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MG132抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞活化
目的 探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞活化的影响及机制.方法 体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),随机分为对照组、TGF-β1组(10 μg/L)和MG132(0.5μmol/L)处理组.Western blot法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(αt-SMA)和Ⅰ型胶原α1(COL1 A1)的表达;RT-PCR和Westernblot法分别检测细胞Smad7、核转录共抑制因子SnoN、TGF-β Ⅰ型受体(TβRI)、Smad2和Smad3 mRNA及蛋白的表达.结果 与对照组比较,TGF-β1促进了α-SMA和COL1 A1蛋白表达(P＜0.05),MG132抑制了TGF-β1的上述作用(P＜0.05).TGF-β1组Smad7和SnoN mRNA表达较对照组增加(P＜0.05).TGF-β1组Smad7和SnoN蛋白表达较对照组减少(P＜0.05),而MG132组Smad7和SnoN蛋白水平较TGF-β1组增加(P＜0.05).结论 MG132可能通过阻止Smad7和SnoN蛋白泛素化降解,抑制TGF-β1诱导人肺成纤维细胞活化.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 成纤维细胞 转化生长因子β1 Smad7 SnoN -
泛素-蛋白酶体抑制剂对动脉粥样硬化的影响
目前很多研究证实,动脉粥样硬化是血管壁对各类损伤刺激的异常反应,是动脉壁的慢性炎症性疾病.炎性反应贯穿动脉粥样硬化形成和发展的每个阶段,且炎症机制还与动脉粥样硬化的多种并发症的产生存在密切关系.血管平滑肌细胞为血管壁的重要组成部分,在血管收缩及舒张方面起着重要的调节作用,它同时也分泌多种细胞因子和炎性介质.血管平滑肌细胞的炎症可诱导平滑肌细胞的增殖与迁移,终导致血管动脉粥样硬化病变和血管外科手术后再狭窄等问题.泛素-蛋白酶体系统参与机体内炎性反应过程,且泛素-蛋白酶体抑制剂可通过抑制血管平滑肌的炎性反应,从而抑制动脉粥样硬化的发生.目前已证实,多种抗动脉粥样硬化药物具有抗炎功能,抗炎治疗已成为防治动脉粥样硬化的一种新策略.本文对泛素-蛋白酶体抑制剂对动脉粥样硬化的影响机制做一综述.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 血管平滑肌细胞 炎性反应 动脉粥样硬化 -
泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响
血管平滑肌细胞( Vascular smooth muscle,VSMC)是构成血管壁的重要成分. 在动脉粥样硬化( Atherosclerosis,AS)病变中,VSMC在病理状态下凋亡失平衡引起血管重塑,导致动脉粥样硬化的发生. 目前研究发现,细胞凋亡在动脉粥样硬化形成的发病和治疗中具有重要意义,而泛素-蛋白酶体抑制剂( The ubiquitin-proteasome inhibitor,UPI)能够促进 VSMC 凋亡进而影响动脉粥样硬化. 本文对泛素 -蛋白酶体抑制剂影响VSMC凋亡的机制进行了综述.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 血管平滑肌细胞 凋亡 -
泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞凋亡和动脉粥样硬化的影响
泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin proteasome system,UPS)是真核细胞内蛋白质降解的核心途径,对细胞周期、炎症反应、细胞凋亡的调节起十分重要的作用.血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMC)作为血管壁的重要细胞成分,其增殖与凋亡的失平衡是决定动脉粥样硬化发生、发展的关键环节.在VSMC中,细胞凋亡与UPS活性密切相关,且UPS对动脉粥样硬化各个阶段有显著的调节作用.泛素-蛋白酶体抑制剂(Ubiquitin-proteasome inhibitors,UPI)通过抑制凋亡相关蛋白的降解,从而调控VSMC的凋亡,影响动脉粥样硬化形成的各个阶段.本文综述了UPI对VSMC凋亡的影响及其在动脉粥样硬化各阶段的调节作用.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 血管平滑肌细胞 凋亡 动脉粥样硬化 -
MG-132诱导Tca-8113细胞凋亡的机制探讨
目的:探讨内质网应激在蛋白酶抑制剂MG-132诱导人舌鳞癌细胞株Tca-8113细胞凋亡中的作用.方法:使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基常规培养Tca-8113细胞,实验分为5组,3个实验组分别加入MG-132,终浓度为10.0、20.0、30.0μmol/L;阳性对照组加入毒胡萝卜素,终浓度为5.0μmol/L;阴性对照组加入1640培养液.培养24h后,Hoechst 33258 染色法观察凋亡细胞形态学变化:Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测GRP78 mRNA,Western 印迹检测caspase-12 蛋白的表达,ELISA 法检测人泛素蛋白连接酶E3浓度.应用SPSS16.0软件包对结果进行统计学分析.结果:MG-132作用Tca-8113细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态;MG-132实验组细胞凋亡率随MG-132浓度升高而逐渐升高,存在浓度依赖性;MG-132 组 GRP78 的 mRNA 及caspase-12蛋白表达增强;MG-132 组人泛素连接酶E3的浓度分别为28.75±2.28、18.16±0.65、8.85±0.72.结论:MG-132可通过内质网应激途径诱导Tca-8113细胞的凋亡,MG-132可抑制人泛素连接酶E3的表达.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 MG-132 内质网应激 Tca-8113细胞 凋亡 E3 -
泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病大鼠视网膜上Smad7表达的影响
目的 探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型视网膜上Smad7表达的影响,研究Smad7的表达与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为预防及早期治疗DR提供一种新思路.方法 选择60只健康的雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组、DM+ MG132组和DM组.采用一次性腹腔注射50 mg· kg-1 STZ的方法建立DM大鼠模型.自DM模型建立后第3天起,DM+ MG132组大鼠每天给予0.1mg·kg-1 MG132 DMSO液腹腔注射,正常对照组和DM组每天给予0.1 mg·kg-1 DMSO液腹腔注射.于造模后8周和12周时处死各组大鼠,然后摘出眼球,制成眼杯,采用免疫组化的方法检测各组大鼠视网膜上Smad7蛋白的表达.各指标均采用均数±标准差表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用q检验法,以P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 在正常对照组大鼠视网膜上Smad7蛋白高表达；DM组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的光密度(optical density,OD)值分别是0.340 8±0.0007、0.119 3±0.002 8,明显低于正常对照组(分别为0.8793±0.001 5和0.960 5±0.002 1)(均为P＜0.01);DM+ MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的OD值分别是0.486 4±0.001 5、0.590 4±0.012 2,亦明显低于正常对照组(均为P＜0.01)；DM+MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的表达较DM组明显增加(均为P＜0.01).结论 泛素-蛋白酶体抑制剂MG132能够有效抑制Smad7的表达,对DM大鼠视网膜具有保护作用,因此有望成为DR的新的治疗手段.
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泛素-蛋白酶体制剂在胰岛移植排斥反应中的作用
目的在小鼠胰岛移植模型上,研究泛素-蛋白酶体抑制剂在控制同种异基因移植排斥反应中的作用.方法泛素-蛋白酶体抑制剂用二肽硼酸类似物(DPBA)作代表.测定小鼠被注射DPBA后的血生化变化观察其可能的副作用.建立小鼠胰岛移植模型.受体糖尿病鼠随机分为3组:实验组,同种异基因移植24 h时后,每天静脉注射处理DPBA持续17 d.对照1组同基因移植;对照2组,同种异基因移植.两对照组移植后不作任何药物处理.结果DPBA对肝脏胰腺轻度毒性,有一过性的肾毒性和较明显的心脏毒性,停药后毒性明显下降.实验组同种异基因移植的移植物平均存活(33.88±24.54)d;对照2组同种异基因移植的移植物平均存活(4.33±2.42)d.两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论泛素-蛋白酶体抑制剂可以有效地抑制移植排斥反应,可以使用作为新的免疫抑制剂.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 胰岛移植 排斥反应 -
泛素-蛋白酶体抑制剂对大鼠肺纤维化的影响
目的:探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肺纤维化的影响.方法:45只SD大鼠随机分成对照组、模型组、干预组和治疗组.模型组和干预、治疗组大鼠气管内滴入博来霉素(5 mg·kg-1)建立肺纤维化动物模型,对照组以等量生理盐水气管内滴入.干预组于第造模后第1天起给予MG-132腹腔内注射(0.1 mg·kg-1 ·d-1),模型组和对照组注射等量生理盐水；治疗组于造模后第28天起给予MG-132(0.1 mg·kg-1 ·d-1)腹腔内注射.于不同时间点测肺系数、肺组织行病理学检查及肺组织羟脯氨酸(HYP)含量测定.结果:干预组及治疗组肺系数及肺组织HYP含量各时间点均低于模型组(P＜0.01,P＜0.05),肺泡炎的程度也轻于模型组；虽然干预组和治疗组肺纤维化程度均明显重于对照组,但干预组28 d和治疗组肺纤维化较模型组轻.结论:泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肺纤维化有一定的干预、治疗作用.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 肺纤维化 -
泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对食管癌细胞凋亡和生存素表达的影响
目的:研究泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对食管癌细胞凋亡和生存素(survivin)表达的影响.方法:将泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132加入食管癌细胞Eca9706中,采用MTT法测定细胞生长抑制率,经流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测survivin的表达.结果:MG-132对食管癌细胞生长具有显著抑制作用,作用24、48、72、96h后的IC50分别为120.2、18.1、-12.2、-16.9μmol/L;5.0μmol/L的MG-132作用于食管癌细胞24、48、72、96h后,细胞凋亡率分别为(3.1±0.4)%、(31.7±3.5)%、(50.4±4.8)%、(66.6±6.2)%;Survivin在食管癌细胞中呈高表达,经MG-132作用后,表达明显降低.结论:MG-132能显著抑制食管癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调survivin表达有关.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 食管癌 凋亡 survivin -
泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病大鼠视网膜上Smurf2及Smad7表达的影响
目的 探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜上Smurf2及Smad7的表达的影响.方法 选择健康雄性Wistar大鼠60只,按随机数字表法分为正常对照组、DM组和MG132干预组各20只.MG132干预组与DM组给予一次性腹腔注射50mg/kg 链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),正常对照组一次性给予等体积的柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液(pH 4.5)腹腔注射.自第三天起,MG132干预组大鼠每天给予0.1mg/kg MG132 DMSO液腹腔注射,正常对照组和DM组每天给予0.1mg/kg DMSO液腹腔注射.分别于给药后第8周和第12周处死各组大鼠,完整摘除大鼠的左眼球制成眼杯,采用免疫组织化学的方法检测各组大鼠视网膜上Smurf2及Smad7蛋白的表达.结果 正常对照组大鼠视网膜上Smurf2无表达或弱表达,Smad7蛋白高表达.MG132干预组和DM组大鼠视网膜上Smurf2的表达均较正常对照组明显增加(P＜0.01),Smad7的表达均较正常对照组明显降低(P＜0.01);MG132干预组大鼠视网膜上Smurf2的表达较DM组明显降低(q分别为20.37和40.96,均P＜0.01),Smad7的表达较DM组明显增加(q分别为67.20和187.00,均P＜0.01).结论 泛素-蛋白酶体抑制剂MG132能够通过抑制Smurf2的表达使DM大鼠视网膜上Smad7的降解减少,对DR的防治具有重要意义.
关键词： 泛素-蛋白酶体抑制剂 糖尿病视网膜病变 Smurf2 Smad7
