首页 > 文献资料
-
缺氧状况下Rho GTPases的表达和活性变化及其与肿瘤血管生成关系的研究
目的探讨Rho GTPases在缺氧状态下的表达和活性变化以及与缺氧诱导的肿瘤血管生成的关系.方法提取胃癌细胞AGS、SGC7901和肝癌细胞HepG2的总RNA,采用半定量RT-PCR检测缺氧状况下Rho GTPases家族分子的mRNA表达水平;应用Rho蛋白活性检测试验进一步检测其活性;Western blot检测肿瘤血管生成相关分子HIF-1α、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、p53和PTEN的表达水平.结果缺氧状况下,多种肿瘤细胞系中Rac1的mRNA表达水平均明显增高;Rac1活性迅速升高,约3 h达到高峰,且其活性与HIF-1α、VEGF呈正相关;而与p53、PTEN呈负相关.结论 Rho家族蛋白分子Rac1在缺氧诱导下被激活,且Rac1可能与缺氧诱导的肿瘤血管生成相关.
关键词： 缺氧 Rho GTPases Rac1 肿瘤血管生成 -
Rho GTPases研究进展及与肿瘤的关系
Ras相似物GTP酶(Rho GTPases)是Ras超家族的一个主要分支,在细胞的信号转导通路中起着非常重要的作用.Rho蛋白的过度表达与肿瘤的发生、发展密切相关,Rho GTPases参与细胞骨架重构、细胞运动、基因转录调控、细胞周期调控等,从而在肿瘤的增殖及凋亡中发挥作用.通过对其家族成员信号转导机制的研究,为肿瘤的治疗提供有效的靶点.
关键词： Rho GTPases 肿瘤 信号转导 -
8 w有氧运动调控成年大鼠皮层Rho GTPases活性
目的 观察8 w有氧运动对成年大鼠皮层Rho GTPases的影响.方法 (1)选用30只3月龄、雄性、Wistar大鼠,经过1 w的适应性跑台训练后,随机分为安静对照组和有氧运动组,每组15只.运动组大鼠进行8 w跑台运动,前2 w运动速度为10 m/min,跑台坡度为5％,每天运动30 min;后6 w运动速度为22 m/min,跑台坡度为10％,每天运动60 min;后一次运动训练48 h后取材.(2)采用Western印迹方法检测两组大鼠皮层RhoA、Rac1和Cd42蛋白表达.(3)采用Real Time PCR方法检测两组大鼠皮层RhoA、Rac1和Cdc42 mRNA表达.(4)采用突触素作为突触特异性的标记物,应用免疫组织化学法和免疫荧光技术检测两组大鼠皮层的突触密度.结果 (1)同安静对照组相比,有氧运动组大鼠皮层内RhoA蛋白表达下调、RhoA mRNA表达上调(P＜0.01);Rac1蛋白、Rac1 mRNA、Cdc42蛋白表达上调,Cdc42 mRNA表达下调(P＜0.01或P＜0.001).(2)同安静对照组相比,有氧运动组大鼠皮层的突触密度增多(P＜0.05).结论 8 w有氧运动对成年大鼠大脑皮层参与细胞骨架调节的Rho GT-Pases具有调控作用,抑制RhoA表达,促进Rac1和Cdc42表达,进而增加成年大鼠大脑皮层内的突触密度.
关键词： 有氧运动 大脑皮层 神经发生 Rho GTPases -
Rho GTPases与肿瘤侵袭转移相关性的研究进展
Rho GTPases属小分子量GTPases,作为信号传导通路中重要的“分子开关”,调控细胞形态、骨架重建、迁移及细胞周期与凋亡等诸多过程.近来的研究表明,Rho GTPases家族成员在多种恶性肿瘤中异常表达,并通过调控上皮细胞极性丧失、细胞-细胞间的连接及黏附、细胞骨架重组和迁移运动、细胞外基质的重塑、细胞进入血管淋巴管的能力等方面参与肿瘤细胞的侵袭转移.深入研究Rho GTPases在肿瘤侵袭转移中的作用意义重大,Rho GT-Pases将有望成为判断肿瘤侵袭转移性发展的新指标,并为肿瘤治疗提供新靶点、新方向.
关键词： Rho GTPases 肿瘤 侵袭 转移 -
脑源性神经营养因子对苯丙氨酸诱导的Cdc42、Rac1和RhoA蛋白表达的影响
目的 观察脑源性神经营养因子(BDNF)对苯丙氨酸诱导的神经元树突的生长及其Cdc42、Rac1和RhoA蛋白表达的影响.方法 胎鼠大脑皮层神经元培养3 d后,加入0.9 mmo/L苯丙氨酸或同时加入100 ng/mlBDNF诱导,免疫组化标记神经元突起并计数,Western blotting检测Cde42、Rac1和RhoA蛋白表达.结果 神经元在苯丙氨酸诱导2 d后,苯丙氨酸减少了神经元树突数(P<0.01),而同时加入BDNF可改善苯丙氨酸诱导的神经元树突的减少(P<0.01).并且BDNF抑制苯丙氨酸诱导的Cdc42、Racl和RhoA蛋白表达下调.结论 BDNF可能通过影响Cdc42、Rac1和RhoA表达改善苯丙氨酸所致的神经元损伤.BDNF对治疗苯丙酮尿症脑损伤可能具有潜在的应用价值.
关键词： 苯丙氨酸 脑源性神经营养因子 神经元树突 Rho GTPases -
Rho GTPases途径在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
目的:探讨Rho GTPases在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义.方法:应用RT-PCR和免疫组织化学法检测36例NSCLC组织Rho GTPases信号转导途径中的RhoC、E-钙黏附素、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2, MMP-2)和MMP-9的表达.通过绘制Kaplan-Meier生存曲线分析RhoC mRNA的表达与患者预后的关系.结果: RhoC mRNA在NSCLC组织和癌旁正常组织中的表达存在差异(P<0.01),RhoC mRNA的表达与患者的性别、年龄、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关,而与不同TNM分期有关(P<0.05).RhoC蛋白与MMP-2蛋白的表达呈正相关(r=0.474,P=0.003).RhoC mRNA低表达组患者的生存时间长于高表达组患者,但2者之间差异无统计学意义. 结论:RhoC mRNA的高表达可能与NSCLC的发生和发展有关,也可能与NSCLC的早期及中期浸润和转移有关.
关键词： 癌 非小细胞肺 反转录聚合酶链反应 免疫组织化学 Rho GTPases -
苯丙氨酸对胚鼠大脑皮层神经元Rho GTPases基因表达的影响
目的研究苯丙氨酸对大脑皮层神经元Rho GTPases(Rac1、Cdc42、RhoA)mRNA体外表达的影响.方法在体外培养3 d的原代培养胚鼠大脑皮层神经元中,加入高浓度苯丙氨酸诱导18 h,用实时荧光定量PCR方法,检测苯丙氨酸对胚鼠大脑皮层神经元Rac1、Cdc42、RhoA基因表达的影响.结果胚鼠大脑皮层神经元经苯丙氨酸诱导后,Rac1、Cdc42、RhoA mRNA表达分别是对照组的37.0%、29.8%、30.0%(P＜0.01).结论高浓度苯丙氨酸通过影响Rho GTPases基因表达,进而干扰神经元突起的生长和突触的连接,可能是苯丙酮尿症导致患者智力落后机制之一.
关键词： 苯丙氨酸 Rho GTPases 基因表达 神经元 -
Rho GTPase对细胞骨架及信号通路的多重影响
Rho GTPase基本的功能是结合和水解鸟嘌呤核苷酸,目前已从哺乳动物细胞中分离出16种不同的Rho GTPases,其中以Rho、Rac和Cdc42为人们所关注.研究发现Rho GTPases参与基因转录、细胞周期进程的调控及多条信号通路的调节,与细胞凋亡、肿瘤侵润及细胞骨架构成关系密切.现普遍认为Rho GTPases是调节细胞功能的一类重要蛋白分子,越来越多的Rho家族成员及其调控的蛋白数量逐渐被发现和认识.
关键词： Rho GTPases 细胞骨架 信号通路 -
Rho GTPases对肾小球足细胞特异性裂孔膜骨架蛋白的调控作用
肾小球足细胞是一种呈高度分化、具有独特结构和功能的上皮细胞,且是构成肾小球滤过膜的重要结构之一.足突的形态变化对于维持足细胞的正常生理功能尤其重要,而前者与肌动蛋白的排列密切相关.Rho GTPases参与多种细胞生命活动,在细胞骨架的调控中发挥核心作用.因此,本文就RhoGTPases对足细胞特异性裂孔膜(slit diaphragms,SD)骨架蛋白的调控作用进行综述.
关键词： 足细胞 Rho GTPases 细胞骨架蛋白 裂孔膜 -
Rho GTPase在信号转导和细胞骨架中的作用
Rho GTPases参与多种重要的细胞生命活动,如肌动蛋白细胞骨架的重构、细胞黏附、细胞运动、囊泡运输、转录激活、基因表达和细胞周期的调控等.当Rho GTPase蛋白水平改变,活性状态改变,效应蛋白丰度改变后,出现异常的Rho 信号,从而影响细胞骨架重组使细胞迁移.调节这些生物信号的转导通路非常复杂, 因此,Rho GTPases已成为近年来的研究热点.
关键词： Rho GTPases 信号转导 细胞骨架 -
生长锥导向分子Slit/Robo对神经生长的调控作用
Slit/Robo是一对生长锥导向分子.Slit蛋白能指导轴突寻找延伸目标,起到领航的作用,还能促进轴突分枝,并能控制轴突迁移.Robo(Roundabout)是Slit相应的受体.在果蝇体内,Slit/Robo能阻止神经细胞穿越中线;在脊椎动物,Slit/Robo以特殊的方式引导轴突生长,并决定轴突交叉发生的部位.Slit/Robo相互作用可能通过诱导胞内Rho GTPases的级联反应来影响生长锥的生长.
关键词： 生长锥 Slit/Robo Rho GTPases -
大鼠海马发育过程中Rho GTPases相关信号分子mRNA的表达
目的 探讨Rho GTPases相关信号分子的发育规律.方法 RT-PCR法检测大鼠发育不同阶段Rho-A、Rac-1、CRMP-1和Tub β3 mRNA的表达.结果 RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合.内参照β-actin的PCR产物电泳条带在各个阶段均呈高表达.Rho-A和Rac-1的表达有相似的变化规律,随着海马发育呈明显的阶段性,表达的高峰在胚胎、幼年和老年阶段,而新生阶段和成年阶段处于相对低表达阶段;Rac-1的表达量在海马发育的各个阶段均超过Rho-A的表达量.CRMP-1和Tub β3的表达从胚胎到成年的各个阶段与CRMP-1的表达具有相似的变化趋势,以胎鼠、新生大鼠和幼年大鼠表达较多,但老年阶段CRMP-1的表达较成年阶段显著升高(P＜0.05),而Tub β3在老年阶段停留在成年阶段的水平.结论 大鼠海马发育过程中,Rho-A和Rac-1呈阶段性高表达,CRMP-1和Tub β3的表达从胚胎到成年逐渐减少,但老年阶段CRMP-1表达再次增多.
关键词： Rho GTPases G蛋白 坍塌反应调节蛋白-1 微管 海马 发育 大鼠 -
洛伐他汀对乳腺癌细胞Rho GTPases活性及细胞骨架形成的影响
目的探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀对MCF-7乳腺癌细胞Rho GTPases活性及细胞骨架形成的影响.方法采用逆转录-PCR检测Rho、Rac2和RhoGDI mRNA的表达水平,放射自显影方法分析Rho GTPases活性,激光共聚焦和透射电镜观察微丝和中间丝的形成.结果 4～16 μmol/L的LOV处理MCF-7细胞48～72 h后,RhoA mRNA表达均无明显变化,而Rac2 mRNA和RhoGDI mRNA随洛伐他汀的处理,各剂量组mRNA表达均呈增加趋势;放射自显影结果发现,LOV处理细胞72 h后,各处理组Rho GTPases结合的GTP量明显低于对照组;此外,LOV能明显促进MCF-7细胞微丝和中间丝的形成,该作用有一定剂量-效应和时间依赖关系.结论洛伐他汀处理MCF-7乳腺癌细胞,因妨碍Rho GTPases蛋白转录后的香叶酯焦磷酸活化修饰而导致Rho GTPases活性降低,但它却能明显促进MCF-7细胞骨架的形成.
关键词： 洛伐他汀 Rho GTPases 香叶酯焦磷酸 细胞骨架 -
G蛋白偶联受体激活Rho GTPases的研究
G蛋白偶联受体是细胞表面一类重要的受体蛋白.它将各种胞外刺激传导入胞内,促使位于G蛋白下游的Rho GTPases活化,活化的Rho GTPases作用于效应因子后调控MAPK及转录因子的活性,从而调控细胞的增殖、分化或调亡.但这一复杂的词控机制还未被完全了解,本文拟从GPCRs的多样性和G蛋白α、β和γ亚基在信号通路中不同程度的激活,来探讨G蛋白偶联受体活化RhoGTPases的可能机制.
关键词： G蛋白偶联受体 Gα亚基 Gβγ亚基 Rho GTPases -
辛伐他汀抑制RhoA蛋白表达、Rho GTPase 活性表达逆转兔心室重构
目的:在兔前后负荷增加心力衰竭模型,观察辛伐他订对心肌肥厚、心功能的影响,探讨辛伐他订抑制心肌肥厚、改善心功能的机制.方法:24只新西兰白兔分为4组,一组假手术组,为健康对照.2、3、4组通过破坏主动脉瓣和缩窄腹主动脉,增加左心室前、后负荷,建立慢性心力衰竭模型;2组:心力衰竭对照组;3组:心力衰竭早干预组,术后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察8周;4组:心力衰竭晚干预组:手术4周后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察4周.各组术后及观察结束时行超声心动图检查;Western blot分析心肌细白膜RhoA蛋白表达,[γ-32P]GTP结合分析检测Rho GTPase活性.结果:早干预组及晚干预组室间隔厚度(IVST)、左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室后壁厚度(LVPwd)、左心室收缩期内径(LVIDs)、心脏质量(HW)、左心室质量(LVW)、心脏/体质量比(HW/BW radio)、显著低于心力衰竭对照组,射血分数(EF)、左室长轴缩短率(FS)显著高于心衰对照组.早干预组左心室/体质量比(LVW/BW radio)显著低于心力衰竭对照组.心力衰竭组心肌细胞膜RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性明显高于健康对照组,辛伐他汀早干预组及晚干预组心肌细胞膜RhoA蛋白表达及Rho GTPase活性显著低于心力衰竭对照组.结论:辛伐他订通过抑制RhoA蛋白由胞浆转至新胞膜、抑制Rho GTPase活性而抑制心肌肥厚,改善心功能.
关键词： 辛伐他汀 心肌肥厚 RhoA Rho GTPases 心力衰竭
