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血红素氧化酶-1基因过表达对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响

周茂彬;李鑫;李琦;姬文婕;焉力方;闫睿;周欣;李玉明

摘要: [目的]建立血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)稳定过表达细胞株RAW264.7,探讨HO-1过表达对其增殖活性和细胞凋亡的作用.[方法]用携带小鼠HO-1基因的重组慢病毒感染小鼠RAW264.7细胞,经嘌呤霉素筛选获得HO-1稳定过表达细胞株.细胞分为野生型组(WT)、阴性对照组(NC)和过表达组(Lenti-HO-1).用Real-Time PCR检测细胞中HO-1mRNA的表达.用Western blotting检测细胞中HO-1蛋白的表达.用CCK-8法检测细胞的增殖活性.用流式细胞术检测细胞的凋亡水平.[结果]HO-1慢病毒能促进RAW264.7细胞HO-1 mRNA和蛋白的稳定过表达.Lenti-HO-1组细胞的增殖活性显著低于WT组和NC组(P<0.05).Lenti-HO-1组凋亡细胞的比例显著高于NC组(P<0.05).[结论]本研究成功构建了HO-1稳定过表达的RAW264.7细胞株,HO-1过表达能够降低RAW264.7细胞的增殖活性,增加凋亡细胞的比例,其为进一步探讨HO-1在巨噬细胞所参与病理生理机制中的作用奠定了基础.

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