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载药蒙脱石壳聚糖纳米粒的制备及其生物学性能评价
目的:选择盐酸倍他洛尔为模型药物,制备新型镶嵌蒙脱石载体的离子交换给药系统载药蒙脱石壳聚糖纳米粒(Mt-BH/CS NPs),为新型的眼部混悬剂开发提供参考.方法:采用离子凝胶法制备Mt-BH/CS NPs,利用正交试验优化处方,选取壳聚糖质量浓度,多聚磷酸钠(TPP)浓度、壳聚糖与TPP质量比及盐酸倍他洛尔质量浓度为考察因素,考察Mt-BH/CS NPs的包封率、载药量及体外释放,通过黏附性试验和人永生化角膜上皮细胞的细胞毒性试验考察Mt-BH/CS NPs的生物学性质.结果:佳处方工艺为壳聚糖质量浓度1.5 g·L-1,TPP质量浓度1.2 g·L-1,壳聚糖-TPP(10∶1),盐酸倍他洛尔质量浓度2.0 g·L-1;Mt-BH/CS NPs平均包封率36.13％,平均载药量14.50％,10h累积释放率达82.23％.Mt-BH/CS NPs相对于盐酸倍他洛尔水溶液的人永生化角膜上皮细胞毒性较小;Mt-BH/CS NPs与黏膜混合后Zeta电位下降,表明其对黏膜有一定的黏附性.结论:Mt-BH/CS NPs载药量较高、体外释放缓慢、细胞毒性小、生物黏附性大,可望用于眼部疾病的治疗,以期改善新型给药系统的释放性能并增强与眼部的相互作用,从而提高药物的眼部生物利用度并减少不良反应.
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多聚磷酸钠与聚丙烯酸双向调控单层重组胶原模型的仿生矿化
目的 探讨多聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,STTP)与聚丙烯酸对单层重组Ⅰ型胶原模型的仿生矿化诱导作用,为STTP与聚丙烯酸在牙本质和骨胶原矿化诱导的扩展应用提供依据.方法 采用牛表皮Ⅰ型胶原在圆形盖玻片与透射电镜镍网表面建立单层重组胶原模型.联合应用组样本经含STTP与聚丙烯酸的模拟体液-硅酸盐水门汀树脂矿化系统诱导矿化.在矿化诱导第12、24、48和72h取出联合应用组样本(每个时间点样本量为18),用扫描电镜和透射电镜定性分析胶原微观形态学变化,并与矿化诱导72h、不含STTP和聚丙烯酸的空白组(样本量为18),以及仅含STTP或聚丙烯酸的对照组(STTP组、聚丙烯酸组,样本量均为18)进行比较.结果 空白组和2个对照组均未见胶原纤维内矿化现象.联合应用组在STTP与聚丙烯酸的协同诱导下矿化12 ～24 h后,重组胶原纤维表面可见纳米级球形电子致密物沉积;随着矿化时间延长,纤维表面无定形电子致密物逐渐消失,代之以胶原纤维内呈高度迭序排列的磷灰石纳米微晶,使纤维呈现典型的周期性横纹结构.结论 在模拟体液-硅酸盐水门汀树脂存在的情况下,联合应用STTP和聚丙烯酸能成功诱导磷灰石纳米微晶在不含非胶原蛋白的重组胶原内有序沉积,实现胶原纤维内矿化.
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牙本质混合层原位再矿化模型的构建及作用
目的：构建牙本质混合层原位再矿化诱导模型，并从微观形态学角度探讨其矿化效果，为仿生再矿化技术的临床应用提供实验依据。方法采用5 mm ×5 mmⅠ型胶原海绵块作为3D胶原支架，结合电镜观察和傅里叶红外光谱分析技术，快速评估成核诱导物多聚磷酸钠（STTP）和硅酸盐水门汀树脂的仿生矿化诱导潜能。在此基础上，将仿生矿化技术与牙本质粘接程序结合，以STTP作为治疗性底剂应用于酸蚀脱矿牙本质面，在完成常规粘接处理后以硅酸盐水门汀树脂为洞衬剂，构建临床相关的混合层原位再矿化模型。采用透射电子显微镜观察矿化1～3个月后树脂牙本质粘接界面再矿化区域的分布和再矿化程度。结果矿化诱导28 d后的3D胶原样本，纤维内可见磷灰石纳米晶体的有序沉积，纤维重现了与天然矿化胶原结构类似的横纹特征。红外光谱分析结果显示，在900～1200 cm-1和500～600 cm-1区域，矿化胶原基质出现与纯羟基磷灰石特征峰相吻合的吸收峰，提示矿化胶原中形成的无机物是磷灰石。混合层原位矿化诱导1～3个月后，混合层内可见纤维内再矿化现象的存在，纳米晶体在胶原纤维内呈现迭序排列特征。结论在牙体粘接修复过程中，以矿化诱导物STTP和硅酸盐水门汀树脂作为治疗性底剂和洞衬剂，能使混合层内树脂渗透不良的胶原基质发生纤维内矿化。通过混合层原位再矿化模型的成功构建，初步证实仿生矿化技术应用于临床树脂牙本质粘接界面损伤修复的可行性，建立了研究方法学，为仿生再矿化技术的终临床应用提供充分的科学依据。
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磷酸化壳聚糖/无定形磷酸钙复合物与多聚磷酸钠对脱矿牙本质仿生再矿化的影响
目的 探讨磷酸化壳聚糖/无定形磷酸钙(P-chi/ACP)与多聚磷酸钠(TPP)对脱矿牙本质体外仿生再矿化的影响,为深龋再矿化治疗提供思路.方法 将32颗中度磨耗的离体磨牙制成大小相同的完全脱矿牙本质片32个,其中2个样品用于透射电镜表征,另30个分成2组:P-chi/ACP+TPP组(n=15)经TPP预处理后,固定在放置有P-chi/ACP的体外模型上;P-chi/ACP组(n=15)不经过TPP处理.所有样品根据是否与P-chi/ACP接触分为实验侧与对照侧.处理1周后,进行显微计算机断层扫描定量分析密度变化、透射电子显微镜定性分析微观形态变化.结果 显微计算机断层扫描结果显示P-chi/ACP+TPP组的实验侧灰度值高于对照侧(125.42±12.16 vs 96.96±10.56,t=7.124,P＜0.01),P-chi/ACP组中的实验侧灰度值高于对照侧(119.39±8.64 vs 105.27±9.42,t=5.329,P＜0.01).透射电子显微镜显示P-chi/ACP+TPP组有纤维内横纹样结构出现,提示脱矿牙本质片实现了其主要成分Ⅰ型胶原的分级化纤维内矿化;P-chi/ACP组未见横纹样结构.结论 单独利用P-chi/ACP能够提高脱矿牙本质的密度,但共同利用TPP与P-chi/ACP复合物才能实现完全脱矿牙本质的仿生再矿化.
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重组人血管内皮抑素壳聚糖纳米粒的制备及体外评价
采用离子凝胶法制备重组人血管内皮抑素(商品名:Endostar)壳聚糖纳米粒,并对纳米粒的载药量、包封率、粒径、形态、体外释放、体外活性及Endostar结构的完整性进行考察.制得的Endostar壳聚糖纳米粒载药量为(10.5±1.1)%,包封率为(81.3±1.8)%;平均粒径为137 nm,为球形结构;体外释放10 d累积释放达到80%.凝胶电泳实验说明Endostar结构完整,制备与释放过程结构均未被破坏;人脐静脉内皮细胞增殖实验说明Endostar纳米粒仍保留原有的生物活性.结果表明壳聚糖作Endostar的载体,制得的纳米粒具有合适的粒径及包封率,并能达到缓释作用,不会破坏Endostar 的结构,同时保留原有的生物活性.
关键词： 重组人血管内皮抑制素 多聚磷酸钠 壳聚糖 纳米粒 -
多聚磷酸钠促进成骨细胞中骨桥蛋白的基因表达
目的:研究成骨细胞中(ROSI7/2.8)多聚磷酸钠(Sodium Phosphate Glass Type 25,SPG25)对骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因表达的影响.方法:125?M SPG25刺激ROS17/2.8细胞0h、3h、6h、12h后,用Northern印迹杂交观察0PN mRNA的表达.结果:125?M SPG25刺激ROS17/2.8细胞12h后OPN mRNA杂交条带明显增强.结论:多聚磷酸钠SPG25增强了ROS17/2.8细胞中骨桥蛋白的基因表达.
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牙膏对牙齿表面润湿性影响的研究
目的:研究比较佳洁士皓爽白牙膏、防蛀牙膏对离体牙釉质表面润湿性的影响.方法:选择近期拔除的切牙15个,在唇面磨出一个4×4 mm2的釉质平面,将牙齿试样分为3组,每组5个.对釉质表面进行各种处理,并用佳洁士皓爽白牙膏、防蛀牙膏刷牙,然后分别用蒸馏水、人工唾液和人唾液作为湿润液测定釉质表面接触角.结果:粗糙釉质表面的接触角小于光滑釉质;用皓爽白、防蛀牙膏刷牙均可显著降低液体在釉质表面的接触角;刷牙后,皓爽白牙膏降低唾液在光滑釉质表面接触角的效果优于防蛀牙膏.结论:含有多聚磷酸钠的佳洁士皓爽白牙膏在提高釉质表面润湿性方面优于一般防蛀牙膏,能明显提高刷牙者牙齿滑爽的程度.
