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大疱性类天疱疮患者血清抗BP180自身抗体识别抗原表位的研究
目的 分析大疱性类天疱疮(BP)患者血清抗BP180IgG和IgE自身抗体所识别的抗原表位.方法 利用柱亲和层析的方法从10例BP患者血清中提取抗BP180-NC16A自身抗体,用免疫印迹技术对所获IgG和IgE自身抗体分别进行抗原表位鉴定.结果 所有10例患者的自身抗体均识别aa507-aa532区域内(NC16A-2和NC16A-2.5)至少一个抗原表位,而且来自同一患者的IgG和IgE自身抗体在该区域所识别的表位完全一致.BP自身抗体与NC16A-1、NC16A-3和NC16A-4区域的结合率较低,与NC16A-5片段不结合.结论 BP致病性自身抗体所识别的主要抗原表位可能位于BP180分子NC16A片段的aa507-aa532区域内.
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大疱性类天疱疮180抗体阳性的寻常型天疱疮3例
报告3例大疱性类天疱疮(BP)180抗体阳性的寻常型天疱疮患者.所有患者均以口腔、外阴黏膜糜烂,躯干多发水疱逐渐加重就诊.皮肤科检查:患者分别在头皮、面部、颈部、口腔、外阴、躯干及下肢等部位出现绿豆至花生米大的孤立或融合性水疱,部分糜烂面潮湿.实验室检查:血清检测抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)抗体和Bp180抗体均阳性,直接免疫荧光(DIF)示抗棘细胞桥粒抗体(PCDA)阳性或抗表皮基膜抗体(EBA)阳性.皮损组织病理检查:表皮内水疱,棘细胞松解,基底呈“绒毛”样改变,基底层见中量淋巴细胞浸润.结合临床及实验室检查诊断为BP180抗体阳性的寻常型天疱疮.
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大疱性类天疱疮疾病严重程度与BP180抗体水平关系的研究
目的 研究大疱性类天疱疮患者临床疾病严重程度和BP180抗体滴度之间的关系.方法 用BP180NC16a-ELISA分别测定大疱性类天疱疮患者治疗前,病情缓解、糖皮质激素开始减量时和糖皮质激素减量至相当于泼尼松0.5 mg·kg-1·d-1时,体内BP180抗体滴度,观察其与患者病情严重程度的一致性.结果 在治疗前,19例大疱性类天疱疮患者的BP180 ELISA平均A值为0.520(0.832～0.372);在病情得到控制、糖皮质激素准备减量时,其BP180 ELISA平均A值为0.405(O.723～0.204);在病情缓解、糖皮质激素减至相当于泼尼松0.5 mg·kg-1·d-1时,其BP180 ELISA平均A值为0.215(0.412～0.093).结论 BP180抗体的滴度与大疱性类天疱疮患者疾病严重程度相关,是一种评估疾病病情的有用手段,也可对治疗的有效性作出评价.
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BP180NC16a-ELISA对大疱性类天疱疮血清学诊断的评价
目的 评价BP180NC16a-ELISA对大疱性类天疱疮血清学诊断的效能.方法 BP患者42例,对照组42例(其中正常人对照24例,天疱疮18例),在患者用药前采血,比较BP180NC16a-ELISA和盐裂试验免疫荧光(IIF)检测的结果.结果 用BP180NC16a-ELISA检测时,BP患者中有1例呈阴性反应,其敏感性为97.62%;正常人对照组中有1例呈阳性反应,其特异性为97.62%,且BP180NC16a-ELISA法的A值与IIF滴度之间无相关性.结论 BP180NC16a-ELISA在疾病初始阶段是检测血清中抗BP180抗体的有效方法.
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BP180抗体在大疱性类天疱疮及神经系统疾病患者血清中的表达
目的 分析比较BP180抗体在大疱性类天疱疮(BP)与神经系统疾病(ND)患者血清中的表达差异,探讨BP与ND关系.方法 收集2012年3月至2013年9月吉林大学第二医院皮肤科门诊及住院BP患者和神经科住院ND患者的临床资料.采集BP患者、ND患者、BP+ ND患者及健康对照(各20例)外周血,EHSA法测定各组BP180抗体数值.应用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析.计数资料比较采用卡方检验;各组年龄、BP180滴度比较采用方差分析,两两比较采用Games-Howell检验.结果 健康对照组20例BP180抗体均阴性;BP组20例患者BP180抗体均为阳性,滴度为128.347±54.678;BP+ ND组20例患者所有结果均为阳性,滴度为143.482±72.568;ND组20例患者中,7例BP180抗体阳性,包括脑出血4例、脑梗塞3例,其中BP180抗体高滴度(39.638)出现在1例脑梗塞患者.4组间BP180抗体滴度比较,差异有统计学意义(F=55.624,P＜0.05),其中,BP组与BP+ ND组间差异无统计学意义(P=0.878),BP组与ND组、BP组与健康对照组、BP+ ND组与ND组、BP+ ND组与健康对照组、ND组与健康对照组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ND患者血清BP180抗体增高,可能提示发生BP的可能.
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BP180相关自身免疫性水疱病的研究进展
BP180相关自身免疫性水疱病包括大疱性类天疱疮、扁平苔藓样类天疱疮、线状IgA大疱性皮病、妊娠类天疱疮和瘢痕性类天疱疮.BP180胞外区含有多个自身抗体反应的位点,目前研究显示,BP180上相关自身免疫性水疱病靶位呈现出异质性,并且同一种疾病不同临床表现也与靶位异质性有关,然而异质性机制仍有待于进一步研究和探讨.
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自身免疫性大疱性皮肤病患者免疫学检测结果分析
目的 分析酶联免疫吸附实验(ELISA)检测BP180、Dsgs抗体和直接免疫荧光(DIF)检测结果对自身免疫性大疱性皮肤病的诊断价值.方法 对32例天疱疮患者,24例大疱性类天疱疮患者,30例排除大疱性皮肤病患者和14例疑似大疱性皮肤病患者,用ELISA方法检测其外周血BP180、Dsg1、Dsg3抗体,采其皮损周围正常皮肤进行DIF实验.结果 Dsgs抗体检测在天疱疮组阳性率为100％,BP180抗体检测在大疱性类天疱疮组阳性率为83％,DIF检测在天疱疮组和大疱性类天疱疮组阳性率均为75％.结论 ELISA方法检测自身抗体和DIF实验对大疱性皮肤病具有诊断价值,但需要结合临床表现和组织病理结果.
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131例神经系统疾病患者血清中抗BP 180和抗BP 230抗体的检测
目的: 了解神经系统疾病患者血清中抗BP180、抗BP230和抗基底膜带抗体的阳性率.方法: 收集神经系统疾病患者和正常对照血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清中抗BPl80NC16a抗体和抗BP230抗体水平,间接免疫荧光(IIF)检测抗基底膜带抗体水平.结果: 共收集131例神经系统疾病患者血清(脑卒中109例,脑肿瘤15例,其他神经系统疾病7例)和131例正常对照血清.病例组中抗BP180NC16a抗体阳性率为11.45%,高于对照组的3.05%,差异具有统计学意义(P=0.009),病例组中抗BP230抗体阳性率5.34%,与对照组2.29%比较,差异无统计学意义(P=0.20).IIF检测抗基底膜带抗体结果均为阴性.结论: 抗BP180NC16a抗体在神经系统疾病患者中有较高的阳性率,可能与神经系统疾病患者合并大疱性类天疱疮相关.
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大疱性类天疱疮免疫学研究进展
大疱性类天疱疮是一种好发于老年人的自身免疫性表皮下大疱病,血清中存在针对靶抗原BP230和BP180的自身抗体,自身抗体识别的靶抗原表位主要位于BP180分子胞外的非胶原编码区NC16A区段.此外,细胞因子与补体的活化亦参与皮肤损伤和水疱形成.BP可能存在遗传易感性,HLA-II类基因HLA-DR和DQ在BP的发生和发展过程中起一定作用.
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大疱性类天疱疮患者嗜酸性粒细胞水平的检测及与BP180数值的相关性分析
目的 检测大疱性类天疱疮患者BP180和血常规中嗜酸性粒细胞水平,进行相关性分析,为临床治疗提供依据.方法 检测332例大疱性类天疱疮患者血常规中嗜酸性粒细胞百分比水平,ELISA方法测定116例大疱性类天疱疮患者的BP180数值.结果 ≥60岁的大疱性类天疱疮患者嗜酸性粒细胞百分比水平男女患者之间差异无统计学意义(P＞0.05),332例大疱性类天疱疮患者嗜酸性粒细胞百分比水平男女患者之间差异无统计学意义(P＞0.05),BP180和血常规中嗜酸性粒细胞水平呈显著正相关(r =0.327,P＜0.05).结论 嗜酸性粒细胞的水平可能与大疱性类天疱疮患者的病情相关.
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BP180抗原与自身免疫性大疱性皮肤病的研究进展
BP180是半桥粒的主要组成成分,在表皮与真皮间发挥重要的连接作用,是多种自身免疫性大疱性皮肤病的致病抗体识别并攻击的自身抗原,在这类疾病的诊断与治疗方面都有重要作用.本文对BP180的功能、相关疾病的发病机制及治疗前景的新进展做一综述.
关键词： BP180 大疱性类天疱疮抗原2 ⅩⅦ型胶原 大疱性类天疱疮 -
大疱性类天疱疮患者噬菌体抗体库的构建及抗BP180-NC16A抗体筛选
目的 构建噬菌体抗体库并筛选抗BP180-NC16A抗体.方法 以大疱性类天疱疮(BP)患者外周血淋巴细胞为基因来源,扩增多样性的轻链和重链Fd段基因,构建Fab段表面展示的噬茵体抗体库,用BP180分子的NC16A片段为抗原对抗体库进行筛选并对筛选得到的抗体用ELISA,Western blot和免疫荧光等方法进行鉴定.结果 经过轻、重链基因的重组和转化,获得了库容为5×107的噬茵体抗体库.以BP180-NC16A抗原进行"亲和吸附-洗脱-扩增"淘筛,获得2株特异性抗体.结论 利用噬菌体抗体库技术成功制备了抗BP180抗体,为深入研究BP自身抗体、探讨新的治疗策略奠定了基础.
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人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A单链抗体的构建及表达
目的 用基因工程技术制备人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180单链抗体(scFv),并对其抗原结合特异性等进行鉴定.方法 利用基因重组技术对从噬菌体抗体库中克隆的人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A抗体Fab片段进行改造获得scFv,进行DNA测序,同时用ELISA法鉴定其抗原结合活性和特异性,免疫荧光技术检测scFv与人皮肤组织BP180抗原的结合情况.结果 成功构建了抗BP180-NC16A scFv,并获得可溶性表达,DNA测序结果表明,单链抗体的Vλ和VH基因序列完全正确,ELISA法证实可溶性表达的scFv抗体具有良好的抗原结合活性和特异性.免疫荧光检测该抗体在人皮肤表皮、真皮交界处基底膜带呈现线状结合条带.结论 成功构建并表达了人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A的单链抗体,为进一步研究该抗体的生物学作用奠定了基础.
