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  • 玉屏风散抗OVA致小鼠过敏性哮喘的作用研究

    作者:王慧珠;洪敏;桂黎黎;华永庆;许惠琴

    目的:观察玉屏风散(YPFS)抗OVA致小鼠过敏性哮喘的作用.方法:建立OVA诱导的小鼠过敏性哮喘模型,第0,14天,分别腹腔注射20 μg OVA,自21 d时开始雾化吸入0.5% OVA溶液20 min,连续7d.空白对照组给予同体积的生理盐水.YPFS低、中、高剂量组每天分别灌胃给予玉屏风散生药3.25,6.5,13 g·kg-1,模型组和空白对照组给予同体积生理盐水,阳性药组从雾化期开始腹腔注射地塞米松(DEX)1 mg·kg-1.后一次OVA雾化后24h取血,进行血中嗜酸性粒细胞(Eos)计数,血清中IgE测定;收集支气管灌洗液(BALF)进行细胞计数、分类;取右侧肺组织研磨匀浆,检测细胞因子IL-4,IFN-γ,左侧肺上叶做病理组织学观察.结果:模型组血中Eos及血清中IgE显著增高,BALF中出现大量Eos,肺组织病理显示支气管浆液性渗出,小管上皮细胞脱落,管腔狭窄或闭塞,且肺泡间隔变宽增厚,支气管周围淋巴细胞浸润.肺组织匀浆中IL-4增加,IFN-γ/IL-4显著降低,YPFS各剂量组能降低血中Eos及血清中IgE含量,减少BALF中Eos,减轻上述模型的病理改变.同时降低肺组织匀浆中IL-4含量,提高IFN-γ/IL-4.结论:玉屏风散对OVA导致的过敏性哮喘有明显的抑制作用,表现为降低哮喘小鼠的血中Eos,IgE分泌,肺组织炎症细胞的浸润.同时降低肺匀浆中IL-4的水平,提高IFN-γ/IL-4,抑制Th细胞向Th2极化.

  • 类风湿关节炎患者 iNKT 细胞频率与 IFN-γ/IL-4的相关性研究

    作者:孟明;陈丹;许鸣华;侯明辉;瓮沛杉;魏芳;王勇;陈冬志

    目的:检测类风湿关节炎患者外周血中恒定自然杀伤T细胞( invariant nature killer T, iNKT)的频率及功能的变化,分析iNKT细胞频率与血清中IFN-γ/IL-4比值的相关性,进一步明确iNKT细胞在类风湿关节炎( rheumatoid arthritis, RA)发病中的意义。方法收集70例RA患者(并对其中30例患者在缓解期连续跟踪)和40例健康人外周静脉抗凝血并分离单个核细胞( peripheral blood mononuclear,PBMC),采用流式细胞技术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)分析样本中iNKT细胞频率;再对PBMC体外培养,FACS动态检测iNKT细胞增殖频率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit检测相应血清及PBMC培养上清中IFN-γ/IL-4的水平;RT-PCR检测iNKT细胞中IFN-γmRNA与IL-4 mRNA表达水平。结果与健康对照组相比,RA患者iNKT细胞频率及增殖频率显著降低(P<0.05),增殖延迟。治疗后缓解期患者iNKT细胞频率及增殖频率有所恢复,与活动期RA患者比较差异有统计学意义(P<0.05),与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与健康对照组相比,活动期RA患者血清及PBMC培养上清中IFN-γ/IL-4比值升高,差异有统计学意义( P<0.05)。缓解期RA患者血清中IFN-γ/IL-4比值下降,与活动期比较差异有统计学意义( P<0.05),与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);活动期RA患者iNKT细胞中IFN-γmRNA表达升高、IL-4 mRNA表达降低。缓解期RA患者与健康对照组间IFN-γmRNA、IL-4 mRNA表达水平的差异不明显;RA患者外周血中iNKT细胞频率与IFN-γ/IL-4比值呈负相关( P<0.05)。结论RA患者存在iNKT细胞频率低下与功能缺陷。 iNKT细胞参与RA发病过程,且与病情活动性密切相关。

  • 血液净化治疗多器官功能障碍综合征引起Th1/Th2漂移的研究

    作者:郭鸿;石斌;文新忠;李玉民;李斌;刘丽平;张斌;侯启亮;尹超;曹永强

    目的 研究连续性血液净化治疗(CBP)对多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者循环Th1/Th2的影响及其引起Th1/Th2漂移的机制.方法 18例多器官功能障碍综合征患者行CBP治疗.采用中心静脉留置单针双腔导管建立血管通路,采用连续性血液净化系统进行前稀释连续性静脉-静脉血液透析滤过(CVVHDF).治疗前及治疗后24、48、72 h采血检测Th1/Th2,同时检测血液中IL-4和IFN-γ浓度.结果 MODS患者经CBP治疗后,Th1表达逐渐增加,而Th2表达逐渐下降,IFN-γ和IL-4的浓度均下降;Th1/Th2和IFN-γ/IL-4比值随治疗时间的增加升高;Th1/Th2和IFN-γ/IL-4比值呈正相关.结论 CBP治疗可能可改善MODS患者的Th1/Th2平衡漂移,可能与改善机体内IFN-γ/IL-4比值有很大的相关性.

  • 银翘散调节呼吸道病毒感染相关性哮喘Th1/Th2细胞因子的临床观察

    作者:常力;朱振刚

    [目的]观察银翘散对呼吸道病毒感染相关性哮喘(RVA)的临床疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响.[方法]将68例RVA患者随机分为对照组32例,常规西药治疗;治疗组36例,在常规西药的基础上加用银翘散治疗.2组均治疗10d.观察治疗前后患者的哮喘控制评分(ACT),肺功能[第1秒时间肺活量(FEV1)、一秒率(FEV1/FVC%)、呼气峰流速(PEF)]、中医证候疗效及Th1/Th2细胞因子[分泌性免疫球蛋白A(sIgA)、白介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IFN-γ/IL-4]的变化.[结果]治疗后两组患者的ACT评分均较治疗前明显改善,且治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组对肺功能的改善优于对照组(P<0.05).治疗组中医证候有效率为94.44%(34/36),对照组中医证候有效率为71.87%(23/32).治疗后,治疗组sIgA水平高于对照组(P<0.05).IFN-γ及IFN-γ/IL-4低于对照组(P<0.05),IL-4水平两组之间未见差异(P>0.05).[结论]银翘散联合常规西药治疗RVA的临床疗效优于单用常规西药治疗,可能与银翘散可调节患者Th1/Th2细胞因子,逆转因子间的失衡,进而减少气道炎症相关.

  • 加味苍耳子散辅助糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂治疗小儿变应性鼻炎疗效分析

    作者:高丽京;刘子毅;郭红磊;王志芳;李东娜;曹姗;任艳青

    目的:研究分析加味苍耳子散辅助糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂治疗小儿变应性鼻炎的临床疗效.方法:选取变应性鼻炎患儿80例,采用随机数字表法分为研究组和对照组,每组40例.对照组给予糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂治疗,研究组在对照组治疗的基础上加用加味苍耳子散治疗,疗程均为2周,连续治疗2个疗程.记录分析2组患儿治疗前后鼻部症状评分和眼部症状评分情况、鼻阻力值、不良反应发生情况、血清总免疫球蛋白IgE及IFN-γ/IL-4水平.结果:治疗后2组患儿的鼻部症状及眼部症状评分、鼻腔总阻力值均较治疗前显著下降(P<0.05);血清总IgE水平显著下降及IFN-γ/IL-4水平显著升高(P<0.05).且治疗后研究组患儿的鼻部症状评分、鼻腔总阻力值、不良反应发生率均显著低于对照组(P<0.05);IgE水平显著低于对照组及IFN-γ/IL-4水平显著高于对照组(P<0.05).结论:加味苍耳子散辅助糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂治疗小儿变应性鼻炎临床疗效显著,联用比单用效果更佳,且不良反应发生率更低.

  • D-氨基半乳糖/内毒素诱导的急性肝衰竭与Th1/Th2失衡

    作者:车德才;赵中夫;李水仙;武延隽;张芸

    目的:研究Th1/Th2失衡与D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭的关系.方法:30只Wistar大鼠腹腔内注射D-氨基半乳糖/内毒素诱导大鼠急性肝衰竭模型(AHF组),另取30只腹腔内注射等量生理盐水为正常对照(N组).两组动物于建模后3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h各取5只动物检测其血清丙氨酸转氨酶(ALT)与肝组织的病理形态学变化;ELISA检测不同时间点动物血清中Th1/Th2型细胞因子(IFN-γ/IL-4)水平的变化.结果:AHF组肝组织显示炎细胞浸润和明显坏死的急性肝衰竭特征,且各时间点血清ALT值均明显高于N组(P<0.05);AHF组与N组相比血清内Th1型细胞因子(IFN-γ)的增高在3 h(P<0.01)、6 h(P<0.01);Th2型细胞因子(IL-4)水平在各时间点无明显变化(P>0.05).结论:在D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭模型中,存在Th1/Th2失衡,机体内发生了促炎反应,对此急性肝衰竭早期损伤起重要作用.

  • 咳喘停药贴对过敏性鼻炎-哮喘综合征患者IFN-γ/IL-4的影响

    作者:彭博;刘兰英;王和生;吴文忠;张聪;周小梅;董杰;操海玲;王会

    目的:研究咳喘停药贴治疗过敏性鼻炎-哮喘综合征患者的临床疗效及对血清IFN-γ/IL-4的影响.方法:选取南京中医药大学附属医院2016年夏季“三伏天”哮喘患者,按有无合并过敏性鼻炎,分为过敏性鼻炎-哮喘综合征患者23例及单纯哮喘患者19例,进行咳喘停药贴穴位贴敷治疗,电话随访两组患者哮喘ACT评分,并用ELISA法检测两组患者治疗前后血清IL-4、IFN-γ含量,计算比值.结果:①与治疗前同期比较,治疗结束后3个月两组哮喘患者同期的ACT评分均显著升高(P<0.05);治疗结束后6个月单纯哮喘组同期的ACT评分显著升高(P<0.05),过敏性鼻炎-哮喘综合征组同期的评分有升高趋势,但无统计学意义.②与治疗前相比,治疗后两组哮喘患者血清中IFN-γ/IL-4显著升高(P<0.05);治疗后,两组哮喘患者血清中IFN-γ/IL-4差异无统计学意义(P>0.05).结论:咳喘停药贴可改善过敏性鼻炎-哮喘综合征患者的远期症状,其疗效维持时间低于单纯哮喘患者,考虑与过敏性鼻炎有关.咳喘停药贴可使过敏性鼻炎-哮喘综合征患者Th1/Th2向Th1偏移,抑制Th2的促炎作用,与单纯哮喘机制相同.

  • 含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂对RA患者iNKT细胞免疫调节功能的影响

    作者:孟明;张雪娇;瓮沛杉;许鸣华;陈丹;侯明辉;陈冬志

    目的:研究新型合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂(CH1b)对活动期RA患者iNKT细胞免疫调节功能的影响。方法:从RA患者外周血中分离得到单个核淋巴细胞( PBMC),α-Galcer和IL-2体外刺激扩增后,经磁珠分选( MACS)得到纯化的iNKT细胞,分成对照组(IL-2)、α-Galcer组(IL-2+α-Galcer)、CH1b组(IL-2+CH1b)。采用MTT法测定各组RA患者iNKT细胞增殖率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit检测各组RA患者iNKT细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的水平;采用RT-PCR方法检测各组RA患者iNKT细胞中IFN-γmRNA和IL-4 mRNA的表达水平。结果:与对照组和α-Galcer组相比,CH1b组iNKT细胞增殖率明显增加(P<0.05);与对照组相比,α-Galcer组IFN-γ和IL-4分泌水平明显增加(P<0.05), CH1b组IFN-γ和IL-4的分泌量也明显增加,IFN-γ/IL-4明显降低(P<0.05);与对照组相比,α-Galcer组IFN-γmRNA与IL-4 mRNA表达均明显增高,CH1b组IFN-γmRNA表达差异不明显,IL-4 mRNA的表达明显增高。结论:新型合成的免疫调节剂( CH1b)可促进活动期RA患者活化的iNKT细胞增殖,并促进IL-4的分泌,上调IL-4 mRNA的表达,诱导iNKT细胞向Th2方向分化,对恢复RA病人体内免疫平衡具有重要意义。

  • 地塞米松对哮喘大鼠T-bet/GATA-3的影响

    作者:张伟;尧斌;程慧明;孟凡磊

    目的:探讨地塞米松对转录因子T-bet/GATA-3的影响.方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与地塞米松组,每组10只.于第1、8天腹腔注射卵白蛋白,第15天雾化吸入卵白蛋白引喘,每日一次,共14次.地塞米松组于实验开始后第15天起,按0.5 mg/kg予以腹腔注射地塞米松,每日一次,共14次.流式细胞术测脾及外周血Th1、Th2含量,免疫组化法及免疫印迹法测T-bet、GATA-3蛋白表达,逆转录聚合酶链反应测T-bet、GATA-3mRNA的表达.结果:模型组与正常组比较,脾与外周血中Th1、Th2含量有非常显著性增多(P<0.01);肺组织中T-bet、GATA-3蛋白与mRNA的表达亦有非常显著性升高(P<0.01).而地塞米松组与模型组比较,T-bet/GATA-3有显著(P<0.05)或非常显著(P<0.01)性升高.结论:T-bet/GATA-3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,地塞米松可提高T-bet/GATA-3比值,从而减轻哮喘的发作.

  • 高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油对小鼠的免疫调节作用

    作者:贺敏;胡世伟;吴胜强;柳东;朱昱哲;王玉明;王静凤

    目的 采用免疫功能低下小鼠模型研究高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油的免疫调节作用.方法 Balb/c小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、乙酯型鱼油组、低含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油组和高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油低、高剂量组,每组10只.剂量组小鼠分别灌胃不同种类的鱼油,阳性对照组灌胃左旋咪唑(20 mg·kg-1),正常和模型对照组灌胃生理盐水,连续28 d.除正常对照组外,其余各组小鼠均于首次给药第21 d,连续7d皮下注射氢化可的松(19 mg·kg-1),建立免疫功能低下小鼠模型.于末次给药后,分别测定小鼠的各免疫指标.结果 高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油可显著改善模型小鼠的血清溶血素水平及抗体生成细胞数,提高迟发性变态反应水平和脾淋巴细胞转化能力,促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力和碳廓清能力,提高IFN-γ/IL-4比值,且效果优于低含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油和乙酯型鱼油.结论 高含量EPA/DHA甘油三酯型可显著改善免疫低下模型小鼠的免疫调节功能,其免疫调节作用可能与其甘油三酯含量及EPA/DHA含量相关.

  • 窄谱和宽谱中波紫外线对银屑病患者血清IFN-γ,IL-4影响的研究

    作者:黎静宜;郭在培

    目的 研究311 nm窄谱中波紫外线(NB-UVB)与280~320 nm宽谱中波紫外线(BB-UVB)对寻常型银屑病患者血清IFN-γ和IL-4的影响.方法 60例寻常型银屑病患者随机分为NB-UVB、BB-UVB、对照3组,每组20例,3组患者除均用VitC、钙剂、海棠合剂以及外用松榴油治疗外,前两组每周光疗3次,共4周,对照组不予光疗.治疗前后分别以银屑病严重程度PASI评分标准评分,以ELISA法测定血清中IFN-γ和IL-4,并与10例正常人血清比较.结果 治疗前3组PASI评分无差异(P>0.05),治疗后3组PASI评分均下降(P<0.05),且NB-UVB组低于BB-UVB组,BB-UVB组低于对照组;3组治疗前血清IFN-γ水平较正常人高(P<0.05),但IL-4和正常无明显差异(P>0.05),IFN-γ/IL-4水平较正常人高(P<0.05);治疗后3组血清IFN-γ水平均下降,IL-4水平无明显变化,IFN-γ/IL-4水平降低(P<0.05),但下降程度不同,NB-UVB组低于BB-UVB组,BB-UVB组低于对照组.结论 NB-UVB治疗寻常型银屑病在临床改善程度和血清IFN-7/IL-4水平下降水平方面均优于BB-UVB.

  • 含噻唑烷-4-酮的免疫刺激剂CH2a增强人iNKT细胞的功能

    作者:孟明;李春晓;王泽瑞;韩华;史建红;陈华;李小六;陈冬志

    目的 研究含噻唑烷-4-酮的糖类衍生小分子免疫刺激剂CH2a对人iNKT细胞功能的影响.方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),经α-半乳糖神经酰胺(a-Galcer)和IL-2体外扩增后,利用磁珠分选分离纯化得到恒定型自然杀伤T细胞(iNKT细胞).5(6)-羧基二乙酸荧光黄琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记的纯化iNKT细胞,与CH2a共孵育后,流式细胞术检测细胞增殖和分代,IFN-γ和IL-4的表达;MTT法定量检测细胞增殖率及对K562细胞的杀伤活性.ELISA检测CH2a处理细胞培养基中IFN-γ和IL-4水平.结果 CH2a能显著促进IL-2引起的iNKT细胞体外增殖;提高IFN-γ和IL-4的生成量及IFN-γ/IL-4的比值;并显著增强iNKT细胞的杀伤活性.结论 CH2a有可能通过诱导iNKT分泌Thl类的细胞因子,调节T细胞向Th1分化,从而增强细胞免疫功能;同时显著提高iNKT的细胞毒功能.

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