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中药七叶灵颗粒逆转肺腺癌细胞耐药机制研究
目的:研究七叶灵颗粒的抗肿瘤作用与逆转肺癌细胞耐药的相关机制.方法:利用Lewis肺腺癌细胞(3LL)和Lewis肺癌耐药细胞(3LL-MDR-1)构建裸小鼠皮下移植瘤模型,按随机数字表法分为模型组、七叶灵颗粒组、化疗组和七叶灵颗粒+化疗组,并按给药时间分为A组(14 d)和B组(28 d).观察抑瘤率,Real-time Quantitative PCR检测肿瘤细胞中耐药相关基因MDR-1、MRP、LRP的mRNA表达,Western-blot检测瘤细胞中耐药相关基因MDR-1、MRP、LRP的蛋白表达.结果:3LL和3LL-MDR-1模型中七叶灵颗粒组、化疗组和七叶灵颗粒+化疗组平均瘤重均低于各模型组.在3LL模型中,七叶灵颗粒组、化疗组和七叶灵颗粒+化疗组的MDR-1、MRP、LRP基因mRNA表达水平均低于模型组,差异有统计学意义(P ＜0.05),其蛋白表达水平与模型组比较也出现下调.在3LL-MDR-1模型中,A组:七叶灵颗粒组和七叶灵颗粒+化疗组的MDR-1基因mRNA表达水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05);七叶灵颗粒+化疗组的MRP基因mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01);化疗组的MRP基因mRNA表达高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05);七叶灵颗粒+化疗组的LRP基因mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).B组:七叶灵颗粒组和七叶灵颗粒+化疗组的MDR-1基因mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P值分别为P＜0.01和P＜0.001);化疗组的MDR-1基因mRNA表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01);七叶灵颗粒组和七叶灵颗粒+化疗组的MRP基因mRNA表达水平低于模型组,其差异有统计学意义(P值分别为P＜0.05和P＜0.001);化疗组的MRP基因mRNA表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05);七叶灵颗粒+化疗组的LRP基因mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).各组蛋白表达水平的变化与mRNA表达水平变化基本吻合.结论:七叶灵颗粒具有抑制肿瘤生长,并通过下调耐药相关基因MDR-1、MRP、LRP对化疗药物起到增敏作用.
关键词： 逆转耐药 七叶灵颗粒 Lewis肺癌耐药细胞 多药耐药 -
"七叶灵"颗粒抑制H460细胞生长和转移作用靶点的实验研究
目的 观察"七叶灵"颗粒对人肺腺癌H460细胞生长的抑制作用,以及对H460细胞中COX-2、OPN和hTERT表达的影响,探讨"七叶灵"颗粒在抑制肿瘤细胞生长、延缓肿瘤细胞的转移和浸润方面的作用靶点.方法 MTT法测定"七叶灵"颗粒对人肺腺癌H460细胞生长的抑制率,根据结果 得出IC50值.用RT-PCR法检测不同浓度的"七叶灵"颗粒对COX-2、OPN和hTERT表达的影响.结果 ①"七叶灵"颗粒对人肺腺癌H460细胞的生长有抑制作用.②IC50值随时间的增加明显降低(P＜0.05).③RT-PCR法结果 显示: "七叶灵"颗粒抑制了COX-2、OPN和hTERT表达(P＜0.05).结论 "七叶灵"颗粒具有益气养精、清热解毒、消肿散结的功效.有抑制人肺腺癌H460细胞生长的作用,并通过调节COX-2、OPN和hTERT的表达,起到抑制肿瘤细胞生长,延缓肿瘤细胞转移和浸润的作用.
关键词： 七叶灵颗粒 人肺腺癌H460细胞 COX-2 OPN hTERT -
高效液相色谱法测定七叶灵颗粒中柚皮苷的含量
目的 建立用高效液相色谱法测定七叶灵颗粒中柚皮苷含量的方法.方法 使用KromasilC18色谱柱(250.0mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈∶4％冰醋酸(17∶ 83),检测波长为224 nm,流速:1 ml/min,柱温30℃.结果 该色谱条件下显示能良好分离柚皮苷峰,避免杂质干扰,柚皮苷在0.08～2.00 μg范围线性关系良好(r=0.9999),精密度相对标准偏差(RSD)=1.97％(n=5).柚皮苷平均加样回收率为102.60％,RSD=1.86％ (n =6).结论 用高效液相色谱法测定七叶灵颗粒中柚皮苷含量方法简便,重现性好,经过多批制剂检测,结果稳定,可用于七叶灵颗粒中柚皮苷的含量测定.
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七叶灵颗粒干预小鼠Lewis肺癌细胞凋亡及MMP9活性表达的研究
目的 探讨七叶灵颗粒在抑制肿瘤生长及肿瘤细胞侵袭和转移方面的作用机制.方法 将接种的C57小鼠随机分为4组:不用任何治疗的模型组(A组)、化疗组(B组)、七叶灵颗粒组(C组)和化疗加七叶灵颗粒组(D组),观察各组小鼠生存质量,比较各组小鼠的体内抑瘤作用.采用原位细胞凋亡检测试剂盒检测标本组织凋亡细胞数,用原位杂交检测,检测标本组织MMP9阳性表达数.结果 ①C组和D组小鼠的生存质量优于A组和B组.②D组的抑瘤率为74.47％,显著高于A组(P＜0.01).B、C、D组的平均瘤重显著低于A组(P均＜0.05).③原位细胞凋亡检测表明,B组、C组和D组瘤组织凋亡细胞数均显著高于A组(P均＜0.05),且D组显著高于C组(P＜0.05).④原位杂交检测表明,D组、C组和B组肺癌组织中的MMP9表达水平均显著低于A组(P均＜0.05).结论 七叶灵颗粒有一定的改善C57荷瘤小鼠生存质量、抑制Lewis肺癌细胞生长、诱导Lewis肺癌细胞凋亡及抑制MMP9活性表达的作用.
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七叶灵颗粒对晚期非小细胞肺癌化疗疗效和安全性影响的随机盲法研究
目的 分析探讨七叶灵颗粒结合化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的有效性及安全性.方法 100例Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者采用双盲随机法分为治疗组(n=50)和对照组(n=50).对照组给予化疗十七叶灵空白颗粒;治疗组采用化疗配合口服七叶灵颗粒,观察并比较两组治疗前后化疗疗效、生存质量、不良反应及免疫功能变化情况.结果 两组化疗疗效差异无统计学意义;治疗组的生存质量显著优于对照组(P＜0.05);治疗组化疗后的重度骨髓抑制、腹泻、恶心呕吐和肝肾不良反应发生率均显著低于对照组(P＜0.05),两组化疗后心功能、药物性发热及口腔炎发生率无明显差异;治疗组化疗后自然杀伤细胞水平较对照组显著升高(P＜0.05).结论 七叶灵颗粒辅助化疗可减轻化疗不良反应、提高生活质量和机体免疫功能,对晚期NSCLC化疗患者疗效和安全性俱佳.
关键词： 非小细胞肺癌(NSCLC) 七叶灵颗粒 安全性 生存质量 双盲 -
七叶灵颗粒中总黄酮含量测定及提取方法
目的:建立七叶灵颗粒剂中总黄酮的含量测定及提取方法.方法:用甲醇水浴提取2小时,采用紫外分光光度法在检测波长为276mm处测定总簧酮合量.结果:本法在3小时内吸收稳定,平均回收率办101.4%,线性范围为3.86～23.15μg/ml(r=0.999 5).结论:该方法简便、准确、稳定性好、灵敏度高,可作为七叶灵颗粒的质量控制方法之一.
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七叶灵颗粒对骨髓抑制小鼠造血系统的影响
目的 观察七叶灵颗粒对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠造血系统的影响.方法 C57BL/6小鼠40只,随机分为正常对照组、模型对照组、正常七叶灵颗粒组、模型七叶灵颗粒组,每组10只.模型对照组和模型七叶灵颗粒组采用环磷酰胺腹腔注射制备骨髓抑制模型,各组小鼠分别给予七叶灵颗粒或0.9％氯化钠溶液灌胃14d,观察生存质量,计数各组外周血常规及骨髓有核细胞.结果 模型七叶灵颗粒组小鼠生存质量、外周血常规和骨髓有核细胞数均显著高于模型对照组(P＜0.01),正常七叶灵颗粒组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 七叶灵颗粒能够改善化学治疗后小鼠生存质量,升高环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的外周血常规和骨髓有核细胞数,具有保护骨髓造血系统功能、抗化学治疗骨髓抑制的作用.
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高效液相色谱法测定七叶灵颗粒中特女贞苷的含量
目的:建立用高效液相色谱法测定七叶灵颗粒中特女贞苷含量的方法.方法:使用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(16:84),检测波长为224 nm,流速:1 ml·min-1,柱温30℃.结果:该色谱条件下显示能良好分离特女贞苷峰,线性范围为2.5～50.0 μg·ml-1(r=0.999 3),平均回收率为101.23%,RSD=2.15%(n=6).结论:该法简便,重复性好,可用于七叶灵颗粒中特女贞苷的含量测定.
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七叶灵颗粒质量标准研究
目的：建立七叶灵颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对黄芪、柚皮苷进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对黄芪甲苷进行含量测定。结果：定性鉴别阴性无干扰,分离度高；黄芪甲苷线性范围为0.166~1.104μg(r=0.9991),平均回收率为97.27%,RSD为1.3%(n=6)。结论：所建标准可以用于七叶灵颗粒的质量控制。
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七叶灵颗粒结合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究
目的 分析探讨七叶灵颗粒结合化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效.方法 将150例Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者随机分为治疗组(化疗+七叶灵颗粒)和对照组(单纯化疗)各75例.对照组仅给予化疗,治疗组采用化疗配合口服七叶灵颗粒,观察并比较两组化疗疗效、生存质量、生存期和化疗前后临床症状体征变化情况.结果 两组化疗疗效差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗组的生存质量显著高于对照组(P＜0.01)；治疗组中位生存期21.6个月,显著高于对照组的13.7个月(P＜0.05)；治疗组临床症状体征较对照组改善明显(P＜0.05).结论 七叶灵颗粒结合化疗能有效改善晚期非小细胞肺癌患者的生存质量、延长生存期和改善临床症状体征,可作为晚期肺癌带瘤患者长期维持治疗的理想途径.
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HPLC法同时测定七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷的含量
目的:建立同时测定七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-4％冰醋酸(17∶83,V/V),检测波长为224nm,流速为1 mL·min-1,柱温为30℃.结果:特女贞苷与柚皮苷的进样量分别在0.04～1.00、0.08～2.00 μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r均为0.999 9)；平均加样回收率分别为101.17％和100.32％,RSD分别为2.10％和2.17％(n均为6).结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷的含量测定.
