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线粒体心磷脂在二氮嗪预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用
目的 评价线粒体心磷脂在二氮嗪预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 清洁级SD大鼠72只,体重200～280 g,雌雄各半,随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、二氮嗪预处理组(DZ组)和5-羟葵酸拮抗二氮嗪组(HD组),每组18只.采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,C组平衡灌注20 min,持续灌注100 min;I/R组平衡灌注20 min,持续灌注30 min,缺血40 min,再灌注30 min;DZ组平衡灌注20 min后,依次灌注K-H液15 min、50 μmol/L二氮嗪10 min和K-H液5 min,其余缺血再灌注同I/R组;HD组二氮嗪预处理前给予含5-羟葵酸100 μmol/L K-H液10 min,其余处理同DZ组.各组分别于平衡灌注末(T1)、缺血前即刻(T2)、再灌注末(T3)时随机取6只大鼠,监测心率(HR)、左心室发展压(LVDP)和左心室舒张末压(LVEDP),采用高效液相色谱仪测定心肌线粒体心磷脂含量.结果 与T1,2时比较,各组T3时HR、LVDP降低,LVEDP升高,心肌线粒体心磷脂含量降低(P<0.05);与C组比较,其余3组T3时HR、LVDP降低,LVEDP升高,心肌线粒体心磷脂含量降低(P<0.05);与I/R组比较,DZ组T3时HR、LVDP升高,LVEDP降低,心肌线粒体心磷脂含量升高(P<0.05);与DZ组比较,HD组T3时HR、LVDP降低,LVEDP升高,心肌线粒体心磷脂含量降低(P<0.05).结论 二氮嗪预处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,与维持心肌线粒体心磷脂含量有关.
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缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体心磷脂合成的影响:离体实验
目的 评价缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体心磷脂合成的影响.方法 雄性SD大鼠,16～20周龄,体重250～ 350 g,建立Langendorff离体心脏灌注模型.取离体心脏64个,采用随机数字表法,将其分为4组(n=16):正常对照组(C组)、缺血再灌注组(Ⅰ/R组)、缺血后处理组(IPO组)和5-羟葵酸+缺血后处理组(5-HD+IPO组).平衡灌注20 min时,C组继续灌注K-H液70 min;Ⅰ/R组灌注4℃ST.Thomas停跳液10 ml/kg,常温下缺血40 min,再灌注37℃含氧的K-H液30min;IPO组于缺血40 min时先恢复灌注10s,缺血10s,反复6次,继之灌注37℃含氧的K-H液28min;5-HD+IPO组于缺血40 min时灌注含100 μmol/L 5-羟葵酸(线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂)的K-H液5 min,余同IPO组.分别于平衡灌注20 min(T1)和再灌注30 min(T2)时,记录HR、左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)和冠脉流量(CF),收集冠脉流出液2 ml,测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性,然后提取线粒体,测定心磷脂含量.结果 与C组比较,其余3组T2时HR、LVDP和CF降低,LVEDP升高,冠脉流出液LDH和CK的活性升高,线粒体心磷脂合成降低(P＜0.05);与Ⅰ/R组比较,IPO组T2时HR、LVDP和CF升高,LVEDP降低,冠脉流出液LDH和CK的活性降低,线粒体心磷脂含量升高(P＜0.05);与IPO组比较,5-HD+IPO组T2时HR、LVDP和CF降低,LVEDP升高,冠脉流出液LDH和CK的活性升高,线粒体心磷脂含量降低(P＜0.05).结论 缺血后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与其开放线粒体ATP敏感性钾通道,增加线粒体心磷脂合成有关.
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补肾活血方对抗心磷脂抗体(+)复发性流产患者蜕膜及外周血膜联蛋白A2和Toll样受体4的影响研究
背景 复发性流产(RSA)是妊娠常见疾病之一,抗心磷脂抗体(ACA)与该病的发生密切相关.前期研究发现ACA(+)RSA者蜕膜中Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路呈活化状态,提示该通路及通路中因子的变化可能是ACA(+)RSA发生的重要机制,故对该通路及其相关因子的干预可能会对ACA(+)RSA的妊娠结局产生一定影响.由于ACA(+)RSA者具有血栓形成倾向,这与中医肾虚血瘀证型相一致,故治以补肾活血法,根据该治法拟定的补肾活血方也在长期、大量临床应用中取得了良好的效果.目的 观察补肾活血方对ACA(+)RSA患者蜕膜及外周血中膜联蛋白A2(ANXA2)、TLR4表达情况,进而阐述补肾活血方在ACA(+)RSA患者保胎治疗中的疗效及作用机制.方法 选取2015年3月—2016年3月在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊及住院部治疗的符合纳入标准的ACA(+)RSA现妊娠失败需行清宫术患者16例,在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊行正常人工流产者15例,共收集蜕膜样本31例:ACA(+)RSA者蜕膜为试验组1(n=16)、正常人工流产者蜕膜为对照组1(n=15),其中试验组1中1例因流产组织发现染色体异常故予以排除.选取2015年3月—2016年3月在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊及住院部治疗的符合研究标准的要求行保胎治疗的ACA(+)RSA患者11例(试验组2),在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊行正常孕检者13例(对照组2),收集其血清样本,其中试验组2中1例自然流产,对照组2中3例自动退出,未计入统计数据.采用RT-qPCR法检测对照组1和试验组1蜕膜中ANXA2 mRNA、TLR4 mRNA水平.试验组2给予补肾活血方,对照组2不给予干预,于治疗前和治疗后分别采静脉血,采用ELISA法检测对照组2和试验组2血清孕酮、β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、ANXA2、TLR4水平.结果 对照组1蜕膜组织中ANXA2 mRNA水平高于试验组1,TLR4 mRNA水平低于试验组1(P<0.05).治疗前对照组2和试验组2血清孕酮、β-HCG、ANXA2、TLR4水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后对照组2和试验组2血清孕酮、β-HCG、ANXA2、TLR4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).试验组2治疗后血清孕酮、β-HCG、ANXA2水平高于治疗前,血清TLR4水平低于治疗前(P<0.05).结论 ACA(+)RSA的发生可能与ANXA2低表达、TLR4高表达相关,补肾活血方可以通过上调ANXA2水平、下调TLR4水平改善炎性环境,进而改善妊娠结局.
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血液梅毒筛查中不同实验方法适用性探讨
目的 评价灵敏度高、特异性好的实验方法和试剂用于血液梅毒的筛查,提高其阳性检出率,防止梅毒通过血液传播.方法 应用酶联免疫试验(ELISA)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体抗体诊断(凝集法)试剂(TPPA)3种实验方法对梅毒的检测结果进行比较.结果 95539例共检出梅毒阳性者619例,阳性率为0.65%.用ELISA方法检出588例,占94.99%(588/619);RPR方法检出258例,占41.68%(258/619);TPPA方法检出524例,占84.65%(524/619).结论 ELISA方法灵敏度高,仪器操作规范便于资料保存,是血液筛查的理想方法.血液筛查从保证血液的安全性、操作的方便性和经济性三个方面考虑,双法筛查血液的选择好是ELISA方法和RPR方法.TPPA方法特异性好,适用于梅毒筛查后阳性标本的确认实验.
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AcA、AsAb、EmAb、BA抗体与反复自然流产关系的研究
目的 探讨抗心磷脂抗体(AcA)、抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、封闭抗体(BA)与反复自然流产(RSA)的关系.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定112例反复自然流产患者(流产组)血清中BA抗体,AcA、AsAb、EmAb 项目的 测定采用金标免疫斑点法测定.结果 流产组AcA、AsAb、EmAb 阳性率分别为37.50%、25.00%、31 25%,明显高于对照组(分别为7.14%、4.08%、6.12%),差异都具有统计学意义(P<0.01);而流产组BA抗体的阴性率为89.29%,明显高于对照组22.45%,两者差异具有统计学意义(P<0.01).结论 AcA、AsAb、EmAb、BA抗体与反复自然流产有着密切的关系,且BA抗体的缺乏是引起RSA患者常见的免疫因素之一.
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血液筛查中梅毒实验方法适用性探讨
目的评价灵敏度高、特异性好的实验方法和试剂用于血液梅毒的筛查,提高其阳性检出率,防止梅毒通过血液传播.方法应用酶联免疫试验(ELISA)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体抗体诊断(凝集法)试剂(TPPA)三种实验方法对梅毒的检测结果进行比较.结果43 323例共检出梅毒阳性者299例,阳性率为0.69%.用ELISA方法检出294例,占98.33%(294/299);TRUST方法检出92例,占30.77%(92/299);TPPA方法检出239例,占79.93%(239/299).结论ELISA方法灵敏度高,仪器操作规范化,便于资料保存,用于血液筛查是一种理想的方法.血液筛查从保证血液的安全性、操作的方便性和经济性三个方面考虑,双法筛查血液的选择好是一遍ELISA方法和一遍TRUST方法.TPPA方法特异性好,适用于梅毒筛查后阳性标本的确认实验.
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梅毒感染者血清抗心磷脂抗体分析
目的 探讨梅毒螺旋体(TP)感染者血清抗心磷脂抗体(ACA)的特性.方法 随机选择48例系统性红斑狼疮(SLE)患者、32例反复流产患者、29例乙型肝炎患者、30例健康者和115例螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)阳性TP感染者,分别采用ELISA法和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)进行血清ACA检测.结果 TRUST阳性TP感染者﹑SLE患者﹑反复流产患者﹑乙型肝炎患者ELISA检测ACA阳性率均高于健康者(P<0.05),TRUST阴性TP感染者阳性率与健康者比较差异无统计学意义(P>0.05).TP感染者、SLE患者TRUST检测阳性率分别为40.0%和4.2%,TP感染者高于其他疾病患者及健康者(P均小于0.05).TRUST阳性TP感染者TRUST滴度与ELISA检测ACA阳性率呈正相关(r2=0.905,P＜0.05).结论 ACA存在具有明显异质性,导致ELISA和TRUST检测结果存在差异.
关键词： 梅毒 心磷脂质类 抗体 酶联免疫吸附测定 甲苯胺红不加热血清试验 -
抗心磷脂抗体及抗子宫内膜抗体与复发性流产的关系探讨
目的 探讨抗心磷脂抗体(AcAb)、抗子宫内膜抗体(EMAb)与复发性流产的相关性.方法 选取该院收治的复发性流产患者396例为观察组,另选取同时期进行孕前检查的健康体检者80例为对照组,检测两组的血清AcAb、EMAb水平,对比两组AcAb、EMAb阳性率,并分析复发性流产患者中不同流产次数患者的AcAb、EMAb阳性检出率的差异.结果 观察组AcAb与EMAb阳性检出率显著高于对照组(P＜0.05);观察组中不同流产次数患者的AcAb、EMAb阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.05),且随着流产次数的增加,AcAb、EMAb阳性检出率升高(P＜0.05);复发性流产患者的流产次数与AcAb、EMAb阳性率均呈显著正相关(P＜0.05).结论 抗心磷脂抗体与抗子宫内膜抗体与复发性流产存在显著相关性.
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中药胎儿安方治疗抗心磷脂抗体阳性致滑胎36例
中药胎儿安方用活血化瘀药为主,补肾益气药为辅,治疗抗心磷脂抗体阳性致滑胎36例,治愈31例占83%.提示本方对抗心磷脂抗体阳性有转阴作用,可能有促进胎盘微循环,增加胎盘血量,提高免疫功能达到保胎的作用.
