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染石英肺泡巨噬细胞中转化生长因子-β1蛋白水平变化

姬文婕;周欣;杨磊;王世鑫

摘要: [目的] 观察石英与小鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophage,AM)转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)蛋白表达水平之间的剂量-效应关系和时间-效应关系,从而探讨TGF-β1在石英引起肺纤维化中的作用.[方法] 以不同剂量石英及不同作用时间刺激小鼠AM,收集其培养上清液,并作用于小鼠胚肺成纤维细胞,用ELISA法测定AM上清液TGF-β1蛋白水平,Western Blot方法检测AM内TGF-β1蛋白水平,四唑盐(MTT)比色法测定成纤维细胞增殖效应(A570 nm).[结果] 小鼠AM经不同剂量石英刺激4h后,结果显示随着石英剂量增加细胞培养上清TGF-β1蛋白水平逐渐升高,剂量100 μg/106细胞时,与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05).同剂量的石英作用不同时间后,TGF-β1蛋白随时间延长呈现先升高而后逐渐降低的趋势,染石英8 h时,其水平高(276.6±38.1 pg/ml),然后开始下降,但到第16 h仍高于对照组.AM内TGF-β1蛋白的表达有随石英剂量增高而上升的趋势,且随作用时间延长也呈先升高后降低,但其表达高峰时间在4 h,较上清中出现为早.石英剂量0~200 μg/106细胞范围内,AM上清液作用于小鼠胚肺成纤维细胞,可引起细胞增殖;从100 μg/106细胞开始差异有显著性,并存在剂量效应关系(r=0.92,P<0.05).AM上清TGF-β1蛋白水平与A570 nm进行相关分析,两者呈正相关,即TGF-β1水平越高,则成纤维细胞增殖活性越强(r=0.76,P<0.05).[结论] 石英体外刺激小鼠AM,引起TGF-β1蛋白表达水平升高,且呈现剂量-效应关系和时间-效应关系.经石英刺激后的AM上清液可导致小鼠胚肺成纤维细胞增殖,有明显剂量-效应关系,AM上清TGF-β1越高,促增殖能力越强,二者呈正相关.这说明TGF-β1与石英引起的肺纤维化有明确的联系,它可能是矽肺发生发展一个重要因素.

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