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丙戊酸对乳腺癌细胞放射敏感性的影响
目的：探讨丙戊酸(VPA)对乳腺癌细胞 MCF7放射敏感性的影响。方法 MCF7细胞用 VPA临床安全剂量0.5 mmol??L-1和临界剂量1 mmol??L-1分别预处理0,24,48和72 h,8Gy 电离辐射后6 h,免疫荧光染色法观察磷酸化组蛋白 H2 AX(γ-H2 AX)焦点形成。对数生长期的 MCF7细胞分别以 VPA 0.5和1 mmol??L-1预处理72 h,4 Gy 电离辐射后48 h,MTT 法检测细胞存活率。 MCF7细胞用 VPA 0.5 mmol??L-1预处理24 h 后,按照每皿接种细胞数分别给予电离辐射2 Gy(每皿500和1000),4 Gy(每皿2000和4000)和6 Gy(每皿8000和16000),计算克隆形成率。 MCF7细胞分别用 VPA 0.5和1 mmol??L-1预处理0,24,48和72 h,流式细胞仪检测细胞周期。结果与正常对照组相比,单独 VPA 0.5 mmol??L-1处理0,24,48和72 h 后,γ-H2 AX 焦点阳性率分别为(5.3±0.6)%,(10.8±1.0)%,(12.6±0.9)%和(17.8±1.1)%( r ＝0.985, P<0.05)；VPA 1 mmol??L-1对γ-H2 AX 焦点形成有相同的影响趋势。单独照射组细胞核内γ-H2 AX焦点阳性率为100%,其中表示 DNA 损伤较重的焦点较大且明亮的 B 类细胞所占比例为(16.5±1.8)%；与单独照射组相比,VPA 0.5 mmol??L-1预处理0,24,48和72 h 后,B 类细胞所占比例分别为(16.5±1.8)%,(28.9±1.0)%,(58.0±2.0)%和(70.8±0.9)%(r＝0.986, P<0.05)；VPA 1 mmol??L-1对辐射诱导的γ-H2 AX焦点形成的影响有相同趋势。 MTT 和细胞克隆形成实验结果显示,与正常对照组相比,单独给予 VPA 0.5 mmol??L-1可显著降低细胞克隆形成率(P<0.05)；与单独照射组相比,VPA 预处理后接受电离辐射能显著降低细胞存活率(P<0.05)和细胞克隆形成率(P<0.05)；VPA 0.5和1 mmol??L-1对细胞周期影响均无统计学差异。结论临床安全剂量和临界剂量 VPA 对肿瘤细胞具有放射增敏作用,且对肿瘤细胞生长具有抑制作用,其机制与增加电离辐射所致的 DNA 双链断裂损伤的蓄积有关。
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氧化应激 DNA 损伤在重症肺炎中的作用研究
目的：研究肺炎患者机体中氧化应激程度、抗氧化能力及其细胞 DNA 损伤情况的相应改变,探讨氧化应激-DNA 损伤在肺炎中可能发生的作用。方法收集2011年6月至2012年3月泸州医学院附属医院呼吸内科住院部肺炎患者67例(肺炎组35例,重症肺炎组32例),招募32名健康志愿者作为正常对照组。对其中3名志愿者及3例肺炎组患者分别行经纤维支气管镜气道组织钳取活检观察气道组织氧化应激及炎症细胞浸润情况,对剩余64例患者及32名志愿者分别行无菌静脉取血2 ml,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)测定各组细胞氧化应激程度,DNA 损伤情况,留取血清测定各组抗氧化水平。结果①肺炎组支气管气道组织炎症细胞浸润明显多于正常对照组；②肺炎组支气管气道组织 ROS 红色荧光强度明显强于正常对照组；③肺炎组、重症肺炎组细胞 ROS 平均荧光强度均高于正常对照组,分别为3.308±0.240、6.628±0.349、1.505±0.352(P <0.01)；肺炎组、重症肺炎组细胞 ROS 平均光密度值均高于正常对照组,分别为0.913±0.065、1.260±0.023、0.390±0.031(P <0.01)；④肺炎组、重症肺炎组细胞平均拖尾长度均高于正常对照组,分别为6.783±5.015、30.363±7.436、0.095±0.123(P <0.05)；⑤肺炎组、重症肺炎组血清 SOD 平均光密度值均低于正常对照组,分别为0.225±0.030、0.159±0.033、0.456±0.024(P <0.01)。人外周血单个核细胞彗星平均拖尾长度与细胞 ROS 平均荧光强度(r =0.878,P <0.01)、平均光密度(r =0.815,P <0.01)均呈显著正相关。人外周血血清 SOD 平均光密度值与细胞 ROS 平均荧光强度(r =-0.847,P <0.01)、平均光密度值(r =-0.952,P <0.01)均呈显著负相关。结论①肺炎患者气道组织及外周血存在氧化应激,氧化与抗氧化失衡,氧化应激参与细胞DNA 损伤；②氧化应激-DNA 损伤可能是参与及加重肺炎的重要因素。
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野生型p53诱导的磷酸酶1与肿瘤发生发展及耐药关系的研究进展
野生型 p53诱导的磷酸酶1（Wip1）属于丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶，是 PP2C 家族成员。Wip1基因是一种原癌基因，可协同其他癌基因及致癌信号通路促进肿瘤形成，在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本文从抑制DNA 损伤应答、抑制 INK4a/ ARF 信号通路及调控肿瘤细胞侵袭、转移和凋亡相关蛋白表达等方面阐述 Wip1基因促进肿瘤发生发展的机制，指出 Wip1基因促进肿瘤发生发展过程涉及的相关信号转导分子，分析 Wip1基因在肿瘤细胞化疗耐药、放疗抵抗中的作用。
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结直肠癌患者体内氧化应激状态的评价及产物的分析
目的:机体的抗氧化能力和氧化应激状态都与大肠癌相关,文中评价结直肠癌(CRC)患者体内的氧化应激水平,研究氧化应激与CRC的关系. 方法:对60位研究对象(CRC患者和正常对照各30名)的血清,分别检测蛋白质、脂类、DNA的氧化损伤产物;检测维生素C、维生素E、谷胱甘肽等抗氧化剂及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶类. 结果:CRC患者体内蛋白羰基、晚期蛋白质氧化损伤产物均比对照组有明显升高(P<0.01),而CRC患者体内丙二醛和共轭二烯比对照组明显下降(P<0.01);CRC患者血清中抗氧化酶类的活性、维生素C和维生素E的水平显著低于对照组(P<0.01). 结论:CRC和氧化应激相关,评价CRC患者体内氧化应激状态对预测CRC的发生有指导意义.
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常规放射检查对人类精子影响的初步研究
目的：初步探讨男性受到低剂量电离辐射后的生殖安全性。方法将21份新鲜精液标本每份精液分成3组（对照组、1mGy 组、50mGy 组），1mGy 组、50mGy 组的精液样本分别接受1mGy（相当于普通 X 线片的剂量）和50mGy（相当于CT 检查的剂量）的 X 线照射。照射后分别对3组精液样本的精子活力、精子存活率、精子运动特征及精子 DNA 完整性等指标进行检测和比较。结果各组间精子活力、精子存活率、精子运动特征参数、精子 DNA 完整性经配对 t 检验比较不同组别指标间的差异没有统计学意义（均 P＞0.05）。结论常规放射学检查对男性成熟的精子是相对安全的，但对男性生精功能、精子的受精功能以及子代的安全性还需进一步深入研究。
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BMS-345541对急性粒细胞白血病细胞DNA损伤修复的影响
目的：体外研究 BMS-345541对急性粒细胞白血病( AML)细胞DNA损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法 MTT 法检测 VP-16作用于 AML 细胞,加入或不加入BMS-345541对该细胞增殖抑制的影响；流式细胞术检测BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复、细胞周期阻滞和细胞凋亡的影响；高内涵观察不同处理组γ-H2AX、p-ATM、RAD51募集在断裂位点的焦点情况。结果联合用药组比单用VP-16组对细胞的增殖抑制作用强；流式检测加入BMS-345541组比不加入组的γ-H2AX比例高,且加入BMS-345541组能够抑制VP-16导致的AML细胞G2/M期阻滞,增加细胞的凋亡率；高内涵检测断裂位点的 p-ATM 及RAD51的荧光焦点,6 h后,加入BMS-345541组比修复组的焦点的平均荧光强度和平均荧光面积高。结论 VP-16导致AML细胞产生DNA损伤,加入BMS-345541,能通过抑制HR通路来抑制细胞DNA损伤修复。
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翻译控制肿瘤蛋白在肿瘤靶向治疗中的分子作用机制及应用
翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）是一种在多种生物中高度保守的小分子蛋白。TCTP 在多种肿瘤细胞中高表达，已被证明参与调控细胞凋亡、DNA 损伤与修复和耐药性形成等多种复杂功能。近年来，随着 TCTP 相关的分子作用机制不断被揭示，TCTP 已成为肿瘤靶向治疗中的新型重要药物靶点。
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DNA 损伤修复蛋白 XPA 表达水平对膀胱癌细胞顺铂耐药的影响
【目的】探讨 DNA 损伤修复蛋白 XPA 表达水平对膀胱癌细胞顺铂耐药的影响。【方法】Western blot 法检测不同膀胱癌细胞株 XPA 蛋白表达水平；shRNA 干扰技术筛选出稳定并低表达 XPA 的膀胱癌细胞株，检测细胞克隆形成率及细胞凋亡率，比较 XPA 低表达细胞株与 XPA 正常表达细胞株对顺铂的敏感性。【结果】XPA 表达高的膀胱癌细胞 T24，顺铂耐药程度高；顺铂处理 shRNA‐T24‐XPA 细胞后，相比于 shRNA‐T24‐NC ，克隆形成率显著降低（ P ＜0．01），但相反促进细胞凋亡。【结论】膀胱癌化疗耐药可能与XPA 水平高表达有关，干预并下调膀胱癌 T24细胞 XPA 蛋白的表达，可降低细胞的克隆形成率，但相反增强顺铂的凋亡诱导率。
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多环芳烃与苯对焦炉作业工人周围血血象和淋巴细胞 DNA 损伤影响
目的：探讨焦炉作业工人混合接触多环芳烃（PAHs）与苯对其周围血血象和淋巴细胞 DNA 损伤的毒效应及特征。方法采用整群抽样法，以150名焦炉作业工人为接触组，按工作区域分为炉底、炉侧和炉顶亚组；以60名非焦炉作业工人为对照组。采集2组人群周围血样和尿样，分别采用高效液相色谱（HPLC）-荧光检测法和HPLC-质谱法检测尿1-羟基芘（1-OHP）和尿苯巯基尿酸（SPMA）水平，采用全自动血细胞分析仪检测血常规指标，采用单细胞凝胶电泳实验检测淋巴细胞 DNA 损伤程度。采用协方差分析和多元线性回归分析，在调整年龄、身体质量指数、吸烟、饮酒和烧烤食物摄入等混杂因素后，分析 PAHs 与苯混合接触对尿中代谢产物、血常规指标和淋巴细胞 DNA 损伤的影响。结果研究对象尿1-OHP 水平存在从低到高依次为对照组＜接触组炉底亚组＜接触组炉侧亚组＜接触组炉顶亚组的趋势（P ＜0.05），接触组炉底、炉侧、炉顶3个亚组人群尿1-OHP 水平分别为对照组的1.9、9.2和29.1倍；接触组炉顶亚组人群尿 SPMA 分别高于其余3组（P ＜0.05），接触组炉顶亚组人群尿 SPMA为对照组的3.2倍。与对照组比较，接触组3个亚组人群血红蛋白水平均升高（P ＜0.05），红细胞比容（HCT）水平均下降（P ＜0.05）；接触组的炉顶亚组人群红细胞（RBC）计数下降（P ＜0.05）。与对照组比较，接触组炉底、炉侧、炉顶3个亚组人群淋巴细胞 Olive 尾距（OTM）和尾部 DNA 百分率（Tail DNA％）均升高（P ＜0.05）；3个亚组人群的 OTM分别为对照组的11.1、12.0和13.1倍，Tail DNA％分别为对照组的15.5、17.2和17.5倍。研究对象的RBC 计数和 HCT 水平均与尿1-OHP 水平呈负相关（P ＜0.01），中性粒细胞计数与尿 SPMA 水平呈正相关（P ＜0.01），淋巴细胞 OTM和 Tail DNA％水平均与尿1-OHP 水平呈正相关（P ＜0.01）。接触组人群的 PAHs 和苯混合接触对其血液毒性或淋巴细胞 DNA 损伤不存在交互效应（P ＞0.05）。结论PAHs 和苯混合接触可导致焦炉作业工人一定程度的周围血血象改变和淋巴细胞 DNA 损伤，两者对焦炉逸散物毒作用均有贡献，但不存在交互作用。
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DNA损伤检测-单细胞凝胶电泳技术的研究
单细胞凝胶电泳(SCGE)又称为彗星实验,是一种可以在单个细胞水平上检测DNA断裂的技术.近年来该技术被广泛应用于特定的DNA损伤、DNA特异性染色、DNA修复、遗传毒理、环境生物监测等方面的研究.在前人的基础上对该实验方法做了进一步的研究和改进,使改进后的方法更加快速简捷、经济可行.
