首页 > 文献资料
-
安络化纤丸联合γ-干扰素对血吸虫肝纤维化鼠TIMP-1及TGF-β1的影响
目的 了解安络化纤丸+γ-干扰素(IFN-γ)对实验性血吸虫病肝纤维化指标TIMP-1、TGF-β1表达的影响.方法 将36只昆明小鼠随机分为正常对照组,感染对照组及IFN-γ+安络化纤丸组;采用日本血吸虫尾蚴40条/只鼠攻击感染小鼠建立血吸虫性肝纤维化模型,IFN-γ+安络化纤丸联合干预连续8周,观察肝组织纤维化程度及虫卵结节变化;SABC免疫组织化学检测TIMP-1的表达;实时荧光定量法检测TGF-β1mRNA的含量.结果 安络化纤丸+IFN-γ组小鼠肝组织虫卵肉芽肿个数较感染对照组少,虫卵肉芽肿平均直径较感染对照组小,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);安络化纤丸+IFN-γ组小鼠肝组织TIMP-1的水平和TGF-β1mRNA的相对量均较感染对照组显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 安络化纤丸+IFN-γ组虫卵肉芽肿减小,数目减少,肝纤维化程度减轻可能与其能减少TIMP-1的表达,下调TGF-β1的转录水平有关.
-
大鼠TGF-β1 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立
目的建立检测大鼠TGF-β1 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法.方法摸索SYBRGreen Ⅰ工作液的配制方法,筛选PCR反应液,优化反应中引物和MgCl2的浓度,以actin为对照,建立大鼠TGF-β1 mR-NA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法并检测大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA表达水平.结果SYBR GreenⅠ工作液,40倍水溶液稳定性好,佳反应稀释度为1:10000.大鼠TGF-β1表达水平的SYBR Green荧光定量PCR方法,TGF-β1和actin的佳MgCl2反应浓度分别为2.5 mM和3.5 mM,引物浓度分别为0.8 μM和0.5 μM,特异扩增产物的熔解温度分别为88.1和88.6℃,因此选择在85℃时收集荧光信号.正常大鼠TGF-β1的Ct值在29.03,actin的Ct值在24.86,扩增效率分别为0.995和1.08.结论通过优化反应条件和特异性分析,成功地建立了特异、敏感的大鼠TGF-β1 mRNA SYBRGreen Ⅰ荧光定量RT-PCR.SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR快速、敏感、特异、经济,可以满足临床和科研的需要.
-
硒和维生素E缺乏诱导大鼠心脑组织转化生长因子-β1表达增强的研究
目的从TGF-β1 mRNA基因调控变化的角度阐明硒(Se)和维生素E(VE)缺乏对大鼠心脑组织损伤的作用机制.方法通过Se和VE缺乏的半合成人工饲料喂养大鼠,建立Se和VE缺乏疾病大鼠动物模型.并采用RT-PCR检测TGF-β1在心脑组织中mRNA表达变化特点.结果低Se低VE组大鼠心肌可见散在微小灶状心肌坏死,脑组织海马、皮层可见神经细胞数量相对减少,部分神经细胞周围间隙增宽.Se和VE单项缺乏及联合缺乏TGF-β1 mRNA表达均增高.以Se和VE联合缺乏变化显著.结论 Se和VE缺乏可诱导大鼠心脑组织TGF-β1 mRNA表达上调,是缺血缺氧性心肌坏死和脑组织损伤的原因之一.Se和VE作为抗氧化微量营养素具有细胞保护作用,有实际应用价值.
关键词： 低Se 低VE TGF-β1 mRNA 抗氧化微量营养素 -
矩形髓内钉和接骨板内固定对兔骨折局部TGF-β1 mRNA表达的影响
目的:探讨矩形髓内钉(RIN)对骨折愈合过程中骨折局部TGF-β1 mRNA表达的影响.方法:运用兔胫骨骨折内固定模型,用原位杂交方法结合计算机图像分析系统,检测TGF-β1的阳性染色强度、阳性面积比及阳性指数,对骨痂中TGF-β1 mRNA的分布和含量进行量化分析,对RIN与不锈钢接骨板(SPL)进行对比研究.结果:在骨折早期,RIN组和SPL组局部的细胞及间质中TGF-β1 mRNA均无表达;7 d后间充质细胞、成骨细胞、成软骨细胞中有TGF-β1 mRNA阳性表达.两组TGF-β1 mRNA阳性染色强度、阳性面积比及阳性指数术后14 d高,28 d低,同期比较除阳性面积比术后7 d外,其余RIN组均高于SPL组,组间差异显著(P<0.05, P<0.01).结论:RIN较SPL更能促进细胞合成分泌TGF-β1,有利于胫骨骨折的愈合.
关键词： 矩形髓内钉 骨板 骨折 TGF-β1 mRNA -
兔角膜重度碱烧伤后羊膜移植的疗效观察
目的观察兔角膜重度碱烧伤后羊膜移植的疗效.方法将18只新西兰白兔随机分成3组,每组6只,所有兔眼建立重度碱烧伤模型,左眼羊膜移植,右眼作为对照.分别于1、2、3个月,通过光镜、电镜以及原位杂交方法观察角膜情况.结果 1个月时,羊膜移植组上皮细胞修复优于对照组,基质浸润轻于对照组,基质中TGF-β1 mRNA的表达低于对照组,而新生血管增生情况两者无差别.2个月时,除上皮细胞修复羊膜移植组优于对照组外,其他与对照组相比无差异.3个月组情况与2个月组相似.结论羊膜移植治疗兔角膜重度碱烧伤,早期可促进角膜上皮细胞修复,并能部分减轻基质浸润.
关键词： 角膜 碱烧伤 羊膜移植 成纤维细胞 TGF-β1 mRNA -
归芪方对糖尿病大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达的影响
目的 探讨归芪方对糖尿病(DM)大鼠心肌组织转化生长因子-β1 (TGF-β1) mRNA表达的影响.方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素 (STZ) 建立DM模型,给予归芪方或贝那普利灌胃治疗.8周后测定各组血糖、血脂、心脏重量、体重的改变,荧光定量PCR法检测心肌TGF-β1 mRNA的表达.结果 归芪方治疗组大鼠血糖、血脂异常明显改善;心肌TGF-β1 mRNA表达,归芪方优于贝那普利组 (P＜0.01).结论 归芪方可调节糖尿病大鼠受损的糖、脂代谢异常,逆转心肌肥厚,抑制心肌TGF-β1 mRNA的表达,改善心功能,延缓糖尿病心血管并发症的进展.
关键词： 糖尿病 归芪方 心肌病 TGF-β1 mRNA -
载辛伐他汀聚合物植入拔牙窝对TGF-β1 mRNA表达的影响及意义
目的:探讨局部应用辛伐他汀促进拔牙术后牙槽骨修复的机制.方法:采用溶剂挥发法制备携带辛伐他汀的PLGA,以单纯PLGA为对照,即刻植入56只Wistar大鼠切牙拔除的拔牙窝内,其中实验组28只,对照组28只,分别于术后5 d、1周、2周和4周各处死7只,4%多聚甲醛灌流固定,分离下颌骨,10% EDTA脱钙,常规脱水、透明、石蜡包埋、切片和HE染色.设计针对TGF-β1 mRNA的寡核苷酸探针,采用原位杂交技术检测拔牙窝TGF-β1 mRNA的表达.结果:实验组各组淋巴细胞浸润明显少于相同时间的对照组,而骨形成则比对照组明显.实验组术后1周阳性细胞数为13.0±2.74,术后2周为29.0±9.06,术后4周为29.8±9.06,对照组比较P＜0.05,差异有统计学意义.结论:辛伐他汀通过上调TGF-β1 mRNA的表达促进拔牙窝牙槽骨的修复.
关键词： 辛伐他汀 拔牙窝 牙槽骨 修复 TGF-β1 mRNA -
胃癌组织TGF-β1、Smad7与ki-67 mRNA表达及其相关性分析
目的：探讨TGF-β1、Smad7与ki-67 mRNA在胃癌中的表达及其相关性。方法：手术切除经病理证实为胃癌组织标本60例，正常胃组织20例，采用RT-PCR技术检测TGF-β1 mRNA、Smad7 mRNA和ki-67 mRNA表达水平。结果：TGF-β1、Smad7和ki-67 mRNA在正常胃组织中的相对含量均低于胃癌组织中的表达（P＜0．05）；三者在高中分化胃癌组织的相对含量均低于低分化胃癌组织（P＜0．05）；TGF-β1 mRNA、Smad7 mRNA和ki-67 mRNA在无淋巴结转移者的表达低于有淋巴结转移者；TNM分期：Ⅰ＋Ⅱ期的表达低于Ⅲ＋Ⅳ期（P＜0．05）；TGF-β1 mRNA、Smad7 mRNA、ki-67 mRNA三者在胃癌中的表达经直线相关分析显示呈正相关。结论：TGF-β1、Smad7与ki-67 mRNA的表达与胃癌的发生、发展及分化程度密切相关。
-
γ-IFN对于兔盆腔常规分割照射后输尿管放射性损伤及纤维化的影响
目的:探讨γ-IFN对兔盆腔常规分割照射后输尿管放射性损伤及纤维化的影响.方法:建立兔放射性输尿管损伤的动物模型,52只新西兰兔随机分为常规照射组、组及正常对照组,除正常对照组外其余兔盆腔均接受6MV-X线照射.γ-IFN组从照射后第5天给予γ-IFN250,000U·kg-1,肌注每周1次,共5次.常规照射组给予5ml·kg-1的生理盐水.照射后4周,8周,12周,16周处死实验兔,取其照射范围内的输尿管组织.用HE染色,原位杂交染色及免疫组化方法分析γ-IFN对于放射性输尿管损伤及纤维化影响.结果:HE染色观察放射线导致输尿管损伤的组织结构变化,γ-IFN组与单纯照射组比较,照射后4,8,12周其损伤程度均有显著性差异(P<0.05),16周则无显著性差异(P>0.05);TGF-β1 mRNA原位杂交实验,γ-IFN组输尿管黏膜的TGF-β1 mRNA表达在照射后4,8,12,16周低于常规照射组,有显著性差异(P<0.05),与正常对照组比较也有显著性差异(P<0.05);Ⅲ型胶原免疫组化结果显示γ-IFN组与单纯照射组均存在显著性差异(P<0.05),较正常对照组差异有显著性(P<0.05).结论:γ-IFN能够减轻实验兔放射性输尿管损伤,抑制放射后输尿管黏膜TGF-β1 mRNA的升高,降低Ⅲ型胶原的表达,减轻放射性输尿管损伤及纤维化的形成.
关键词： γ-IFN 放射性输尿管损伤 TGF-β1 mRNA Ⅲ型胶原 兔 -
电针联合扶正理气合剂对大鼠肝癌生长及转移的影响及相关机制
目的 观察电针联合扶正理气合剂对大鼠肝癌生长及转移的影响并探讨其作用机制.方法 雄性Wistar大鼠200只,随机分为5组.以二乙基亚硝胺(DEN)灌胃诱导大鼠肝癌模型,电针组造模同时给予电针足三里、关元、内关、三阴交、肝俞穴治疗,扶正理气合剂组给予扶正理气合剂灌胃,针药联合组则予上述电针和扶正理气合剂治疗,共16周.造模16周后处死大鼠取肝脏组织标本,肉眼及光镜下观察肿瘤生长和转移情况；免疫组化法测定肝组织NF-κB活性及微血管密度(MVD),RT-PCR法检测肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,放射免疫法测定肝组织活性氧(ROS)、抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、脂质过氧化产物(LPO)含量.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠的肿瘤生长和转移参数、ROS、LPO含量、NF-κB活性、TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA、MVD表达显著增加(P＜0.01),而T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性明显下降(P＜0.01)；与模型组比较,各治疗组大鼠的肿瘤生长和转移参数、ROS、LPO含量、NF κB活性、TGF-β31 mRNA、VEGF mRNA及MVD表达显著下降,而T AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性明显上升(P＜0.01),联合治疗组上述指标优于其他治疗组(P＜0.05).NF-κB活性与TGF-β1 mRNA及VEGF mRNA呈正相关关系(r1 =0.554,P＜0.05；r2 =0.572,P＜0.05).结论 电针和扶正理气合剂均能显著降低实验性肝癌大鼠的NF－κB活性、TGF-β1 mRNA及VEGF mRNA及MVD表达,从而降低肿瘤生长和转移参数,这与其清除自由基有密切关系.
