首页 > 文献资料
-
胆碱能系统功能紊乱与帕金森病轻度认知功能障碍研究进展
帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见于中老年人的神经系统退行性变疾病,主要以黑质纹状体多巴胺能神经元变性、缺失和路易小体形成为病理特征.除运动迟缓、肌强直、静止性震颤等运动症状外,非运动症状,如认知功能障碍、自主神经功能障碍、疲劳、抑郁、焦虑等在PD中也非常常见.其中PD认知功能障碍分为PD轻度认知功能障碍(PD mild cognitive impairment,PD-MCI)及PD痴呆(Parkinson disease dementia,PDD).PD-MCI是指PD正常认知功能和PDD之间的一种中间状态,在非痴呆的PD患者中比较常见,患病率为27％[1-2].PD-MCI是发展为PDD的危险因素之一,在疾病进展过程中,PD-MCI发展为PDD的风险在48％～78％,10年以后,50％PD患者会发展成PDD,20年后则达到80％[1-3].因此,研究PD-MCI对理解和预测PDD的过程非常重要.
-
巨噬细胞胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响
目的 探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响.方法 分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组.采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)mRNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性.结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).3组之间巨噬细胞AChE mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05).与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368).结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤.调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向.
-
烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响
目的 评价烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠60只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=20)∶假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)和烟碱预先给药组(N组).S组丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎；IR组采用丝线结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型.N组结扎前30 min,经右颈静脉注射烟碱400μg/kg,余操作同IR组,S组和IR组右颈静脉注射等量生理盐水.各组随机取10只大鼠于缺血前(T0)、缺血30 min(T1)和再灌注30 min(T2)、120 min(T3)时经生物机能实验系统记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左室内压上升/下降大变化速率(±dp/dtmax)、HR和MAP.各组其余10只大鼠于再灌注60 min时采集右颈动脉血样,采用ELISA法测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和TNF-α浓度.结果 与S组比较,IR组T23时MAP和LVSP、T13时HR、LVDP和±dp/dtmax降低,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度升高,N组T1-2时LVDP、T1-3时HR和±dp/dtmax降低,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度升高(P＜0.05)；与IR组比较,N组T3时MAP、HR、LVSP、LVDP和±dp/dtmax升高,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度降低(P＜0.05).结论 烟碱预先给药通过激活胆碱能抗炎通路,抑制炎性反应,可显著减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,从而改善心功能.
-
烟碱对内毒素血症大鼠凝血功能的影响
目的 探讨烟碱对内毒素血症大鼠凝血功能的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠96只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=24):生理盐水对照组(NS组)、内毒素组(LPS组)、烟碱组(NIC组)、α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)拮抗剂组(α-BGT组).LPS组、NIC 组和α-BGT组经股静脉注射脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素血症模型.α-BGT组于注射LPS前45min腹腔注射α-BGT 1μg/kg,注射α-BGT后15 min腹腔注射烟碱400 μg/kg.NIC组除用等容量生理盐水替代α-BGT外,余操作同α-BGT组.LPS组除用等容量生理盐水替代烟碱外,余操作同NIC组.NS组除用等容量生理盐水替代LPS外,余操作同LPS组.于注射LPS前、注射后2、4、6 h时采集腹主动脉血样,检测血浆凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、抗凝血酶(AT)、血管性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、D-二聚体、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和血小板计数.结果 与NS组比较,LPS组和α-BGT组PT、APTT延长,血浆Fib、AT水平降低,血小板计数减少,血浆PAI-1、WF、D-二聚体与TNF-α水平升高(P＜0.05).与LPS组比较,NIC组PT、APTT缩短,血浆Fib和AT水平升高,血小板计数增加,血浆PAI-1、vWF、D-二聚体和TNF-α水平降低(P＜0.05).与NIC组比较,α-BGT组PT和APTT延长,血浆Fib和AT水平降低,血小板计数减少,血浆PAI-1、vWF、D-二聚体和TNF-α水平升高(P＜0.05).结论 烟碱可抑制内毒素血症大鼠过度激活的凝血反应,缓解抗凝血与纤维蛋白溶解功能的抑制状态,作用机制可能与其结合外周α7烟碱型乙酰胆碱受体激活胆碱能抗炎通路,从而减少促炎性细胞因子释放有关.
-
β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制内毒素诱导人肺微血管内皮细胞NF-κB激活中的作用
目的 评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制内毒素诱导人肺微血管内皮细胞NF-κB激活中的作用.方法 将人肺微血管内皮细胞以1× 105个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4 ml/瓶)中,采用随机数字表法,将其分为5组(n=20):空质粒转染组(C组)、脂多糖(LPS)+空质粒转染组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚+LPS+空质粒转染组(P+LPS组)、LPS+含β-抑制蛋白-1短发卡RNA(shRNA)的质粒转染组(LPS+shRNA组)和盐酸戊乙奎醚+LPS+含β-抑制蛋白-1shRNA的质粒转染组(P+LPS+shRNA组).以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L B-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞,孵育24 h时加入终浓度为2μg/ml的盐酸戊乙奎醚,孵育1h时加入终浓度为0.1μg/ml的LPS,孵育1h,进行下述指标的测定.取上清液,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,收集细胞悬液,测定血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达、NF-κB活性、NF-κB抑制蛋白(I-κB)及β-抑制蛋白-1的表达水平.结果 与C组比较,LPS组和LPS+shRNA组上清液LDH活性升高,VCAM-1表达上调,NF-κB活性升高,I-κB和β-抑制蛋白-1的表达下调(P＜0.01);与LPS组比较,P+LPS组上清液LDH活性降低,VCAM-1表达下调,NF-κB活性降低,I-κB和β-抑制蛋白-1的表达上调(P＜0.05或0.01),P+LPS+shRNA组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组上清液LDH活性升高,VCAM-1表达上调,NF-κB活性升高,I-κB和β-抑制蛋白-1的表达下调(P＜0.05或0.01).结论 盐酸戊乙奎醚完全通过上调β-抑制蛋白-1表达抑制内毒素诱导人肺微血管内皮细胞NF-κB激活.
-
M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用:与MAPK信号通路的关系
目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关系.方法 将人肺微血管内皮细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4 ml/瓶)中,采用随机数字表法分为6组(n=5):空白对照组(C组)、M3受体shRNA转染组(shRNA组)、脂多糖组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚+脂多糖组(P+LPS组)、脂多糖+M3受体shRNA转染组(LPS+shRNA组)和盐酸戊乙奎醚+脂多糖+M3受体shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).shRNA组、LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组以含2.5 nmol/L M3受体shR-NA的质粒转染细胞.LPS组和LPS+shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1h;P+LPS组和P+LPS+shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为2μg/ml的盐酸戊乙奎醚,孵育1h后加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS再孵育1h.采用Transwell法测定肺微血管内皮细胞通透性,采用Western blot法测定磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK 1/2)的表达水平,采用免疫荧光染色法测定热休克蛋白27 (HSP27)的表达水平,采用实时定量PCR法测定M3受体mRNA的表达.结果 与C组比较,shRNA组M3受体mRNA表达下调,LPS组细胞通透性增高,p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27、和M3受体mRNA表达上调(P＜0.05);与LPS组比较,P+LPS组、LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组细胞通透性降低,p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调(P＜0.05);与LPS+shRNA组比较,P+LPS+shRNA组细胞通透性降低,p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高的机制与其下调M3受体表达后抑制MAPK信号通路激活有关.
关键词： 受体 毒蕈碱M3 胆碱能药 内皮细胞 毛细血管 肺 内毒素血症 p38丝裂原活化蛋白激酶类 细胞外信号调节MAP激酶类 -
烟碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响
目的 探讨烟碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠74只,体重200～250 g,随机分为5组:假手术组(S组,n=10)、缺血再灌注组(IR组,n=16)、烟碱400 μg/kg组(N1组,n=16)、烟碱40 μg/kg组(N2组,n=16)和α-银环蛇毒素组(α-BGT组,n=16).S组只穿线,不结扎左冠状动脉前降支;余各组采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min的方法 制备大鼠心肌缺血再灌注模型.缺血前30 min时,N1组和N2组经右颈静脉分别注射烟碱400和40 μg/kg,α-BGT组右颈静脉注射N型胆碱能受体α-7亚单位特异性阻断剂α-银环蛇毒素1.0 μg/kg+烟碱400 μg/kg,S组和IR组右颈静脉注射等量生理盐水.再灌注60 min时,IR组、N1组、N2组和α-BGT组各取6只大鼠,测定左心室面积(LVA)、缺血危险区面积(AAR)和梗死区面积(IA),计算AAR/LVA和IA/LVA.再灌注60 min时,各组取10只大鼠,采集右颈动脉血样,测定血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的浓度和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性;然后处死动物,取心肌组织,观察心肌超微结构,测定心肌髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 与S组比较,IR组、N1组、N2组、α-BGT组血浆 TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性升高,心肌MFO活性升高(P<0.05);与IR组比较,N1组IA/LVA、血浆TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性、心肌MPO活性降低(P<0.05),心肌细胞超微结构损伤减轻,N2组和α-BGT组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与N1组比较,N2组和α-BGT组IA/LVA、血浆TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性、心肌MPO活性升高(P<0.05),心肌细胞超微结构损伤加重.结论 烟碱可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与激活胆碱能抗炎通路,抑制炎性反应有关.
-
新法救治重度有机磷农药中毒104例效果分析
目的 探讨提高急性重度有机磷农药中毒抢救成功率的新方法.方法 将我院1992～2005年收治的重毒有机磷农药中毒患者按随机对照的原则分为两组:A组给予新法救治,B组给予旧法救治.比较两组患者阿托品化时间、显效时间和胆碱酯酶(CHE)恢复时间,反跳率、阿托品中毒率、病死率和中间综合征发生率.结果 两组患者的阿托品化时间、显效时间和CHE恢复时间及反跳率、阿托品中毒率、病死率和中间综合征发生率间差别均有显著性意义(P＜ 0.05).结论 采用改进的方法救治重度有机磷中毒患者可提高其抢救成功率.
-
可因氏越橘叶提取物对链脲佐菌素致糖尿病大鼠胃肠活动的影响
目的:探讨印度草药可因氏越橘叶子的提取物对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠的血糖调节、小肠通过时间、远端结肠平滑肌对外源性乙酰胆碱的应答情况及小肠内硫代巴比妥酸反应物水平的影响.方法:使用成年雄性Wistar大鼠,通过静脉注射链脲佐菌素(70 mg/kg)建立糖尿病大鼠实验模型.造模后13 d待大鼠血糖稳定后使用可因氏越橘叶子提取物及格列本脲治疗,实验后一周（第8周）给予标准药西沙比利或维生素E.实验结束时处死大鼠,衡量其胃肠活动,测量远端结肠收缩反应及硫代巴比妥酸反应物含量.通过测量木炭餐的小肠通过时间衡量胃肠活动；通过不断增加外源性乙酰胆碱刺激,测量剂量效应曲线衡量远端结肠收缩情况；通过测量大鼠小肠匀浆内多元不饱和脂肪酸含量确定硫代巴比妥酸反应物含量.结果:可因氏越橘叶子的提取物(300及500 mg/kg)在给药后30和60 d显著降低了大鼠的血糖水平(P＜0.05,P＜0.01).与空白对照组比较,实验9周后模型组大鼠的胃肠活动显著下降(P＜0.05),且与远端结肠对外源性乙酰胆碱刺激的反应降低(P＜0.01)及小肠匀浆内硫代巴比妥酸反应物含量升高(P＜0.05)有关.而使用可因氏越橘叶子的提取物（300及500mg/kg）治疗9周的大鼠胃肠活动较模型组增加,表现为远端结肠对外源性乙酰胆碱刺激的反应增加(P＜0.05),而小肠匀浆内硫代巴比妥酸反应物含量与模型组相比亦有降低(P＜0.05).结论:可因氏越橘叶子的提取物对糖尿病并发症引起的胃肠活动下降有保护作用,表现为控制血糖和对外周胆碱能神经元的保护作用.所以该植物有可能用于治疗糖尿病病人的胃肠功能减退.
-
胆碱能抗炎通路与脓毒症发病机制的研究进展
脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合征，持续的炎症反应常导致多器官功能障碍、脓毒性休克[1]，是现代危重病研究领域的热点及难点，患病率及病死率高[2]，其发病机制复杂，迄今有效的治疗措施不多。研究发现，胆碱能抗炎通路主要通过迷走神经和烟碱型乙酰胆碱受体 a7亚基(a7nAChR)及多个信号转导通路反馈地调控炎症反应，从而减轻机体炎症损害。因此，研究胆碱能抗炎通路与脓毒症发病机制的关系，有利于从本质上把握脓毒症，为临床治疗脓毒症提供新的策略，现将其研究进展综述如下。
