人参皂苷Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤中NAIP表达的影响

目的:观察人参皂苷Rb1对神经元凋亡抑制蛋白(neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP)在脑缺血再灌注损伤中表达的影响,探讨人参皂苷Rb1对缺血性脑病的防治机制.方法:线栓法阻断大鼠大脑中动脉2 h,再灌注3 h～5 d制备脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法标记NAIP阳性细胞,观察人参皂苷Rb1对NAIP阳性细胞数的影响.结果:缺血再灌注后,缺血半暗带内的NAIP阳性细胞表达增加,海马CA 1区等部位的NAIP阳性细胞数量也明显增加,而缺血中心区无NAIP阳性细胞的表达.实验对照组中NAIP阳性细胞数量随再灌注时间延长逐渐升高,12 h达到高峰,至5 d时NAIP阳性细胞数量表达低于正常水平.实验用药组中NAIP阳性细胞数量在2 d时达到高峰,且其高峰值明显高于实验对照组中的高峰值,后随再灌注时间的延长而逐渐下降,至5 d时仍处于较高水平.结论:脑缺血再灌注后,NAIP表达增加是脑组织对损伤的一种保护性反应,其对缺血区周围的神经细胞的保护作用更为明显.NAIP在脑组织中的表达具有一定的时间规律性,并且人参皂苷Rb1可能通过上调NAIP的表达发挥对受损脑组织的保护作用.

视神经损伤后法舒地尔修复作用的实验研究

目的 探讨法舒地尔(Fasudil)在大鼠视神经不完全损伤后的修复再生作用及其对神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)表达的影响.方法 成年雄性大鼠60只,随机分为3组,正常组12只,对照组、治疗组各24只,正常组不做任何处理.对照组和治疗组大鼠分别建造右眼视神经不完全损伤模型,于造模成功1h后治疗组腹腔注射法舒地尔10 mg/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水,并在损伤后3、7、14及21 d随机抽取两实验组各6只大鼠,正常组3只大鼠,做大鼠视盘上方2 mm视网膜切片,行HE染色,观察视网膜组织损伤情况;行免疫组化染色,分析视网膜平均光密度值(AOD),AOD值越高,表明NAIP的表达量越高.结果 HE染色切片光镜下观察可见正常组切片上RGCs数量高于两实验组,而治疗组各阶段细胞数都高于对照组,差异有统计学意义(t=16.00 ～21.05,P=0.0008～0.0027).免疫组化染色切片上可见治疗组切片的NAIP表达量明显高于对照组切片,差异均有统计学意义(=31.89 ～ 56.40,P=0.000 1 ～0.0004).结论 法舒地尔能对大鼠视神经不完全损伤具有一定的修复再生作用,能增强NAIP在受损视网膜组织中的表达.

芍药苷活化Nrf2/ARE通路减轻Aβ(1-42)诱导的大鼠海马神经元损伤

人参皂甙Rb1阻止大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡和诱导NAIP表达

人参皂甙Rb1(GRb1)是人参中一个重要的有效成分(人参属五加科中一属),能减少大鼠暂时性脑缺血梗塞面积和改善神经功能缺失症状,这种神经保护作用的机制不完全清楚.本实验研究 GRb1的神经保护作用是否与防止神经元凋亡和调控神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)的表达有关.通过阻塞大鼠大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型,再灌注开始后立即给予腹腔注射GRb1(40 mg/kg).具有神经功能缺失的大鼠被随机分成2组:缺血组和GRb1组,每个组根据再灌注时间(3 h,12 h, 1 d, 2 d, 3 d, 5 d, 10 d,n=4/每时间点 )分为亚组.正常大鼠和假手术组做为对照组.TUNEL标记分析凋亡细胞,用免疫组织化学的方法检测NAIP的表达.结果显示再灌注3 h凋亡细胞数量开始升高,24 h达高峰,后下降,但再灌注10 d的凋亡细胞数量显著高于对照组(P＜0.01).与缺血组相比,GRb1各亚组的凋亡细胞数减少,但再灌注12 h至3 d,其差异具有统计学意义. 在对照组,NAIP 弱或阴性的免疫反应广泛出现在脑实质神经元.再灌注3 h,NAIP阳性细胞增加,12 h时达高峰,后下降.再灌注5 d,NAIP 阳性细胞数量比对照组少(P＜0.05).NAIP 阳性神经元出现缺血性改变如扇形或三角形,纹状体星形胶质细胞强表达NAIP.在GRb1组,NAIP阳性细胞数量从再灌注12 h到10 d,显著高于缺血组.本实验结果提示大鼠局灶性脑缺血时,GRb1能减少细胞凋亡,其机制可能与增加NAIP的表达有关.

脊髓损伤后神经细胞凋亡相关抑制蛋白表达的实验研究

目的:探讨大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后,应用免疫组化染色观察神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)、存活素(Survivin)在ASCI后的表达和脊髓损伤的关系,并进一步探讨脊髓损伤后神经细胞凋亡抑制相关蛋白表达的重要意义.方法:取SD大鼠50只制作急性脊髓夹压伤动物模型,损伤后1、3、7天于损伤节段脊髓组织取材,NAIP、Survivin免疫组化染色,正常大鼠为正常对照组.计算机图像分析仪定量分析,观察急性脊髓损伤与NAIP、Survivin表达的相关性.结果:正常脊髓内NAIP、Survivin有微弱的表达,损伤后1、3、7天脊髓灰质、白质及室管膜细胞内均有阳性表达.NAIP的表达1D时显著(P＜0.05),表达强弱的顺序是:1天＞3天＞7天(P=0.202).Survivin的表达3D时显著(P＜0.05),表达强弱的顺序是:3天＞7天(P=0.011) ＞1天(P=0.015).结论:哺乳类动物急性脊髓损伤后启动了以神经元凋亡抑制蛋白、存活素表达为特征的自我保护与修复机制,且神经元凋亡抑制蛋白、存活素表达的程度与脊髓损伤的程度呈正相关.