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冬虫夏草寄主昆虫拟青霉病研究
目的：明确冬虫夏草寄主昆虫拟青霉病病原，发病状况，为防治提供依据。方法：分别观察卵、幼虫、蛹、成虫各阶段发病情况；分别取血淋巴、僵虫体和分生孢子，进行分离培养，观察鉴定菌种；分离培养的纯菌种接种健康幼虫。结果和结论：病原菌为粉状拟青霉Paecilomyces farinosus。幼虫期发病严重，蛹发病较少，成虫及卵期未见发病。幼虫呆滞疲软为主要病状。死虫体表面后期所产出之白粉状分生孢子层为典型病征。
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冬虫夏草及其发酵菌丝体的鉴定及质量分析
本室对从青海甘南地区采集的冬虫夏草样品经分离所得的菌株进行培养,通过S-450型扫描电镜和Olympus BX-50型光学显微镜,对其形态特征进行观察,鉴定为中国拟青霉Paecilomyces sinensis sp.nov..并对上述菌株经发酵生产的产物与天然冬虫夏草进行化学分析和对比.结果表明:二者均含有人体所必须的各种主要氨基酸,但发酵产物中氨基酸的含量较低.通过ELAN500型等离子体质谱仪,测定58种微量元素,发酵产物中Zn、B、Cd、Pt、Rb、Br的含量均比天然冬虫夏草的高,但却不含Be、Se、Tm、Lu 4种元素.通过高效液相(HPLC)对所含活性成分腺苷进行含量测定,结果显示发酵产物所含的腺苷比天然冬虫夏草所含的要低.
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拟青霉代谢物提取物对小鼠体内单胺氧化酶和慢性应激大鼠海马单胺类神经递质的影响
目的:观察一种拟青霉代谢物提取物对小鼠体内组织单胺氧化酶活性和慢性应激大鼠海马单胺类神经递质的影响.方法:实验于2004-08在安徽医科大学药理学教研室进行.①将180只小鼠随机分为吗氯贝胺组和拟青霉代谢物提取物组,雌雄各半.吗氯贝胺组一次性灌胃吗氯贝胺40 mg/kg,拟青霉代谢物提取物组均灌胃拟青霉代谢物提取物100mg/kg.按照取材时间分为0,0.25,0.5,1,2,4,8,16,24 h 9个时间点,每个时间点10只大鼠.采用紫外分光光度计在每个时间点测定小鼠脑、肝组织单胺氧化酶活性.②选用成年雄性SD大鼠48只,随机分为6组:对照组、模型组、吗氯贝胺组、拟青霉代谢物提取物80,40,20 mg/kg组,每组8只.采用慢性应激法造成大鼠抑郁模型,用药组及模型组大鼠共接受20d各种不同的应激(包括电击足底、4℃冷水刺激5 min、45℃热刺激5 min、高速水平摇晃10 min、夹尾60 s、禁水24 h、禁食48 h、悬吊5min和昼夜颠倒,平均每种刺激各2次).刺激同时用药组灌胃给药,1次/d,共22 d.模型组及对照组灌胃蒸馏水,吗氯贝胺组灌胃剂量为40mg/kg、单胺氧化酶剂量组灌胃剂量分别为20,40,80 mg/kg.采用高效液相-电化学法检测应激大鼠海马肾上腺素、5-羟色胺、多巴胺及其代谢产物5-羟基吲哚乙酸、3,4-二羟基苯乙酸的含量.结果:所用实验动物全部进入结果分析.①拟青霉代谢物提取物100mg/kg 1次性给药对小鼠脑组织单胺氧化酶A具有一定的选择性抑制作用,拟青霉代谢物提取物给药后4 h,对小鼠脑组织单胺氧化酶A的抑制率达到66.7%.②与对照组比较,模型组大鼠海马肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的含量降低,3,4-二羟基苯乙酸升高,5-羟基吲哚乙酸无明显改变,多巴胺/3,4-二羟基苯乙酸,5-羟色胺/5-羟基吲哚乙酸的比值降低;与模型组比较,拟青霉代谢物提取物80,40 mg/kg组肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的含量均升高,3,4-二羟基苯乙酸、5-羟基吲哚乙酸的含量均降低,拟青霉代谢物提取物20 mg/kg组3,4-二羟基苯乙酸含量降低.拟青霉代谢物提取物80,40 mg/kg可提高多巴胺/3,4-二羟基苯乙酸、5-羟色胺/5-羟基吲哚乙酸的比值;拟青霉代谢物提取物20 mg/kg可提高多巴胺/3,4-二羟基苯乙酸的比值.结论:拟青霉代谢物提取物可能通过选择性抑制单胺氧化酶A和调节海马单胺类神经递质发挥抗抑郁作用.
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拟青霉素代谢提取物对慢性应激抑郁大鼠免疫功能的影响
目的:观察一种拟青霉代谢物提取物对慢性应激抑郁模型大鼠24 h糖水消耗量、脾淋巴细胞增殖和血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平的影响.方法:实验于2005-08在安徽医科大学药理学教研室完成.①选用健康成年雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为6组:对照组、模型组、吗氯贝胺组、拟青霉代谢物提取物高、中、低剂量组,每组8只.用药组与模型组大鼠造成抑郁模型:单只孤养,每天随机给予不同的刺激,包括:电击足底、4℃冷水刺激5 min、45℃热刺激5 min、高速水平摇晃10 min、夹尾60 s、禁水24h、禁食48 h、悬吊5 min和昼夜颠倒,平均每种刺激各2次,共21 d.用药组于造模结束后灌胃给药,1次/d,共21 d.模型组及对照组按10 mL/kg灌胃蒸馏水;吗氯贝胺组:按40mg/kg剂量灌胃吗氯贝胺混悬液(单胺氧化酶抑制剂;上海信谊百路达药业有限公司,批号:031001,0.15 g/片);拟青霉代谢物提取物高、中、低剂量组:分别按80,40,20 mg/kg剂量灌胃拟青霉代谢物提取物混悬液(安徽农业大学虫生真菌研究所提供,1.25 kg/L,批号:20050112).②给药第21天,计算大鼠24 h糖水消耗量,以反映大鼠快感缺乏情况.用四甲基偶氮唑盐法检测大鼠脾淋巴细胞增殖情况;用放射免疫法测定血清中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平.结果:SD大鼠48只均进入结果分析.①24 h糖水消耗量:模型组明显低于对照组,分别为(40.1±9.0),(66.2±15.7)mL,(P＜0.01).拟青霉代谢物提取物高、中剂量组和吗氯贝胺组明显高于模型组,分别为(57.4±12.6),(54.6±11.5),(59.4±16.7)mL,(P＜0.05～0.01).②细胞增殖:模型组大鼠脾细胞淋巴细胞对刀豆蛋白A刺激的T淋巴细胞增殖、脂多糖刺激的B淋巴细胞增殖均有明显的抑制作用,A值明显低于对照组(P＜0.01).高、中、低剂量拟青霉代谢物提取物和吗氯贝胺(40mg/kg)可使T淋巴细胞增殖的抑制状态得到明显改善,高、中剂量拟青霉代谢物提取物和吗氯贝胺(40mg/kg)可使B淋巴细胞增殖的抑制状态得到明显改善,A值明显高于模型组(P＜0.05～0.01).③血清细胞因子水平变化:模型组大鼠血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平明显高于对照组(P＜0.05～0.01).拟青霉代谢物提取物高、中剂量组血清肿瘤坏死因子α水平明显低于模型组(P＜0.05),拟青霉代谢物提取物各剂量组血清白细胞介素6、白细胞介素1β水平明显低于模型组(P＜0.05),吗氯贝胺组血清白细胞介素6水平明显低于模型组(P＜0.05).结论:拟青霉代谢物提取物可改善抑郁大鼠快感缺乏,该作用的发挥可能与调节免疫功能和细胞因子水平有关;该提取物的上述作用以80,40 mg/kg的高、中剂量较为明显,且与吗氯贝胺作用效果相当.
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淡紫拟青霉致原发性皮肤透明丝孢霉病一例
患者男,53岁,由于外伤引起左前臂起红斑脓疱,并缓慢扩大.刮取脓疱直接镜检见大量酵母样孢子.多次培养见淡紫色羊毛状菌落生长,小培养显微镜下见直立的分生孢子梗、顶端单轮生帚状支及大量柱状或分散柱状排列的椭圆形、近球形小分生孢子.组织病理:PAS染色可见真皮中层大量小型酵母样孢子.鉴定为淡紫拟青霉.体外药敏试验示其对特比萘芬敏感,对伊曲康唑、氟康唑及两性霉素B耐药.由淡紫拟青霉引起的皮肤透明丝孢霉病采用特比萘芬口服及外用治疗,临床疗效明显.
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细脚拟青霉总多糖对人单核细胞激活的实验研究
目的:探讨细脚拟青霉总多糖对人单核细胞免疫功能的调节作用.方法:用0.125、0.250和0.500 mg/ml三种不同浓度的细脚拟青霉总多糖在37 ℃体外培养人血单核细胞24 h后,用全自动生化分析仪测定其中乳酸脱氢酶与酸性磷酸酶活性,并进行中性红吞噬试验.结果: 细脚拟青霉总多糖使人血单核细胞内乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶的活性均升高(P＜0.001或P＜0.01),对中性红摄取能力也起增强作用(P＜ 0.01或P＜0.001),且对体外培养人血单核细胞的调节作用具有剂量效应. 结论: 细脚拟青霉总多糖对体外培养的人血单核细胞具有激活作用,能增强人血单核细胞的免疫能力.
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细脚拟青霉提取物对慢性应激抑郁大鼠脑脂质过氧化的影响及小鼠急性毒性实验
目的:研究细脚拟青霉代谢物提取物(bioactive compounds from paecilomyces tenuipes,BCPT)的小鼠急性毒性及对慢性应激大鼠脑组织脂质过氧化的影响.方法:采用慢性不可预见性应激(CUS)法建立大鼠抑郁模型;用紫外分光光度计测定大鼠脑组织中GSH-PX、CAT、SOD活性和MDA、NO含量.采用小鼠大耐受量法,观察BCPT的急性毒性.结果:BCPT能提高CUS大鼠脑组织中GSH-PX、CAT、SOD活性,降低CUS大鼠脑组织中MDA、NO含量;小鼠大耐受量为9 g·kg-1.结论:BCPT毒性小,其抗抑郁作用机制可能与抗氧化有关.
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一种拟青霉代谢产物提取物对慢性应激抑郁大鼠血CORT、ACTH含量及下丘脑CRH mRNA表达的影响
目的:研究一种拟青霉代谢产物提取物(bioactive compounds from paecilomyces tenuipes,BCPT)对慢性应激抑郁大鼠血皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)含量及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH )mRNA表达的影响.方法:在慢性温和性不可预见性应激(CUMS)模型上,采用糖水消耗量法观测动物的奖赏反应;以放射免疫分析方法(RIA)测定血清CORT及血浆ACTH含量;利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定下丘脑CRHmRNA的表达.结果:BCPT 40、80 mg·kg-1可不同程度增加模型大鼠糖水消耗量,改善模型大鼠的奖赏反应,并能不同程度降低模型大鼠血清CORT、血浆ACTH含量;下调慢性应激大鼠下丘脑CRH mRNA的过度表达.结论:BCPT的抗抑郁作用可能与其改善慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能亢进有关.
关键词： 拟青霉 抑郁 皮质酮 促肾上腺皮质激素 肾上腺皮质激素释放激素 -
BCPT对CUS大鼠大脑皮质BDNF、Bax及海马超微结构的影响
目的 观察细脚拟青霉代谢物提取物(BCPT)对慢性应激抑郁模型大鼠行为、海马组织超微结构、大脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)和Bax的影响.方法 采用慢性不可预见性应激法(CUS)造成大鼠抑郁模型;采用Open field法观测大鼠行为;采用免疫组织化学的方法对BDNF和Bax进行染色,并用图像分析仪进行半定量分析;用电镜观察海马超微结构的变化情况.结果 慢性应激抑郁模型大鼠水平和垂直运动次数明显减少,BDNF阳性神经元数目明显减少,Bax阳性神经元数目明显增加,电镜显示海马超微结构出现病理变化,而BCPT对其有明显的保护作用.结论 BCPT具有抗抑郁作用,增加BDNF表达、降低Bax表达、改善海马超微结构的病理变化有关.
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BCPT对慢性应激抑郁大鼠脂质过氧化及免疫功能的影响
目的观察一种拟青霉代谢物提取物(BCPT)对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠脂质过氧化及免疫功能的影响.方法采用CUMS法,造成大鼠抑郁模型,按试剂盒说明书要求测定大鼠血清GSH-PX、CAT、T-SOD活力和MDA、NO含量.采用MTT法检测CUMS大鼠血清对正常小鼠脾淋巴细胞转化的影响.结果 BCPT提高CUMS大鼠血清GSH-PX、CAT、T-SOD活力,降低CUMS大鼠血清MDA、NO含量,改善CUMS大鼠血清对小鼠脾淋巴细胞的抑制作用.结论 BCPT的抗抑郁作用可能与增强CUMS大鼠的抗氧化和免疫功能有关.
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一种拟青霉菌丝体烘干粉的镇静催眠作用
目的:研究一种拟青霉菌丝体烘干粉(OHP)的镇静催眠作用.方法:采用自发活动仪记录法、小鼠走动时间和举双肢法、阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠法观察受试药的镇静催眠作用.结果:OHP可抑制小鼠的自发活动:缩短小鼠入睡潜伏期,延长小鼠睡眠持续时间.结论:OHP具有一定的镇静催眠作用.
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BCPT对慢性应激抑郁大鼠行为及体重的影响
目的:研究一种拟青霉代谢物提取物(BCPT)对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠行为及体重的影响.方法:采用CUMS法,造成大鼠抑郁模型,定期测量BCPT对该模型大鼠的体重及糖水消耗量,以开野实验的方法测定大鼠水平及垂直活动.结果:与正常组相比,模型组大鼠体重增长缓慢,糖水消耗量明显下降,水平活动和垂直活动均明显下降.与模型组大鼠相比,BCPT组大鼠体重增长略有提高,糖水消耗量明显增加,水平活动和垂直活动均明显增加.结论:本模型为较理想的抑郁模型,BCPT能明显改善抑郁大鼠的行为活动及体重,提示BCPT具有一定的抗抑郁作用.
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一种拟青霉菌丝体冻干粉对小鼠的镇静催眠作用
目的研究一种拟青霉菌丝体(HPC)冻干粉的镇静催眠作用.方法采用自发活动仪记录法、小鼠走动时间和举双肢法、阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠法观察受试药的镇静催眠作用.结果 HPC可抑制小鼠的自发活动;缩短小鼠入睡潜伏期,延长小鼠睡眠持续时间. 结论 HPC具有一定的镇静催眠作用.
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蝉花真菌的分离及液体发酵培养
目的:探讨蝉花真菌分离及液体发酵培养.方法:从蝉花僵虫体、子座芽、孢子分离真菌,并采用三种液体培养基考察菌丝收率.结果:分离得到的蝉花真菌经鉴定为拟青霉属的蝉拟青霉.在含蚕蛹粉、鸡蛋等动物性成分的液体培养基中培养4天,菌丝收率135 g/L.结论:从蝉花分离得到的蝉拟青霉,可用液体发酵培养.
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高效液相色谱法测定拟青霉中活性成分腺苷的含量
目的 建立HPLC法测定拟青霉中活性成分腺苷含量的分析方法.方法 色谱柱为kromasil-C18(150mm x4.6 mm,5μm),流动相为乙腈:水=5:95,流速为1.0 ml/min.检测波长为260 nm,柱温为室温.结果 腺苷的线性方程为Y=0.4764X-0.3766,线性范围2.56～12.8μg/ml,r=0.999 6,平均回收率为99.51%,RSD为1.44%.结论 该方法灵敏度高、选择性好,样品前处理方法简单快速,回收率符合实验要求,适合于拟青霉中活性成分腺苷的含量分析.
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金水宝片治疗酒精性肝硬化26例临床观察
肝硬化是一种常见的慢性进行性弥漫性肝病,随着人们生活水平的提高,饮食结构的改变,酒精性肝硬化呈上升趋势[1].收集2001年3月～2003年5月酒精性肝硬化44例,其中治疗组26例用金水宝片治疗,对照组18例用中药丹参片治疗,报告如下.
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虫草锌对铅中毒小鼠免疫功能的影响
目的:研究虫草锌(人工虫草-古尼拟青霉与锌的复方剂)对铅中毒小鼠免疫功能的影响.方法:小鼠按200mg·kg-1·d-1皮下注射醋酸铅溶液2周,给予高低剂量虫草锌治疗,同时设空白组、EDTA组、虫草组、锌组、模型组;用半体内法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;用血清溶血素法测半数溶血值(HC5o).结果:虫草锌能明显提高巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数和HC5o,且高于虫草和锌剂组.EDTA则无明显改善作用.结论:虫草锌可以在一定程度上对抗铅中毒所致的免疫损害,效果优于虫草、锌剂和EDTA.
