量组睾丸均有一定程度的下降不全,光镜下睾丸生精小管、支持细胞存在明显的发育障碍,睾丸Leydig细胞明显增生;附睾、睾丸脏器系数、睾丸生精小管直径较对照组及低剂量给药组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 雌激素可导致睾丸引带功能障碍,使睾丸下降发生异常而诱导隐睾发生;同时造成睾丸Sertoli细胞、睾丸Leydig细胞和生精细胞发育障碍及功能改变.

孕鼠香烟烟雾染毒对胎鼠视杯和视泡上皮细胞凋亡的影响

[目的]观察孕鼠香烟烟雾染毒致胎鼠眼畸形的作用及对视杯、视泡上皮细胞和问充质细胞凋亡的影响.[方法]将怀孕的金黄地鼠随机分为吸烟组和对照组,吸烟组共3组(每组10只动物)分别于孕第6、7、8天开始用香烟烟雾染毒(即A、B、C组);对照组(共15只动物)除无烟熏外,其他条件同吸烟组.分别于染毒第3天时,在体视显微镜和光镜下观察各组鼠胚的发育情况及眼畸形的形态学变化;采用原位末端标记法定量分析金黄地鼠胎鼠视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞凋亡的变化.[结果]孕鼠香烟烟雾染毒对胚胎有显著致畸作用,吸烟组总畸形率为40.08%,眼畸形率为10.32%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),其中以孕7天开始染毒组畸形率高(51.69%).吸烟组视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞的凋亡细胞数明显高于对照组(P<0.05),且以孕7天开始染毒组凋亡细胞计数高,为(29.1±2.1)个.组织学观察发现,吸烟组胎鼠视杯的发生明显迟干对照组.[结论]香烟烟雾染毒对胚胎有明显眼致畸作用;香烟烟雾可以诱导视杯、视泡上皮细胞及间充质细胞过度凋亡,导致视杯的发生明显延迟,这可能是香烟烟雾染毒致胚胎眼畸形发生的机制之一.

母源性甲亢对胎鼠、仔鼠心的影响

目的:研究母源性甲亢对胎鼠、仔鼠心的影响.方法:建立妊娠合并甲亢模型；取孕16、18、20 d胎鼠心,出生5、10、15d仔鼠心,解剖检查；经石蜡包埋,Masson染色,测量心肌细胞直径和长度；免疫组织化学检测内皮素的差异表达.结果:母源性甲亢各组胎鼠、仔鼠心质量分数高于同期对照组,心肌细胞直径加大、细胞加长,心肌排列不整齐且胶原纤维增多,内皮素的表达高于同期对照组.结论:母源性甲亢会影响胎鼠、仔鼠心肌细胞.

体外培养大鼠神经细胞的一个简便方法

历来认为,神经细胞培养技术难度较高,重复性低,需要耗费较多的材料和资金.以大鼠神经细胞培养为例,一方面,为了提高神经细胞的存活能力,一般用胎鼠取材;另一方面,为了给神经细胞生长提供充足营养,大多采用DMEM/F12混合培养液[1].

下丘脑神经元在无血清限定性培养基中的生长特点

神经组织的体外培养具有易于控制实验条件和实验因素,易获得活体的观察结果等优点,并且逐渐与分子生物学等技术相结合,因此已成为研究神经内分泌的有效实验方法.下丘脑作为调控神经内分泌的重要部位,由于核团多、结构复杂,在体研究有一定难度,因而许多学者建立了体外培养技术.国外学者已成功培养了胎鼠下丘脑神经元,但目前国内有关新生大鼠下丘脑神经元培养的研究报道并不多,因此我们采用无血清限定性培养基对新生大鼠的下丘脑神经元进行体外培养,观察其形态和生长状况,为进一步体外研究下丘脑的功能奠定基础.

小鼠肾脏发育中凋亡细胞的超微结构变化

1 材料和方法1.1 动物取昆明小鼠,雌雄比例3:1同窝饲养,以雌鼠阴道精栓出现为第1日计算胎鼠胚龄.部分孕鼠分笼饲养20日后,每天早八时观察分娩情况,新生仔鼠按生后计算日龄.选取14、18日胎鼠各4只,生后1、7、14日龄仔鼠各4只为观察对象.

胎鼠接触酒精可能导致成年后胰岛素抵抗

应用快速胰岛素敏感性试验(rapid insulin sensitivity test)方法[1]观察胎鼠接触酒精能否导致胰岛素抵抗.一、材料与方法

抗感冒药与小鼠唇腭裂发生的实验研究

目的探讨抗感冒药与唇腭裂的关系及对胎鼠整体发育的影响.方法选NIH系小鼠,随机分12组,每组各20只.几种常见的抗感冒药用0.5%的羧甲基纤维素钠配成所需的浓度,在受孕的第6～15天按体重给药量灌胃,另设对照组和阳性对照组.在受孕第1 8天,剖腹取出胎鼠进行各项指标检查.结果①对照组及各种抗感冒药实验组均未见先天性唇腭裂的发生.②康泰克高组有胎鼠发生先天性四肢缺损畸形;各抗感冒药实验组胎鼠身长及尾长明显矩于对照组;阳性对照、圣济低、康泰克低、速效低、速效高、感冒通低及感冒通高各组胎鼠体重明显低于对照组(P＜0.05).结论孕期服用抗感冒药不会直接导致胎鼠先天性唇腭裂的发生,但可导致胎鼠的发育迟缓,可能导致胎鼠先天性四肢畸形的发生.

胎鼠不同造血部位的形态学和组织化学研究

目的 观察胚胎11.5 d(embryonic 11.5 d,E11.5)不同造血部位的解剖结构和造血干细胞(hematopoieticstem cell,HSC)相关基因的转录水平、定位和形态,探讨不同造血部位HSC的起源、迁移、扩增和发育机制.方法 运用尼氏(Nissl)染色、苏木精-伊红(htoxylin eosin,H-E)染色和免疫荧光技术(immunofluorescence technique,IF)观察E11.5小鼠胎盘(placenta,PL)、卵黄囊(yolk sac,YS)、主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区、胎肝(fetal liver,FL)和头部(head,Hd)的形态学和组织学变化,以及运用实时定量基因扩增荧光检测系统(real-time quantitative,PCR,detecting system,QPCR)检测HSC相关基因的转录水平.结果 Nissl和H-E染色结果显示E11.5小鼠AGM区背主动脉、PL血管迷路、YS血管、Hd脑血管和FL血窦富含血细胞;CD34、CD45、CD133、c-kit、Sca-1和Runx1在不同造血部位均有表达(P＜0.05),其中PL表达水平显著高于其他造血部位(P＜0.05);IF结果显示CD34在不同造血部位均有表达,YS血管和PL迷路血管呈强阳性;AGM区背主动脉和泌尿生殖嵴内皮细胞、Hd脑血管周围可见CD45呈弱阳性,而FL则显示CD45为阴性.c-kit和CD133在YS血管和PL迷路血管同为强阳性.结论 HSC产生关键时期,胚鼠PL和YS中HSC发育旺盛.永久造血起源于小鼠胚内AGM区,而不同造血部位HSC的迁移与血管内皮细胞密切相关,HSC可能通过AGM区血管内皮迁移进入血液循环,首先到达PL的血管迷路,然后定植于FL,扩增或维持HSC.