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芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠黏膜免疫屏障的影响
目的 观察芪黄煎剂对大鼠胃切除后小肠黏膜免疫屏障的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组(中药组),每组20只.模型组与中药组均行胃切除手术,模型组术后给予小肠内滴注肠内营养制剂能全素;中药组予小肠内滴注能全素和中药芪黄煎剂.假手术组仅行腹部正中切开及关腹处理,术后正常进食水,不予药物及营养干预.干预1周后,分离出大鼠小肠集合淋巴小结(Peyer's patches,PPs)细胞、固有层淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPLs)、黏膜上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IELs)和肠腔黏膜表面分泌型免疫球蛋白A(secretory IgA,sIgA),应用流式细胞术、免疫组织化学、双抗体-PEG放射免疫等技术,检测肠黏膜不同解剖部位T细胞抗原受体(αβT cell antigen receptor)-CD3+、CD4+、CD8 +T细胞比例、IgA+B细胞数量、sIgA含量.结果 与假手术组比较,模型组肠黏膜sIgA含量、PPs中IgA+B细胞数量和LPLs中IgA+B细胞数量均降低(P＜0.01);模型组IELs中CD3+、CD8+T细胞比例,LPLs中CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例,PPs中CD3+、CD4+T细胞比例降低(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,中药组肠黏膜sIgA含量、PPs中IgA+B细胞数量和LPLs中IgA+B细胞数量升高(P＜0.01,P＜0.05),中药组IELs中CD3+、CD8+T细胞比例,LPLs中CD3+、CD4+T细胞比例,PPs中CD3+、CD4+T细胞比例升高(P ＜0.01,P＜0.05).结论 芪黄煎剂能促进大鼠胃切除术后小肠黏膜免疫屏障中CD3+、CD4+、CD8 +T、IgA+B淋巴细胞的增殖与分化及sIgA含量的增加,能够促进大鼠胃切除术后肠道免疫屏障功能障碍的恢复.
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芪黄煎剂对缺血-再灌注大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的影响
目的 观察中药芪黄煎剂对缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的影响.方法 建立肠黏膜I/R大鼠模型,即夹闭大鼠肠系膜上动脉45 min,再灌注1 h后取标本.观察各组大鼠肠黏膜病理形态变化及肠黏膜上皮细胞凋亡情况.结果 病理形态学:假手术组大鼠肠绒毛完整;I/R组大鼠肠绒毛上皮下间隙扩张,上皮顶端与固有层明显分离伴固有层毛细血管暴露、出血和溃疡;谷氨酰胺组部分肠绒毛上皮下间隙扩张,部分绒毛上皮顶端与固有层分离、部分肠绒毛有出血和溃疡;芪黄煎剂组与I/R组及谷氨酰胺组比较,肠绒毛损伤程度较轻,绒毛上皮顶端与固有层部分分离、部分肠绒毛有出血.肠黏膜病理Chiu氏评分:假手术组低(O分);I/R组评分高;谷氨酰胺组评分低于I/R组(P<0.05);芪黄煎剂组评分明显低于I/R组(P<0.05),但与谷氨酰胺组比较,差异无统计学意义(P>0.05).肠黏膜上皮细胞凋亡显示:假手术组肠上皮存在一定数量的凋亡细胞,比其他3组少(P<0.05);I/R组肠上皮凋亡细胞数明显大于其他3组(P<0.05);谷氨酰胺组凋亡细胞数少于I/R组(P<0.05),但多于假手术组和芪黄煎剂组;芪黄煎剂组肠上皮细胞凋亡数高于假手术组,低于I/R组和谷氨酰胺组,与I/R组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与谷氨酰胺组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 芪黄煎剂可减少I/R对大鼠肠黏膜上皮造成的损伤,其作用机制可能与抑制肠黏膜上皮细胞凋亡有关.
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芪黄煎剂对上消化道肿瘤术后血清促炎细胞因子及其mRNA表达的影响
目的:观察上消化道肿瘤术后早期应用芪黄煎剂对血清促炎细胞因子及其mRNA表达的影响.方法:40例上消化道肿瘤患者,随机分为研究组(20例)和对照组(20例).研究组术后第1 d开始,采用肠内滴注中药芪黄煎剂;对照组只滴注生理盐水,疗程均为7 d.术后检测血清促炎细胞因子及mRNA表达.结果:2组血清促炎细胞因子术后1 d均明显下降(P ＜ 0.05),研究组术后第7 d降低更明显,与术后1 d比较差异有显著性(P ＜ 0.05).术后7 d,研究组IL-1α(98.29±3.67)pg/mL、IL-6(6.26±3.02)pg/mL、TNF-α(95.43±32.33)pg/mL 分别较对照组IL-1α(120.61±2.89)pg/mL、IL-6(10.63±2.43)pg/mL、TNF-α(108.43±29.42)pg/mL降低明显(P＜ 0.05).结论:上消化道肿瘤术后早期,小肠内滴注芪黄煎剂,通过抑制促炎细胞因子(IL-1α、IL-6、TNF-α)mRNA的表达,调节血清促炎细胞因子(IL-1α、IL-6、TNF-α)恢复正常,对上消化道肿瘤术后机体免疫功能的恢复和炎症反应的控制具有重要作用.
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芪黄煎剂对大鼠胃切除术后免疫相关性肠淋巴细胞归巢数量的影响
目的:通过观察大鼠胃切除术后小肠内滴注芪黄煎剂对免疫相关性肠淋巴细胞归巢数量的影响,探讨肠淋巴细胞归巢过程及相关肠保护免疫机制.方法:选取清洁型雄性SD大鼠60只,建立模型后,将大鼠随机分为三组:对照组:大鼠胃切除手术创伤模型建立后,单纯滴注肠内营养;芪黄煎剂组:滴注的营养制剂、热量、方法、疗程均同对照组,同时滴注中药芪黄煎剂;假手术组:仅给予腹部正中切开后缝合,术后自由饮水进食.疗程结束后,除去感染死亡的模型,从假手术组、对照组、芪黄煎剂组中随机抽取15只,分别观察大鼠标本肠淋巴液中T淋巴细胞、PP结IgA+B细胞.结果:(1)淋巴细胞归巢T细胞数量:1)CD3+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有明显显著性(P＜0.01);芪黄煎剂组同假手术组相比,差异具有显著性(P＜0.05);芪黄煎剂组同对照组相比,差异具有明显显著性(P＜0.01).2) CD4+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有明显显著性(P＜0.01);芪黄煎剂组同假手术组相比,差异具有显著性(P＜0.05);芪黄煎剂组同对照组相比,未见明显差异,无统计学意义(P＞0.05).3) CD8+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有显著性(P＜0.05);芪黄煎剂组同假手术组及对照组相比,均未见明显差异,无统计学意义(P＞0.05).(2)淋巴细胞归巢B细胞数量:对照组同假手术组相比较,差异具有显著性(P＜0.01);芪黄煎剂组同假手术组比较,比较差异有统计学意义(P＜0.05);芪黄煎剂组高于对照组,比较有显著差异(P＜0.01).结论:芪黄煎剂可以增加淋巴细胞归巢T细胞及B细胞数量,促进完成胃切除术后肠淋巴细胞归巢过程,从而保护肠黏膜免疫屏障.
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芪黄煎剂在胰十二指肠切除术后早期的应用1例分析
胰十二指肠切除主要用于胰腺癌、胆管癌和十二指肠癌患者,手术创伤大,术后多发生胃肠功能恢复缓慢、营养不良和免疫功能降低.我们先前的研究表明,健脾通里中药芪黄煎剂可以促进胃癌术后胃肠功能的恢复和营养状况、免疫功能的改善.[1-3]现我们将健脾通里中药芪黄煎剂用于十二指肠癌行胰十二指肠切除术后的患者,现将其应用经验和体会报告如下.
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健脾通里中药芪黄煎剂上消化道肿瘤术后早期应用对促炎细胞因子及其mRNA表达的影响
目的:探讨胃癌术后早期应用健脾通里中药芪黄煎剂对血清促炎细胞因子及其mRNA表达的影响.方法:41例需要外科手术胃癌患者,随机分为研究组(21例)和对照组(20例).研究组术后第1天开始,采用肠内滴注能全素联合中药芪黄煎剂;对照组同样方法只滴注能全素.疗程均为7d.手术前后分别观察:①血清促炎细胞因子(IL-Iα、IL-6、TNF-α)水平；②血清促炎细胞因子(IL-1α、IL-6、TNF-α)mRNA表达水平.结果:术后1d,2组血清IL-1α、IL-6、TNF-α均有所下降,但差异无显著性(P＞0.05).术后7d,研究组血清IL-1α、IL-6、TNF-α均显著下降,与本组术后1d比较,以及与对照组术后第7天比较,差异均具有显著性(P＜0.05).术后1d,2组血清IL-1α、IL-6、TNF-αmRNA表达水平下降不明显(P＞0.05).术后7d,研究组血清IL-1α、IL-6、TNF-αmRNA表达水平均显著下降,与本组术后1d比较,以及与对照组术后第7天比较,差异均有显著性(P＜0.05).结论:胃癌术后早期小肠内滴注健脾通里中药芪黄煎剂,通过促进促炎细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10)mRNA的表达,调节血清抗炎细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10)恢复正常,对胃癌术后机体免疫功能的恢复和炎症反应的控制具有重要作用.
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胃癌术后早期小肠内滴注中药改善细胞免疫功能和肠黏膜通透性临床研究
目的:观察健脾通里中药对胃癌患者术后早期免疫功能的影响和对肠屏障功能的保护作用.方法:60例将要手术的胃癌患者随机分为研究组(30例)和对照组(30例).研究组给予术后早期(术后1 d)小肠内滴注健脾通里中药;对照组术后早期(术后1 d)小肠内滴注9.0 g/L氯化钠注射液.疗程均为7 d.手术前后分别观察:①细胞免疫功能:血白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R);②肠黏膜通透性:尿乳果糖和甘露醇比值(L/M)和血内毒素水平(ET).结果:①术后7 d研究组与对照组比较, IL-2显著升高,sIL-2R显著降低(P<0.05);研究组自身术后7 d与术前1 d比较,IL-2、sIL-2R、IL-12水平均有显著改善(P<0.05);对照组术后7 d上述指标虽然也有所恢复,但无显著性差异(P>0.05);②研究组术后5 dL/M比值明显低于对照组(P<0.01);研究组自身术后5 d与术前1 d比较,L/M比值无明显升高(P>0.05);而对照组自身术后5 d与术前1 d比较,L/M比值明显升高(P<0.01).③术后3 d研究组血ET较对照组显著降低(P<0.01);研究组术后3 d与自身术前1 d比较,ET无显著升高(P>0.05);而对照组术后3 d与术前1 d比较,ET显著升高(P<0.01).结论:胃癌术后早期采用健脾通里中药治疗能够提高机体免疫功能,并有助于改善肠黏膜通透性、保护肠黏膜屏障.
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芪黄煎剂对胃切除大鼠肠淋巴细胞MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达的影响
目的 观察大鼠胃切除术后小肠内滴注芪黄煎剂对黏膜地址素细胞黏附分子-1 (mucosal addressin cell adhension molecule-1,MAdCAM-1)与细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)及其mRNA表达的影响.方法 将60只SD大鼠分为3组,每组20只.假手术组大鼠仅行腹部皮肤切开后缝合手术,模型组大鼠胃切除后给予肠内营养液能全素,芪黄煎剂组大鼠胃切除后先给予芪黄煎剂再滴注营养液能全素.连续给药7d后,采用免疫组织化学法检测MAdCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平,采用RT-PCR荧光定量法检测MAdCAM-1、ICAM-1mRNA相对表达水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平均明显下降(P＜0.05);与假手术组比较,芪黄煎剂组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平明显升高(P＜0.05).结论 芪黄煎剂能增加肠黏膜效应部位MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平,改善胃切除术后肠黏膜免疫屏障功能.
关键词： 芪黄煎剂 胃切除 肠淋巴细胞 黏膜地址素细胞黏附分子-1 细胞间黏附分子-1 -
芪黄煎剂对胃切除大鼠小肠黏膜上皮内和固有层T淋巴细胞亚群的影响
目的 探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后小肠黏膜上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IELs)和固有层淋巴细胞 (lamina propria lymphocytes,LPLs)的影响.方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组,每组20只.假手术组大鼠仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,不给予肠内营养和芪黄煎剂;模型组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素;芪黄煎剂组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素和芪黄煎剂,疗程1周.疗程结束后,分离出大鼠小肠黏膜IELs和LPLs,采用流式细胞仪分别检测IELs和LPLs的αβT细胞抗原受体-白细胞分化抗原3阳性(αβT cell antigen receptor-cluster of differentiation 3 positive,αβTCR-CD3+) T细胞、白细胞分化抗原4阳性(cluster of differentiation 4 positive,CD4+)、白细胞分化抗原8阳性(cluster of differentiation 8 positive,CD8+) T淋巴细胞.结果 ①与假手术组比较,模型组IELs中αβTCR-CD3+、CD8+ T细胞比例显著降低(P<0.05,或P<0.01);与模型组比较,芪黄煎剂组IEL CD3+、CD8+ T细胞比例显著上升(P<0.05,或P<0.01).②与假手术组比较,模型组LPLs中αβTCR-CD3+、CD4+、CD8+ T细胞比例显著降低(P<0.01);与模型组比较,芪黄煎剂组αβTCR-CD3+、CD4+ T细胞比例显著上升(P<0.05).结论 芪黄煎剂能促进大鼠胃切除术后上皮内和固有层中T淋巴细胞的分化、成熟和增殖,有利于胃切除手术应激后肠道免疫屏障功能的调节和恢复.
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芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响
目的 探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响.方法 将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组,每组30只.假手术组大鼠仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,手术后自由饮水进食,不给予肠内营养和芪黄煎剂;模型组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素;芪黄煎剂组大鼠行胃切除手术后给予能全素和芪黄煎剂.疗程1周.疗程结束后,处死大鼠,分离出Peyer结及其内淋巴细胞,采用流式细胞仪检测αβ T细胞抗原受体-白细胞分化抗原3阳性(αβ T cell antigen receptor-cluster of differentiation 3 positive,αβTCR-CD3+)T细胞,白细胞分化抗原4阳性(cluster of differentiation 4 positive,CD4+)、白细胞分化抗原8阳性(cluster of differentiation 8 positive,CD8+)T细胞;免疫组织化学法检测免疫球蛋白A阳性(immunoglobulin A positive,IgA+)B细胞.结果 模型复制后1周,与假手术组比较,模型组Peyer结中αβTCR-CD3+、CD4+ T细胞构成比和IgA+ B细胞数显著降低(P<0.05,或P＜0.01),模型组和芪黄煎剂组CD8+ T细胞构成比无显著变化;与模型组比较,芪黄煎剂组Peyer结中αβTCR-CD3+、CD4+ T细胞构成比和IgA+ B细胞数显著上升(P<0.05,或P＜0.01).结论 芪黄煎剂能刺激Peyer结中T细胞的成熟、分化和增殖,并进一步促进Peyer结中B细胞的增殖和活化,有利于胃切除手术应激后肠道免疫屏障功能的调节和恢复.
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芪黄煎剂对缺血-再灌注损伤肠黏膜上皮形态的影响
目的:观察健脾通里中药芪黄煎剂对缺血再灌注损伤大鼠肠上皮形态的影响.方法:将40只Wistar大鼠,随机分为正常组、缺血再灌注组(ischemia reperfusion,IR)、谷氨酰胺组、芪黄煎剂组,采用无创血管夹夹闭肠系膜上动脉45 min,再灌注1 h复制IR模型,谷氨酰胺组和芪黄煎剂组大鼠分别管饲谷氨酰胺和芪黄煎剂3 d.取距回盲部2 cm以上的小肠组织约5 cm,经100 ml/L甲醛固定,标本4 μm切片后行苏木精-伊红染色.分别对各组大鼠肠黏膜完整性予以Chiu氏评分;测定并比较各组肠绒毛高度、绒毛隐窝深度、肠黏膜厚度、绒毛面积.结果:①Chiu氏评分:正常组低(0分),IR组高,芪黄煎剂组与谷氨酰胺组Chiu氏评分稍低,与I/R组比较,差异有显著性(P<0.05),芪黄煎剂组和谷氨酰胺比较,差异无统计学意义(P>0.05).②正常组肠绒毛高度、隐窝深度和面积及肠黏膜厚度大;与正常组比较,IR组上述指标显著减少;与IR组比较,芪黄煎剂组肠绒毛高度、隐窝深度和面积显著增加(P<0.05).结论:健脾通里中药芪黄煎剂对肠黏膜上皮IR损伤具有保护作用.
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芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠淋巴细胞归巢过程及肠黏膜屏障的影响
[目的]探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠淋巴细胞归巢过程的影响.[方法]60只SD大鼠随机分为假手术组、对照组、芪黄煎剂组.假手术组仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,不给予肠内营养和芪黄煎剂;对照组行胃切除手术后给予肠内营养制剂;芪黄煎剂组行胃切除手术后给予肠内营养制剂和芪黄煎剂,疗程一周.疗程结束后分别观察:淋巴细胞归巢数量;淋巴液中T淋巴细胞(αβTCR-CD3+T细胞及其亚群CD4+、CD8+T细胞);PP结IgA+B细胞.[结果]与假手术组比较,对照组中pp结、肠系膜淋巴结中归巢淋巴细胞百分比显著下降(P＜0.01);与对照组比较,芪黄煎剂组pp结、肠系膜淋巴结中归巢淋巴细胞百分比高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).与假手术组比较,对照组和芪黄煎剂组CD3+T细胞比例下降(P＜0.01或P＜0.05),芪黄煎剂组CD3+T细胞比例较对照组相比升高(P＜0.01);与假手术组相比,对照组和芪黄煎剂组CD4+T细胞比例下降(P＜0.01或P＜0.05),芪黄煎剂组同对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);与假手术组比较,对照组CD8+T细胞比例下降(P＜0.05),芪黄煎剂组同假手术组及对照组比较,均未见明显差异(P＞0.05).与假手术组比较,对照组和芪黄煎剂组pp节中IgA+B细胞比例显著下降(P＜0.01和P＜0.05);芪黄煎剂组中IgA+B细胞比例高于对照组(P＜0.01).[结论]中药芪黄煎剂可通过促进胃切除手术后肠淋巴细胞归巢,从而保护肠黏膜免疫屏障,防治细菌移位发生.
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芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠淋巴细胞归巢受体α4β7、L-selectin及LFA-1的影响
目的:观察芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠淋巴细胞归巢受体α4β7、L-selectin及LFA-1的影响.方法:将60只大鼠随机分成假手术组、对照组和芪黄煎剂组,每组20只,假手术组仅予以大鼠腹部皮肤切开后缝合,不行胃切除,不给予肠内营养和芪黄煎剂;对照组大鼠行胃切除后给予肠内营养制剂(能全素);芪黄煎剂组大鼠胃切除后滴注肠内营养制剂和芪黄煎剂,连续给药1周后,分离肠淋巴管主干,并收集肠淋巴液,采用流式细胞术检测归巢受体α4β7、L-selectin和LFA-1的阳性表达数,并计算出单个核细胞的阳性表达率;RT-PCR荧光定量法检测引流肠淋巴液中归巢受体的mRNA相对表达量.结果:与假手术组比较,对照组和芪黄煎剂组淋巴受体细胞的阳性表达均显著下降(P＜0.01);与对照组比较,芪黄煎剂组的阳性细胞数量较多,但差异无统计学意义(P＞0.05);与假手术组比较,芪黄煎剂组和对照组肠淋巴液中归巢受体的mRNA相对表达量均显著降低(P＜0.01);与对照组比较,芪黄煎剂组的mRNA相对表达量显著增多(P＜0.05);实验发现受体LFA-1表达数量较α4β7、L-selectin增多显著(P＜0.01).结论:芪黄煎剂通过增加肠淋巴细胞表面归巢受体α4β7、L-selectin和LFA-1阳性细胞数量及mRNA相对表达量,使肠道固有层和上皮内黏膜地址素更好地捕获到受体,改善胃切除创伤后肠黏膜免疫屏障功能.
