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药物依赖性实验方法(二)
(续1999年第1期)1.4离体组织实验阿片类药物在整体动物的身体依赖性特点也能表现在离体组织中,甚至在成神经细胞瘤与含阿片受体的神经胶质细胞杂交的细胞株(NG108-15)也能反映出来.用离体试验方法评价阿片类药物身体依赖性主要是用豚鼠回肠纵肌(GPI),其含有阿片受体,对阿片受体拮抗剂纳络酮敏感.这种制备短时暴露阿片受体激动剂后,在培养液中加入纳络酮会出现戒断收缩.这种戒断反应具有类似于整体动物催促戒断症状的药理特征.离体组织取材方便,试验周期短,对所试药物的身体依赖性可进行定性和定量比较,并取得与整体实验评价一致的结果,现成为一种普遍采用的方法.也有用大鼠和小鼠的输精管,但其对纳络酮不敏感,故不主张用此制备进行阿片类身体依赖性试验评价.目前用离体制备进行身体依赖性试验的方法主要有两种:一是对整体动物进行慢性给药,形成阿片依赖后取其离体组织进行试验;二是直接将离体组织放在含有阿片类药物的Krebs液中,孵育一段时间后进行戒断试验.
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激活的高分子激肽原抗细胞伸展与体外连接蛋白结构变化关系的探讨
目的:通过观察结构上改变的体外连接蛋白(aVN)底物上激活的高分子激肽原(HKa)对细胞伸展的影响,比较VN与aVN上HKa对细胞抑制活性.方法:采用细胞杂交及细胞粘附方法观察在HKa存在与否下VN对细胞伸展的影响.结果:HKa存在下MG-63细胞不能在固定的VN上伸展,但能在aVN上伸展;天然VN固定于塑料表面后用尿素处理,HKa存在或缺乏状态下细胞伸展活性相同.细胞杂交结果显示,在包被VN的硝酸纤维素膜上MG-63细胞伸展,存在HKa状态下细胞不能伸展于天然VN,而伸展于aVN底物.结论:在天然VN与aVN底物上HKa对细胞的抑制活性不同,HKa的抗细胞伸展活性随底物的结构而变化.
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肿瘤遗传和外遗传控制研究的发展
众所周知,肿瘤的发生和发展是受多种基因控制,而且是多阶段作用的结果.肿瘤由体细胞遗传变化而来的想法可追溯到二十世纪早期,直到七十年代后,基因工程技术和转基因技术的发展和应用,证明肿瘤的发生与特异基因的作用有关.肿瘤中的基因变异包括"功能获得"(gain of function)性遗传变化和"功能丢失"(1oss of function)性遗传变化.前者主要是通过DNA病毒,逆转录病毒对正常细胞转化发现的癌基因(oncogenes);后者主要是通过染色体分析,细胞杂交,鉴定等位基因丢失而发现的抑癌基因(Suppressor genes).
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原位杂交技术在小儿实体肿瘤研究中的应用
原位杂交技术(in situ hybridization)是近30年发展起来的分子生物学与组织化学相结合的高新技术.自1964年由Perdce创建以来,已广泛应用于生物医学研究,也称杂交组织化学(hybridization histochemistry)、细胞杂交(cytological hybridization)或原位杂交组织化学(in situ hybridization histochemistry).