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胆道恶性肿瘤的基因治疗
胆道恶性肿瘤(bile tract carcinoma,BTC)发病率逐年递增,临床发病隐匿,多数患者就诊时已为中晚期,失去了根治性手术切除的机会,预后较差,手术切除虽在一定程度上提高了BTC的疗效,但5年生存率仅为1%~2%;且BTC对传统放、化疗极不敏感.如何提高BTC疗效已成为极为棘手的难题.目前该领域的研究除了加强其化疗敏感性~([1-4])外,对新方法、新技术在其治疗领域的应用已成为热门研究方向.其中基因治疗就是其中的一种方法,初步应用已展示出良好的治疗前景与疗效.本文就基因治疗在BTC治疗中的作用进行综述.
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人β细胞素基因原核表达载体的构建
目的 构建人BTC基因的原核表达载体.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,克隆入原核细胞表达载体PET32a(+)中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因.结果 PCR扩增的特异性片段长度为240 bp,以此构建的重组质粒PET32a(+)-BTC,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后显示5.9 kb和250 bp左右的两条片段,测序结果与Genbank中的人BTC基因cDNA(Genbank序列号NM_001729)序列一致.证明人BTC基因已成功克隆到了原核细胞表达载体PET32a(+)中.结论 成功构建了PET32a(+)-BTC重组原核表达载体.