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人β细胞素基因原核表达载体的构建

陈寒蓓;董艳;苏青

摘要: 目的 构建人BTC基因的原核表达载体.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,克隆入原核细胞表达载体PET32a(+)中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因.结果 PCR扩增的特异性片段长度为240 bp,以此构建的重组质粒PET32a(+)-BTC,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后显示5.9 kb和250 bp左右的两条片段,测序结果与Genbank中的人BTC基因cDNA(Genbank序列号NM_001729)序列一致.证明人BTC基因已成功克隆到了原核细胞表达载体PET32a(+)中.结论 成功构建了PET32a(+)-BTC重组原核表达载体.

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