基于液相芯片技术的呼吸道病原体多重检测技术的建立
摘要： 呼吸道感染是临床常见的疾病之一，可由多种病原体引起，包括细菌、病毒、支原体、衣原体等，其临床表现与治疗因病原体不同而存在较大差异(1-4)。研究表明95%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病均由细菌外的病原感染引起，其中以呼吸道病毒为常见，包括呼吸道合胞体病毒(respiratory syncytial virus, RSV)、腺病毒(adenovirus, ADV)、流感病毒A型（Influenza virus A, INFA）、流感病毒B型（Influenza virus B, INFB）、副流感病毒(parainfluenza virus, PIV)等(5,6)。大部分呼吸道病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，并且新致病性病毒还在不断被发现。据统计，呼吸道和胞病毒、甲型流感、乙型流感和副流感病毒是呼吸道病毒感染中常见的病原体，占病毒感染种类的90%，致死率8%左右，严重危害到公众的健康和安全(7)。因此，建立一种快速准确的诊断方法，不仅有利于病因确诊，也有利于临床采取针对性治疗，同时在病毒的流行病学调查以及阻止病毒的传播与扩散中具有重要的作用。
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降钙素原、 超敏C反应蛋白、 白细胞检测在诊断老年细菌性肺炎中的应用
目的:探究降钙素原(PCT)、 超敏C反应蛋白(hs-CRP)、 白细胞计数(WBC)检测在诊断老年细菌性肺炎中的应用.方法:选取2016年3月～2017年3月收治的60例老年细菌性肺炎患者临床资料进行分析,将其设为研究组,并取60例同期体检健康者作为对照组,均采集血标本行PCT、hs-CRP、WBC检测,比较两组检测情况.结果:研究组PCT(5.71±3.23)ng/mL、hs-CRP(49.45±37.55)mg/L、WBC(13.32±8.19)×109/L均显著高于对照组(P<0.05);研究组3-4级患者检出PCT(7.69±2.62)ng/mL、hs-CRP(55.32±18.66)mg/L、WBC(17.04±3.13)×109/L显著高于1、2级(P<0.05).结论:老年细菌性肺炎可应用PCT、hs-CRP、WBC等指标进行诊断,三者联合检验准确率更高,且可对患者严重程度进行评估,可指导临床治疗方案的制定.
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临床血常规检测结果的影响因素及预防分析
目的:对血常规检测影响因素和控制对策进行探讨.方法:选择我院2017年1月～2017年12月收治的80例患者,采集外周末梢血50ul、 静脉血2ml进行血常规检测,随后分别在冰箱中储存,室温下留置2h、4h后,以及未溶血、 溶血情况下进行检测.结果:静脉血PLT、RBC、WBC显著低于外周末梢血(P<0.05).不同储存温度血常规检测中RBC、WBC、PLT对比差异无统计学意义(P>0.05).采集后4h血液标本PLT显著低于采集后2h血液(P<0.05).RBC、WBC对比差异无统计学意义(P>0.05).溶血血液标本PLT显著高于未溶血液标本,RBC显著低于未溶血标本(P<0.05).溶血血液标本WBC和未溶血血液标本对比差异无统计学意义(P>0.05).结论:很多因素会影响血常规检测结果,常见的包括采集位置、 储存时间、 溶血等,检测人员应当对出现误差的原因进行分析,并采取针对性预防措施,保证检测结果的准确性.
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应用CLSIEP15-A3验证糖化血红蛋白分析仪的精密度
目的:根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP15-A3文件的相关规定,验证三台糖化血红蛋白仪(日立7180生化分析仪、Sebia Minicap FP毛细管电泳仪、Trinity Biotech Priemier Hb 9210TM分析仪)的精密度.方法:按照EP15-A3精密度5×5设计方案,利用仪器原装配套质控品Sebia(水平1、 水平2)、9210(水平1、 水平2)、Roche(水平1、 水平2)进行批内和实验室内不精密度验证.每个质控样本每天1批,每批重复5次,共5天,每个样本获得25数据.使用Grubbs'法计算离群值,使用单因素方差分析(ANOVA)计算批内不精密度(SR)和实验室内不精密度(SWL),分别与厂家给出的批内不精密度(σR)和实验室内不精密度(σWL)进行比较和分析.如果SR≤σR、SWL≤σWL,则用户验证了厂家不精密度声明.如果SR>σR或SWL>σWL,则各自继续与其上限验证值(UVL)比较,如果SR≤UVLR、SWL≤UVLWL,同样用户验证了厂家不精密度声明.否则,需查找原因或与厂家联系.结果:三台糖化血红蛋白仪的测定结果均通过Grubbs'法离群值检查,各项目无离群值.SR和SWL分别与 σR、 σWL或UVLR、UVLWL比较,结果显示,批内不精密度验证实验中,除Sebia(水平1、 水平2)、Roche(水平2),SSR>σR,SR≤UVLR外,其他各水平均SR≤σR.实验室内不精密度验证实验中,除Sebia(水平2)、SWL>σWL,SWL≤UVLWL外,其他水平均SWL≤σWL.结论:实验室现用的三台糖化血红蛋白仪的不精密度达到厂家声明要求,符合质量目标要求.
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DEC1在肝癌细胞中的表达及分析
目的:初步探讨肝癌细胞株、 正常肝细胞株中DEC1mRNA的表达水平和DEC1蛋白的表达水平和DEC1蛋白亚细胞定位.为进一步发现DEC1与原发性肝癌发生发展的关系提供依据.方法:选取人肝癌细胞株SMMC-7721,HepG-2,Bel-7402,Hep-3B细胞和人正常肝细胞株HL-7702.用RT-PCR、 流式细胞术和免疫细胞化学方法检测DEC1mRNA及蛋白的表达水平.结果:其中HL-7702细胞中的DEC1 mRNA表达水平高于其他各肝癌细胞株,但差异没有统计学意义(P>0.05).各细胞株中DEC1蛋白在细胞核与细胞浆均表达阳性.但以HL-7702核表达较强.流式细胞术结果显示DEC1在肝癌细胞株Bel-7402中的标记率为56％.结论:DEC1在各株肝细胞中转录水平表达的差异并不明显.各细胞株中DEC1蛋白在细胞核与细胞浆均表达阳性.
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非原厂试剂在西门子ADVIA2400预稀释模式下的检测限分析
目的:对非原厂试剂在西门子ADVIA2400全自动生化分析仪的预稀释模式下的检测限进行分析.方法:以葡萄糖(Glu)和钙(Ca)为例,参考CLSI EP17-A文件,将空白样品及葡萄糖(Glu)和钙(Ca)的系列低浓度样品在西门子ADVIA2400全自动生化分析仪的预稀释模式下进行测定,对试验所得的数据采用相应的统计学方法,计算出Glu和Ca的空白限(LoB)、 检出限(LoD)和定量检出限(LoQ).结果:根据EP17-A的方案,统计得出Glu的LoB为0.004mmol/L,LoD为0.017mmol/L,LoQ为0.177mmol/L;Ca的LoB为0.012mmol/L,LoD为0.030mmol/L,LoQ为0.500mmol/L.结论:根据EP17-A文件中的方法,测定出Glu和Ca的实际LoQ均高于试剂说明书声明的检测下限.
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PCT等指标联合检测在COPD中的临床意义及对AECOPD的诊断价值
目的:探讨降钙素原(PCT)与几种炎症和凝血指标联合检测在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的临床意义及其对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的诊断价值.方法:随机选择在本院诊治的COPD患者114例,分为慢性阻塞性肺疾病稳定期(SCOPD)组(68例)和AECOPD组(46例),检测其血液PCT、 血清淀粉样蛋白A(SAA)、 超敏C反应蛋白(h-CRP)、 白细胞(WBC)、 纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)等指标,然后将检测结果在两组之间进行比较并作出AECOPD的诊断试验.结果:AECOPD组6项指标均值均明显高于参考区间;除FIB外,其余5项指标均值均明显高于SCOPD组(P<0.05和<0.01).PCT阳性率在SCOPD组仅1.5％、 在AECOPD组达95.7％,SAA和h-CRP阳性率在SCOPD组达80％以上,AECOPD组6项指标的阳性率均明显高于SCOPD组(P<0.05和<0.01).PCT对于AECOPD的敏感性和特异性均很高,分别为95.7％和98.5％.结论:PCT与几项炎症和凝血指标联合检测能揭示COPD的炎症严重程度和是否有血栓形成,PCT对AECOPD有很好的诊断价值.
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山东省2013-2017年凝血四项室间质评结果回顾分析
目的:分析山东省2013～2017年凝血四项室间质评结果,指导下一步室间质量管理工作.方法:由山东省临床检验中心组织实施,每年进行2次EQA活动,每次发放5个批号的质控物,评分项目为5项:PT、INR、APTT、TT、Fbg.严格按照山东省临床检验中心的要求,按规定方法在规定时间进行质控物的测定并及时反馈结果,从而查找各级医院实验室质量控制中存在的问题,并根据反馈结果比较两种检测仪器sysmexCA-1500和sysmexCA-500结果的一致性.结果:2013～2017年5年来,参控实验室数量逐年增加,由2013年450家增加到2017年的564家,增长率为25.3％,参控实验室的室间质评回报率也基本稳定在100％.参评实验室合格率稳定在90％以上,呈逐渐升高的趋势,凝血四项各项目PT合格率总体呈现稳定上升趋势,评价项目全部达到合格,但2015年第1次的TT和APTT,第二次的INR和PT的合格率总体偏低,均在90％左右.各级医院实验室检验质量普遍提高,在不合格实验室中,二级医院实验室所占的比例明显高于三级医院实验室.经过统计学分析,sysmexCA-1500和sysmexCA-500两检测系统结果具有一致性,可以满足临床检测的需求.结论:2013～2017年各实验室质控意识逐渐加强,参加室间质评活动的积极性不断提高.我省大部分实验室凝血四项检测的准确性和检验质量都能得到保证.但仍存在部分二级医院临床实验室没有改善准确性和检验质量,导致室间质评连续几年不合格的情况,应加大设备投入,提高检验人员水平,按标准程序对仪器进行校准,不断提高实验室检测能力.各个实验室之间检测系统相统一,检测结果一致性,已成为当今临床医学检验实验室标准化和规范化的关键因素.
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巨幼细胞性贫血与难治性贫血骨髓形态检验对比分析
目的:研究巨幼细胞性贫血与难治性贫血患者的骨髓形态差异.方法:回顾性收集我院2014年1月～2018年5月收治的50例巨幼细胞性贫血贫血和50例难治性贫血患者的临床资料,分别设为MA组和MDS-RA组,均进行骨髓形态检验,进行对照分析.结果:骨髓形态检验比较:两组患者的红系细胞巨幼变、 粒系细胞巨幼变和多核小巨核的百分比差异无统计学意义,P>0.05;MA组患者的红系细胞病态、 粒系细胞病态和淋巴样小巨核的百分比均低于MDS-RA组患者,P<0.05.外周血象比较:全血细胞减少、 单纯血红蛋白减少、 血红蛋白和血小板减少、 白细胞和红细胞减少、 幼红幼粒细胞细胞的百分比组间比较差异无统计学意义,P>0.05;MDS-RA组患者的有核红细胞PAS阳性率高于MA组患者,P<0.05.结论:巨幼细胞性贫血与难治性贫血患者在骨髓形态学方面存在一定的相似之处,同时又有各自的特征,巨幼细胞性贫血以骨髓红系细胞巨幼变为主要病变;难治性贫血应结合病态造血情况综合分析,准确诊断.
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2261例妊娠女性下生殖道微生态检测结果分析
目的:了解本地区妊娠女性下生殖道微生态状况.方法:对2017年9月～2018年6月来济南市妇幼保健院产科门诊就诊的2261例妊娠女性下生殖道分泌物进行检测,检测项目包括盐水湿片显微镜检查、 革兰染色检查菌群和病原微生物检查,并依据相关标准进行全面微生态评价.结果:下生殖道微生态平衡者1482例,占比65.5％,微生态失衡者779例,占比34.5％,其中VVC感染率高,占比15.3％,不同孕期的妊娠女性下生殖道微生态失衡总体上有差异,BV在不同孕期的感染率有差异,且感染率随着孕期的增加降低,不同年龄组的妊娠女性下生殖道微生态失衡总体上无差异.结论:妊娠期下生殖道微生态失衡发生率较高,妊娠期下生殖道感染以VVC常见.孕中期女性下生殖道微生态失衡率高,年龄并非决定因素.
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顺德地区皮肤过敏患者常见过敏原谱分析及意义
目的:分析顺德地区过敏性皮肤患者常见过敏原感染情况,为本地区的过敏性疾病进行预防和治疗提供指导依据.方法:采用免疫印迹法对622例过敏性皮肤患者进行吸入性过敏原和食入性过敏原检测,统计各种过敏原阳性率,并对阳性检出量进行排序分析.结果:本地区吸入性过敏原阳性率高为屋尘螨,动物毛皮屑和树类花粉,食入性过敏原阳性率不高,主要为虾/蟹/扇贝等水产类;18岁以下人群感染过敏原机率较高,需引起注意;另外,在季节性过敏原阳性率比较中,除了螨类和树类花粉外,其余吸入性过敏原还没发现有季节性的规律.结论:屋尘螨,动物毛皮屑、 树类花粉和虾/蟹/扇贝等水产类是顺德地区主要的过敏原.关注这些过敏原,采取有效措施避免与之接触,有利于控制过敏性疾病.
