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炭疽毒素对免疫细胞特异性影响的研究进展
炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)是一种革兰阳性菌,是人兽共患炭疽病的病原体.炭疽毒素是炭疽芽孢杆菌的关键致病因子,是典型的A-B型细菌毒素,其中保护性抗原(protective antigen,PA)是结合亚单位,与靶细胞受体结合;致死因子(lethalfactor,LF)和水肿因子(edema factor,EF)是效应亚单位.
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obiltoxaximab获FDA批准治疗吸入性炭疽
2016年3月FDA批准了Elusys Therapeutics公司一种新的吸入性炭疽治疗药物obiltoxaximab(Anthim)。该药是一种单克隆抗体,与炭疽杆菌(anthrax)产生的毒素结合,抑制毒素与细胞受体的结合,阻止细胞内炭疽致死因子和水肿因子、炭疽毒素的致病作用。其作用机制尚不清楚。与适当的抗菌药联用,可用于成人和儿童的吸入性炭疽热的治疗。该药也可用于预防吸入性炭疽热。治疗前采用苯海拉明预治疗,静脉输注前用生理盐水稀释,输液时间>90 min。成人推荐剂量为16 mg/kg,体质量<40 kg者参阅说明书;儿童体质量>40 kg剂量为6 mg/kg,15~40 kg为24 mg/kg,≤15kg为32 mg/kg。
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炭疽毒素小分子抑制剂
炭疽病是由炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)引起的恶性传染病,炭疽菌进入宿主后产生的炭疽毒素是感染者致死的主要原因.炭疽毒素含有2种具有酶催化活性的蛋白质——致死因子和水肿因子,以及1种共同的结合和转运蛋白质——炭疽保护性抗原,炭疽保护性抗原分别与上述两种因子组成致死毒素和水肿毒素.现阶段治疗炭疽病的主要药物为抗生素,但抗生素只能杀灭人体组织内的部分炭疽热孢子和细菌,不能抵抗孢子和细菌在体内产生的毒素,因而需要开发抑制炭疽毒素的新型药物.本文主要综述近年来国际上对靶向保护性抗原、致死因子和水肿因子的炭疽毒素小分子抑制剂的主要研究进展.
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炭疽杆菌的致病因子与炭疽的防治
炭疽为一种人、兽共患急性传染病,部分国家将炭疽杆菌作为生物威胁因子进行研究和生产.该菌毒性与质粒PXO1、PXO2有关,PXO1产物包括水肿因子、保护性抗原和致死因子.PXO2是另一编码致病因子,产物英膜抑制细胞的吞噬,有助病菌繁殖、扩散和建立感染.抗生素与抗炭疽血清联合应用,突变保护性抗原、水肿因子、致死因子联合注射,Al(OH)3佐剂PA疫苗,减毒口服菌苗,PA基因重组活菌苗均可抵抗炭疽杆菌致死性攻击.
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荧光定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究
目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测.方法采用SYBR Green Ⅰ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个毒力相关质粒的存在,检测其灵敏度和特异性,并以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定14株炭疽芽孢杆菌,并测试该法检测土壤模拟污染标本的灵敏度,实验中设置内对照以排除假阴性结果的存在.结果炭疽杆菌基因组DNA的检测灵敏度可达每反应体系0.53pg,两个克隆株提取质粒的检测限分别为每反应体系12拷贝、140拷贝;检测14株炭疽芽孢杆菌及29株非炭疽芽孢杆菌的PCR扩增结果表明,炭疽芽孢菌DNA均出现特异的扩增结果,29株对照菌的DNA均为阴性;土壤模拟污染标本检测灵敏度可达每反应体系36个芽孢;20次重复实验结果表明其平均值与标准差为14.602±0.640.结论该方法检测炭疽芽孢杆菌具有简便、快捷、灵敏度高和特异性好的特点,为临床诊断、环境监测、卫生防疫等方面,快速检出炭疽芽孢杆菌提供了有利的手段.
关键词: 炭疽芽孢杆菌 荧光定量PCR 荚膜因子 水肿因子 LightCycler -
巢式PCR快速检测炭疽芽孢杆菌
目的:快速简便地检测炭疽芽孢杆菌.方法:细菌培养物经反复冻融,SDS、蛋白酶K和煮沸处理后,作为PCR模板,根据炭疽芽孢杆菌质粒pX01中水肿因子(EF)基因设计两对引物,采用巢式PCR(nested PCR)扩增目的基因.结果:从炭疽芽孢杆菌模板中成功扩增出1247bp的特异片段,而未在炭疽芽孢杆菌无毒株、蜡样芽孢杆菌和枯草杆菌模板中扩增出相应条带;第一次扩增能检出的低细菌量是103拷贝;经再次巢式PCR,扩增出208bp的特异片段,低检出的细菌数为10个拷贝,敏感性提高了100倍.结论:巢式PCR是一种快速、特异、敏感的检测炭疽芽孢杆菌的方法.