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血余炭纳米纤维膜止血作用的实验研究
目的 探讨血余炭纳米纤维膜的止血作用.方法 采用静电纺丝技术制备一种新型载药止血材料血余炭纳米纤维膜.制作家兔耳缘静脉与肝脏创面出血模型,采用巴马小型猪建立肝脏、脾脏创伤出血模型,分别用医用纱布、吸收性明胶海绵及血余炭纳米纤维膜进行止血,通过观察止血时间、出血量、组织病理学变化等指标,评价血余炭纳米纤维膜的止血效果.结果 与医用纱布组和明胶海绵组比较,血余炭纳米纤维膜组显著缩短家兔耳静脉与肝脏创面止血时间(P＜0.05,P＜0.01),明显减少肝脏创面出血量(P＜0.05,P＜0.01).巴马小型猪出血模型血余炭纳米纤维膜组肝脏、脾脏出血时间明显缩短,出血量显著减少,与明胶海绵组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).组织学观察,血余炭纳米纤维膜止血处理的肝、脾创面组织除伴有轻度的充血外,未见有明显的出血、坏死或结节状增生等病理学改变.结论 动物实验结果表明血余炭纳米纤维膜具有较好的止血作用,止血效果显著优于明胶海绵和医用纱布,是一种良好的止血材料.
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知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜制备及体外抗肿瘤活性的初步研究
目的：探索知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜的制备方法，为后续进行体内相关研究打好基础。方法：将知母皂苷B-Ⅱ与聚乳酸（PLLA）按照不同比例制成知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜；分别采用扫描电镜、红外光谱分析、LC-MS/MS检测方法对纤维膜理化性质表征、生物相容性、缓释性能等进行测试；采用CCK-8法检测载药纳米膜缓释药物抑制胃癌细胞的增殖情况。结果：12%的知母皂苷B-Ⅱ浓度为佳载药浓度；在制备载知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维的过程中，静电纺丝技术能保持两种组分各自的化学特征及物理性质；知母皂苷B-Ⅱ对纤维膜的热稳定性影响不大，两者相容性较好；知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜可有效释放知母皂苷B-Ⅱ，明显抑制BGC-823细胞的增殖活性，在48 h、72 h与对照组细胞相比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜通过缓释药物可有效抑制BGC-823细胞的增殖能力。
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两种聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺纳米纤维膜的性能比较
背景:聚左旋乳酸和聚己内酯各自都有其优点与缺点,而共聚或共混后性能可以得到有效的改善,但因为两者添加比例的不同会对性能有一定的影响,在不吲的纺丝溶液浓度下纺出的纤维性能亦会有所差异.目的:通过对两种原料聚(左旋乳酸-己内酯)(75/25;50/50)在不同纺丝液浓度下制得的纳米纤维膜各种性能的比较,选出佳的原料和相应的纺丝液浓度.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-09/2008-11在东华大学生物材料与组织工程实验室完成.材料:将聚聚(左旋乳酸-己内酯)材料在乳酸/己内酯为75/25和50/50两种比例下,在质量分数为4%,6%,8%和10%纺丝液浓度下通过静电纺丝制备纳米纤维膜.方法:扫描电镜样品经表面喷金后在10 kV加速电压下观察纤维膜的彤貌.在万能材料测试机测试其断裂强度和断裂伸长率.采用MTT法测试猪髋动脉内皮细胞在纳米纤维膜上的黏附与增殖情况.主要观察指标:静电纺纳米纤维膜的纤维形态、力学性能及生物相容性.结果:通过扫描电镜观察发现由质量分数为6%聚(左旋乳酸-己内酯)(50/50)制备的纤维膜具有更好的纤维形态,且直径分布均匀;拉伸力学测试显示由聚(左旋乳酸-己内酯)(50/50)制备的纤维膜比聚(左旋乳酸-己内酯)(75/25)具有更高的断裂伸长率,但断裂应力较低;细胞生物相容性实验表明猪髋动脉内皮细胞在质鼍分数为6%和8%聚(左旋乳酸-己内酯)(50/50)的纳米纤维膜上更能有效的黏附与增殖.结论:纺丝液质量分数为6%的聚(左旋乳酸-己内酯)(50/50)制得的纳米纤维膜各项性能较优.
关键词： 聚(左旋乳酸-己内酯) 静电纺 纳米纤维膜 生物相容性 -
静电纺丝纳米纤维膜作为骨骼肌组织工程支架材料的细胞相容性
背景:有报道以生物可降解的胶原盘或聚L-乳酸、聚羟基乙酸、聚L-乳酸/聚羟基乙酸共聚物等作为骨骼肌组织工程的支架材料,各有优缺点,不能完全满足骨骼肌组织工程的需要.目的:探讨静电纺丝纳米纤维膜作为骨骼肌组织工程支架材料的可行性.方法:制备7种不同组分的静电纺丝纳米纤维膜,以其浸提液为培养基培养第3代SD乳鼠成肌细胞,以含体积分数20%新生小牛血清的F12培养基培养的为对照.采用MTT法和扫描电镜检测成肌细胞在各组材料的黏附及生长情况.结果与结论:各组分静电纺丝纳米纤维膜吸光度值与对照组间差异无显著性意义(P > 0.05).各组分静电纺丝纳米纤维膜组成肌细胞黏附率差异有显著性意义(P < 0.05).扫描电镜与上述结果一致.含70%聚乳酸+20%蚕丝蛋白+10%胶原组成电纺丝纳米纤维膜组可见大量成肌细胞黏附,呈梭形,两极伸展,排列规律,效果好.其他各组细胞少,形态不规则,似衰退期成肌细胞.提示静电纺丝纳米纤维膜无细胞毒性,对成肌细胞的增殖无影响,成肌细胞能良好地黏附;以70%聚乳酸+ 20%蚕丝蛋白+10%胶原组分效果佳.
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生物交联剂京尼平对静电纺明胶纳米纤维膜改性的影响
背景:生物高分子纳米纤维膜极不稳定,易水解,所以需要进行交联改性.而以往所采用的交联剂具有一定的细胞毒性,降低了材料的生物相容性.目的:用生物交联剂京尼平对静电纺明胶纤维膜进行交联处理,观察交联产物的理化性能和生物相容性.设计、时间及地点:观察性实验,于2008 03/10在东华大学生物材料与组织工程研究实验室完成.材料:将交联剂京尼平按质量比为0.0%,2.5%,5.0%,7.5%,10%加入明胶溶液中共混,通过静电纺制各纳米纤维膜.方法:扫描电镜样品纤表面喷金后在10 kV加速电压下观察纤维表面的形貌.在万能材料测试机测试其拉伸力学性能.采用MTT法测试猪动脉血管内皮细胞在纳米纤维膜上的黏附与增殖情况.主要观察指标:其混静电纺明胶纳米纤维的形态结构,力学性能、生物相容性.结果:通过扫描电镜观测发现京尼平共混交联的明胶纳米纤维尺寸略有增大,当京尼平含量为5.0%时,纤维直径大,增大了约200 nm;力学测试显示材料的力学性能在添加京尼平之后有了明显提高,当京尼平含量为5.0%时,应力达到了(2.45±0.09)MPa,应变达到了(3.85±0.57)%;生物相容性实验表明猪动脉血管内皮细胞在经京尼平处理过的明胶纳米纤维膜上能有效地黏附与增殖.结论:含有京尼平的明胶纳米纤维膜各项理化性能都有了显著的提高,与猪动脉血管内皮细胞复合具有良好的生物相容性.
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PLGA/鱼皮胶原共轭静电纺丝膜生物相容性分析
目的:对一种新型聚乳酸-羟基乙酸(polylactic acid-glycolic acid,PLGA)/鱼皮胶原共轭静电纺丝膜的生物相容性进行分析.方法:以PLGA和医用级鱼皮Ⅰ型胶原为原材料,通过共轭静电纺丝技术制备出高取向性的纳米纤维膜,然后分别以小鼠成纤维细胞L929为研究模型,初步评价其细胞、组织相容性,为其用于种植骨组织再生(guided boneregeneration,GBR)提供实验依据.结果:纤维细胞在纤维膜表面黏附生长良好,有大量细胞伸出伪足,沿着纤维的取向进行铺展排列.结论:PLGA/鱼皮胶原共轭静电纺丝膜有利于成纤维细胞生长,可望用于种植骨组织再生.
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血余炭纳米纤维膜促进家兔创面愈合的实验研究
目的 探讨一种新型止血敷料——血余炭纳米纤维膜促进家兔创面愈合的作用.方法 建立家兔背部双侧圆形创伤模型,每只兔子6个创面,将创面随机分为3组,分别给予医用纱布、血余炭纳米纤维膜和明胶海绵进行治疗,观察创面的愈合时间和愈合率,检测组织中羟脯氨酸含量的变化,并观察组织病理学变化.结果 实验结果显示,血余炭纳米纤维膜具有较好的止血性能,显著缩短创面愈合时间,提高愈合率.血余炭纳米纤维膜组在给药后3、7、14 d的创面组织中羟脯氨酸含量均显著高于医用纱布对照组(P＜0.01);在给药后7d,血余炭纳米纤维膜组的创面组织中羟脯氨酸含量明显高于明胶海绵组(P＜0.05).组织学观察结果显示,给药后3、7d,血余炭纳米纤维膜组的肉芽组织中成纤维细胞数量较医用纱布组和明胶海绵组均显著升高(P ＜0.05,P＜0.01);血余炭纳米纤维膜组肉芽组织中毛细血管数量显著高于明胶海绵组和医用纱布组(P＜0.05,P＜0.01).结论 血余炭纳米纤维膜具有显著的促进皮肤创面愈合的作用.
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电纺PLLA/PVP纳米纤维膜材料用于血管组织工程的前期研究
目的:研究静电纺丝在血管组织工程中的应用.方法:利用静电纺丝技术制备不同质量分数的聚乳酸(PLLA)/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)电纺丝膜,并通过差示扫描量热分析(DSC)、扫描电子显微镜(SEM)观察、接触角测试(CA)和力学性能分析进行材料学表征.在不同的电纺丝膜上种植血管平滑肌细胞(VSMCs),并分别在2、4、6 d取样进行SEM、激光共聚焦显微镜(LCMS)观察,以检测VSMCs在材料上铺展的形貌和分布情况.经MTT测试,以了解材料对VSMCs增殖的影响,用血小板黏附实验测试材料的血液相容性.结果:混入PVP的PLLA电纺丝膜具有良好的表面结构,亲水性显著提高,且随着PVP含量的增多PLLA电纺丝膜的亲水性增高,但对力学性能影响不明显.细胞实验结果表明:混有PVP的PLLA电纺丝膜利于VSMCs的黏附生长,具有良好的细胞相容性和血液相容性.结论:成功地将PVP和PLLA进行了静电纺丝,该材料具有良好的细胞相容性和血液相容性,其在血管组织工程应用中具有广阔的前景.
关键词： 电纺丝 血管组织工程 纳米纤维膜 聚乳酸/聚乙烯吡咯烷酮 细胞相容性 -
丝素蛋白膜与小鼠胚胎成纤维细胞的体外生物相容性研究
目的 探讨不同结构的丝素蛋白支架材料对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)生长繁殖性能的影响.方法 将NIH-3T3接种在丝素蛋白纳米纤维膜和浇铸膜上进行体外培养,并设空白对照组.通过MTT法、HE染色、扫描电镜来分析不同结构丝索蛋白膜的生物相容性.结果 增殖培养4天时实验组的OD值与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);增殖培养7天时实验组与空白组相比无显著性差异(P>0.05),而对照组与空白组相比有显著性差异(P<0.05).HE染色、扫描电镜显示NIH一3T3细胞在纳米纤维膜上比在浇铸膜上有更好的生长和连接状态.结论 与丝素蛋白浇铸膜相比,NIH-3T3细胞在纳米纤维膜上表现出更好的增殖能力,无明显细胞毒性表现;丝素蛋白纳米纤维膜具有良好的生物相容性,是皮肤组织工程的良好载体.
关键词： 丝素蛋白 纳米纤维膜 小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3) 生物相容性 -
HPLC测定纳米纤维眼用膜剂中地塞米松棕榈酸酯的含量
目的 建立测定纳米纤维眼用膜剂中地塞米松棕榈酸酯含量的高效液相色谱法.方法 采用岛津LC-20A型高效液相色谱仪,色谱柱为Diamosil C18(150 mm× 4.6 mm,5 μm),柱温40℃,流速:1 mL·min-1,流动相为100％甲醇,检测波长239 nm,进样量20 μL.结果 地塞米松棕榈酸酯浓度在0.1～5 μg·mL-1内线性关系良好(r=0.999 5),日内精密度和日间精密度RSD均＜2％(n=5),平均绝对回收率99.89％,RSD为1.15％(n=15).结论 本方法简便易行,重复性好,灵敏度高,结果准确可靠,适用于纳米纤维眼用膜剂中地塞米松棕榈酸酯含量测定.
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新型可缓释万古霉素脱蛋白松质骨支架的研究
目的 制备新型的缓释万古霉素脱蛋白松质骨支架并研究其性能.方法 利用静电纺丝技术将载万古霉素的纳米纤维膜贴附于牛脱蛋白松质骨支架表面.通过扫描电镜观察处理前后骨支架的表面特征、高效液相色谱法检测载药支架的万古霉素释放速率、抑菌实验观察载药支架的体外抗菌效率,支架与兔间充质干细胞共培养观察对细胞增殖的影响.结果 载万古霉素纳米纤维膜紧密贴附于脱蛋白松质骨支架表面,纤维直径约100 ～1 200 nm,表面孔径大小约1～5 μm.体外万古霉素释放实验结果显示洗脱液中第1天的药物浓度高,随后逐渐缓慢降低,但维持在小抑菌浓度以上的时间超过4周.体外抑菌实验结果证实了活性万古霉素的存在,并且有效抑菌圈可以维持至4周.兔间充质干细胞共培养实验结果显示载药、非载药支架和空白组在1、3、6、9、14d时,相对细胞生存系数先降低,在第6天达到低约93.8％,以后观察时间均出现不同程度的升高,各组间的细胞增殖速度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新型缓释万古霉素脱蛋白松质骨支架可以缓慢释放活性万古霉素,有效抑菌时间长,且细胞相容性好,是修复感染性骨缺损的理想支架材料.
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静电纺丝制备淫羊藿黄酮PVP载药纳米纤维膜
目的:静电纺丝制备淫羊藿黄酮纳米纤维膜,提高淫羊藿黄酮体外溶出率.方法:通过溶解度试验筛选合适溶剂,以静电纺丝制备淫羊藿黄酮纳米纤维膜,采用扫描电镜对纤维膜表面形态进行观察,通过体外溶出度测定的评价淫羊藿黄酮的溶出效果.结果:甲醇与二甲基乙酰胺混合溶剂的溶解性及纤维成型性较好；载药纤维直径分布均匀(400-600 nm),表面光滑无药物颗粒,药物与聚合物之间通过氢键作用,具有良好的相容性,体外溶出结果表明所制备的纳米纤维膜中淫羊藿黄酮能在30 s内释放完全.结论:淫羊藿黄酮纳米纤维膜的电纺制备工艺简单易行,该工艺能有效提高淫羊藿黄酮的体外溶出度.
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反相高效液相色谱法测定柚皮苷纳米纤维膜中柚皮苷含量
目的:建立能有效测定柚皮苷纳米纤维膜中柚皮苷含量的反相高效液相色谱法.方法:采用静电纺丝技术制备含有柚皮苷的纳米纤维膜样品,采用安捷伦C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸水(pH 2.8) (23∶77),检测波长为283 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样体积为20μl.结果:空白纳米纤维膜对柚皮苷的检测无干扰,专属性良好.柚皮苷低检测限S/N=3为3.4 ng/ml;定量限S/N=10为10.2 ng/ml;在51 ng/ml～1 836 μg/ml范围内呈良好的线性关系(相关系数r=0.999 99);日内和日间精密度以及重现性均良好;平均回收率为99.51％,相对标准偏差=0.66％;检测溶液在24h内稳定.结论:柚皮苷纳米纤维膜是采用静电纺丝技术制备的含有柚皮苷的纳米级纤维膜,是一种新型的载药引导性骨再生膜.本法简便、准确、快速,可用于柚皮苷纳米纤维膜中柚皮苷的含量测定,为研究其佳载药量打下基础.
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5-氟尿嘧啶纳米药膜的体外缓释及其对结肠癌细胞抑制作用研究
目的 研究担载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的左旋聚乳酸(PLLA)共混羊毛蛋白纳米纤维药膜的缓释功能及其对结肠癌细胞的体外抑制效果.方法 将PLLA与羊毛蛋白共混交联,并加入抗肿瘤药物5-FU,利用高压静电纺丝技术将共混溶液制作成具有缓释效果的纳米纤维薄膜.通过扫描电镜(SEM)观察其形貌.以高效液相色谱法(HPLC)测定5-FU/PLLA羊毛蛋白药膜中5-FU的缓释效果.采用噻唑蓝(MTT)比色法,检测药膜对结肠癌细胞HCT116的体外杀伤效果.同时采用倒置相差显微镜、透射电子显微镜(TEM)观测实验组细胞的生长情况.结果 由SEM可以看出5-FU能够均匀分布在纳米纤维药膜中,HPLC显示5-FU能够缓慢释放并基本符合零级动力学规律.采用不同处理因素后,通过显微镜观察,药膜浸泡时间越长的实验组细胞出现肿胀、凋亡、坏死的情况越明显.MTT检测纳米药膜实验组的细胞存活率为(47.5±2.8)％,而不含药物的纯膜组对细胞基本无影响,其存活率为(93.9±2.8)％,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 5-FU/PLLA羊毛蛋白纳米药膜有明显缓释效果,具有较好的肿瘤细胞抑制作用和潜在的医疗应用价值.
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静电纺丝伤口敷料研究进展
伤口敷料的主要作用是防止微生物渗透,并保持伤口水分平衡和气体交换的环境.静电纺丝技术制备的纳米纤维膜形式的伤口敷料具有极大的比表面积和孔隙率,在传统敷料的基础上又能模仿细胞外基质,促进伤口愈合.笔者介绍了静电纺丝的原理及静电纺丝技术制备伤口敷料的进展,并对其应用前景做了展望.
